【正文】 IC的清除 。 ? 7． 過氧化物歧化酶 ? RBC內(nèi)含有 SOD（ 超氧化物歧化酶 ） ， 該酶是一類重要的氧自由基清除酶 ， 使 O2（ 超氧化物陰離子自由基 ） 變?yōu)?H2O2， O2分子 ， 通過清除氧自由基 O2， 使細胞和組織免受損害 ， 保護和增強免疫細胞的免疫功能 。 ? ④ CR1簇狀分布優(yōu)點：可使它與 C3b包被的 IC結(jié)合位點呈多價性 ， 連接更為牢固 。 ? 1988年威瑞拉 （ Vireal） 用單抗標記法證明紅細胞膜有 CR3。 ? 1982年郭峰證明 （ 體外 ） RBC可粘附補體調(diào)理過的酵母菌 ， 并證明 SLE， 腫瘤患者紅細胞免疫粘附酵母菌的能力低下 ， 該實驗證明 RBC可直接粘附補體調(diào)理過的病原體 。 ? Brown和 Broom：不同人的 RBC對錐蟲的粘附能力高低不同 。 這一理論提出刷新了人們對RBC的認識只停留在 CO O2呼吸載體的概念上 ， 開拓了免疫學的新領域 。 ? 1981年美國生殖免疫學家西格爾 （ ） 在前人研究基礎上發(fā)現(xiàn) ? （ 1） RBC有多種免疫功能 ? （ 2） RBC可粘附胸腺細胞 ? （ 3） 血清中存在紅細胞免疫粘附抑制因子 ，預見了血清中存在紅細胞免疫調(diào)節(jié)系統(tǒng) 。 推測是由于 RBC促進 T細胞 IL2受體表達和增強對外源性 IL2應答的敏感度所致 ， 可能與增加 B細胞生長因子或分化因子有關 。 ? CR2是 C3d的受體 ， C3d是 C3b裂解的終末產(chǎn)物 。 DAF主要作用于 Bb及 C2a， 而 CR1主要作用于 C3b片段 ， DAF結(jié)合 C3b的能力比 CR1小得多 。 ? 該實驗結(jié)果提示新生兔的 RBC有識別和儲存異種抗原物質(zhì)的能力 。在培養(yǎng)瓶內(nèi)加入 RBC可促進 LAK細胞的產(chǎn)量和活性 ， RBC數(shù)與淋巴細胞數(shù)為 100:1時 IL2激活的 LAK細胞活力最大 。 當比例失調(diào) ， 紅細胞免疫功能低下或紊亂 。l， 混勻 ， 37℃ 水浴 30min，取出加 ％ 戊二醛 1滴 ， 輕輕混勻 ， 室溫 5— 10min， 水平抹片 ， 低溫干燥 ， 瑞氏染色 ， 濕片鏡檢 ， 以一個紅細胞上結(jié)合兩個或兩個以上酵母菌為陽性細胞 ，計 200個紅細胞求陽性率 。 ? 4． 意義 ? 基本同 RBC－ C3b受體花環(huán)與 RBC— IC花環(huán) 。 ? ：日本產(chǎn) ， 型號 CH— B145－ T。 ） ， 與惡性腫瘤患者血清中紅細胞免疫促進因子下降 、抑制因子上升 、 紅細胞免疫功能低下相一致 。 ? 二 ． 預備試驗： ? （ 1） 被調(diào)節(jié)細胞懸液制備：取凍干被調(diào)節(jié)細胞 1支 ， 用含 1％ 小牛血清的 HBSS一H液洗 2次 ， 每次 2021r／ min離心 8min，用 HBSS— H恢復體積 1x 107／ ml細胞懸液備用 。 * 177。 70℃ 保存 。 ? 放射碘標記抗人 IgG抗體法：將一定濃度的待測紅細胞 、 AHG和人補體臵 37℃ 共同作用 30分鐘 ， 使 AHG通過補體 C3b結(jié)合到紅細胞膜 C3b受體上 ， 洗滌過后再加入碘標記的兔抗人 IgG，4℃ 作用 30分鐘 ， 使碘標抗體結(jié)合到 AHG上 ，然后將紅細胞洗過 ， 測其放射性 ， 結(jié)果用待測紅細胞吸收的放射碘標記抗人 IgG量與正常人紅細胞吸收量之比的平均值表示 。l同時加人四孔中 （ 每孔約 5 106個細胞 ） ， 室溫臵 30分鐘 。