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血清蛋白質(zhì)醋酸纖維素薄膜電泳(留存版)

  

【正文】 ? 計(jì)算公式: ? 各組分蛋白質(zhì) %=Ax/At*100 ( Ax:各組分蛋白質(zhì)的吸光度。(注:點(diǎn)樣量不宜過多?。? 這是關(guān)鍵步驟,印章法加樣時(shí),動(dòng)作應(yīng)輕、穩(wěn),用力不能太重,以免將薄膜弄破或印出凹陷而影響電泳區(qū)帶分離效果。醋酸纖維素是纖維素的醋酸酯,由纖維素的羥基經(jīng)乙酰化而成。電泳遷移率最大的是白蛋白,其后依次為 α α β和 γ 球蛋白。電壓 15V/cm。② 蛋白組分分離不佳;③染色后蛋白質(zhì)中間著色淺;④薄膜透明不完全;⑤透明膜上有氣泡。 ② 掃描定量:將已透明的薄膜放入全自動(dòng)光密度計(jì)或其他光密度計(jì)暗箱內(nèi),進(jìn)行掃描分析。 3. 點(diǎn)樣 :用滴管吸取待測(cè)血清一滴于玻璃片上,用點(diǎn)樣器或?qū)? X光軟片末端處蘸取少許樣品,垂直輕?。ㄑ杆倬鶆颍┑奖∧c(diǎn)樣線上,使血清完全滲透到薄膜內(nèi),形成一定寬度、粗徐均勻的直線。 ? 醋酸纖維素薄膜電泳:以醋酸纖維素薄膜為支持物的電泳。染色后經(jīng)透明處理可直接在光密度計(jì)上掃描定量。通電 50分鐘左右,使電泳區(qū)帶展開 3~。 臨床意義 ? 血清蛋白通過醋酸纖維素薄膜電泳,通常可以分離得到( Alb)、 α 、 β 、 γ球蛋白。 用此法透明的各蛋白質(zhì)區(qū)帶鮮明,薄膜平整,可供直接掃描和永
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