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堿性磷酸酶米氏常數(shù)的測定-3學時(留存版)

2025-02-20 06:38上一頁面

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【正文】 過堿性磷酸酶米氏常數(shù)的測定,了解其測定原理、方法及意義。本實驗以磷酸苯二鈉為底物,由堿性磷酸酶催化水解,生成游離酚和磷酸鹽。 各種酶的 Km值范圍很廣。林 貝 (Lineweaver Burk)根據(jù)MichaelisMenten方程,推導出如下方程式,即: 1/V = ( Km +[S]) / Vmax[S]或 1/V = Km/ Vmax當?shù)孜餄舛仍黾拥侥撤N程度時,反應(yīng)速度會達到一個極限值,即最大反應(yīng)速度(Vmax), 底物濃度與酶促反應(yīng)速度的這種關(guān)系可用 MichaelisMenten方程式表示。 (4)各管分別加入 % 4氨基安替比林 , % 鐵氰化鉀 ,充分混勻,放置 10分鐘,以 6號空白管作對照,于 510nm波長處比色測定。 [結(jié)果與計算 ]
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