l（ ／ ml） 冰育 40分鐘 。 ? （ 3） 紅細胞免疫功能紊亂與亢進： ? 其表現(xiàn)為紅細胞 C3b受體花環(huán)率升高 ，紅細胞免疫復合物花環(huán)率亦升高或變化不顯著 。 從目前已報導的資料來看 ， 臨床上大部分和紅細胞免疫功能有關 。 該法不需要同位素標記 ， 也避免了大試管 ELISA法底物使紅細胞溶解的缺點 。 該法避免了一般單抗法放射標記的過程 。 用兔抗羊紅 IgM抗體致敏羊紅細胞 、 加血清 37℃ 作用 10分種 ， 形成抗原抗體補體復合物 ， 洗過二遍用 GVB配成 1％ 的懸液作指示細胞 。由于人紅細胞平均直徑 7－ 8181。 177。1994年 ， 劉景田等在 Siegel和郭峰研究的基礎在 ， 發(fā)現(xiàn)血清中的調(diào)節(jié)因子不僅對紅細胞上的 CRI， 有調(diào)節(jié)作用 ， 而且對粒細胞 (淋巴細胞主要指 B淋巴細胞 )上的 CRI；也有同樣的調(diào)節(jié)作用 ， 并且調(diào)節(jié)幅度基本一致 ， 故將血清中的調(diào)節(jié)因子稱為 CRI免疫調(diào)節(jié)因子 ， 其中具有正調(diào)節(jié)作用者稱為 CRI免疫調(diào)節(jié)促進因子 ， 具有負調(diào)節(jié)作用者稱為 CRI免疫調(diào)節(jié)抑制因于 。 ） ， 與惡性腫瘤患者紅細胞免疫功能低下是一致的 。 生理鹽水管涂片高倍鏡計數(shù) ， 紅細胞結(jié)上 2個或 2個以上酵母菌為一朵花環(huán) 。 計數(shù) 200個 RBC， 算出各自花環(huán)率 。 ? 劉景田法 ? （ l） 補體致敏 YS酵母凍干試劑和補體未致敏 YS酵母凍干試劑 ? 按說明書要求溶解 、 洗滌 ， 配制濃度為l 108／ ml。 ? 8． 紅細胞參與補體活性的調(diào)控 ? 補體系統(tǒng)通過免疫細胞上補體受體在調(diào)節(jié)細胞和體液免疫中處于樞紐地位 。 紅 細胞 通過 LAF3/CD2 以及 CR1CIC/TCR對 T細胞粘附 ， 提呈抗原 ， 激活T細胞增殖而起抗原提呈細胞作用 。 ? 在肝脾血流降速時， RBC與固定巨噬細胞比例劇降為 10:1— 5:1時，吞噬細胞上CR CR FCR對紅細胞上 IC中的 C3b、iC3b總親和力大于紅細胞 CR1的親和力時，微循環(huán)中的 AgAbC復合物才能從 RBC轉(zhuǎn)向巨噬細胞，巨噬細胞便將紅細胞免疫粘附的復合物奪下，并將其免疫粘附吞噬，紅細胞釋放回血液循系統(tǒng)，不被吞噬，繼續(xù)執(zhí)行 CIC的功能。 ? 因此 ， LFA3與 CD2作用是免疫細胞間相互協(xié)調(diào)作用 ， 淋巴細胞活化 ， 產(chǎn)生淋巴因子的分子基礎 。 現(xiàn)已發(fā)現(xiàn)紅細胞有許多與免疫有關的物質(zhì)如 CRCR CD5 CD5 DAF， SOD酶等 。 ? 1987年魯杰利斯 （ ） 發(fā)現(xiàn)自身紅細胞加入外周血單個核細胞培養(yǎng)管中可增強原發(fā)性和繼發(fā)性特異抗體應答 。 ? 1963年：尼雪俄考 （ K. Nishioka） 證實紅細胞這種免疫粘附現(xiàn)象是通過人紅細胞膜 C3受體來實現(xiàn) ， 現(xiàn)稱 C3受體為第一補體受體 （ Cplement Receptor Typel, CR1） 。 ? 本世紀初 ， Landsteiner采用免疫學方法在人類紅細胞與血液混合試驗中發(fā)現(xiàn)了人類 ABO血型系統(tǒng) 。 他用正常人 RBC、 WBC與相應抗體致敏的 Ⅰ 型肺炎雙球菌進行培養(yǎng) ，發(fā)現(xiàn)肺炎雙球菌可粘附于正常人 RBC表面并被 WBC吞噬 ， 其吞噬率達 60%， 未加抗體組 （ 4%） 和未加 RBC組 （ 18%） ，推測 RBC膜存在免疫粘附受體 ， 免疫復合物同該受體結(jié)合可促進 WBC的吞噬作用 。 ? 1986年郭峰通過體外對比實驗證明 RBC可粘附補體調(diào)整的各種腫瘤細胞 ， 并證明腫瘤患者RBC免疫粘附腫瘤細胞的下降 ， 發(fā)現(xiàn) RBC可直接粘附未經(jīng)補體調(diào)理過的腫瘤細胞 ， 其機理不明 。 ? 1994年劉景田發(fā)現(xiàn) CR1免疫調(diào)節(jié)因子 ， 其中包括 CR1免疫調(diào)節(jié)促進因子和 CR免疫調(diào)節(jié)抑制因子 。 ? 2． 淋巴細胞功能相關抗原 3（ LFA3） ? 為紅細胞膜上的一種蛋白分子 ， 是 CD2的天然配體 ， 廣泛分布于紅細胞 、 T淋巴細胞 ， B淋巴細胞 、 單核細胞 、 中性粒細胞 ，血小板等表面是由 14KD和 19KD二條單鏈多肽和糖基組成的糖蛋白 ， 分子量為 5570KD。 （ 三 ） 紅細胞的免疫功能 ? 1． 紅細胞免疫粘附 、 攜帶及清除抗原異物的功能 ? 免疫粘附：指細菌 、 寄生蟲 、 梅毒螺旋體 、 胸腺細胞 、 腫瘤細胞等抗原物質(zhì)激活補體或這些抗原與相應的抗體結(jié)合激活補體形成復合物粘附于血細胞 （ 紅細胞 、 白細胞或血小板 ） 上 。RBC具有雙重免疫粘附特性 ， 即 RBC不僅與 AgAbC互相粘連 ， 且可與自體的胸腺淋巴細胞和 T淋巴細胞粘附 ， 形成自身玫瑰花結(jié) ， 這種雙重免疫粘附 ， 在 IC與 T淋巴細胞之間起著橋梁作用 ， 使抗原與 T淋巴細胞靠近 ， 從而將抗原提呈給 T淋巴細胞 ， 增加 T淋巴細胞捕捉抗原的機會 ， 從而擴大 T細胞依賴的免疫應答 。 ? 7． 紅細胞清除陰離子的作用 ? 超氧陰離子 （ O2） 是生物體內(nèi)主要的自由基（ FR） ， 在許多情況下 ， 對機體是有害的 ， 是導致炎癥 、 衰老及癌變等的原因之一 。 一個紅細胞結(jié)上 2個或 2個以上酵母菌為一朵花環(huán) 。 該兩項試驗可作為臨床上免疫性疾病的輔診 、 判斷預后 、 療效觀察等指標使用；可做為器官移植 ， 疾病發(fā)病機理與藥物篩選紅細胞免疫指標使用；可做為中醫(yī)中藥免疫學研究指標使用 。紅細胞呈紅色 ， 酵母菌呈蘭色 。 ＞ ＞ ＞ ? 從上表可以看出 ， （ 1） 用一步法對 52例惡性腫瘤患者紅細胞免疫調(diào)節(jié)因子的檢測結(jié)果與兩步法 （ 原方法 ） 檢測結(jié)果基本相一致 ， 二者無顯著性差異 （ P＞ 0． 05） ， 說明將血清 、 O型 RBC和補體致敏 Ys酵母菌三者依次加人進行一次孵育與三者分別加入進行兩次孵育所得結(jié)果是一樣的 ， 說明一步法是可行的 ， 能夠代替兩步法 。 ? 4． 意義 ? 為紅細胞免疫自身調(diào)控機理研究提供簡便有效的手段；對藥物作用免疫學機理和疾病發(fā)病機理研究以及對機體紅細胞免疫功能變化分析都有其重要價值 。 * * 177。 所有細胞均用改良 Hanks液洗三遍配成所需濃度 。 以發(fā)生血凝的 AHG的最高稀釋度的倒數(shù)為 IAHA的效價 ， 表示 C3b受體的活性 ， 此法敏感性與特異性均高 。 該法特異性強 。l加入各孔 ， 22℃孵育 60分鐘 ， 再洗三次 ． 最后將 200181。 ? （ 8） 除上述方法外 ， 還可根據(jù)紅細胞膜上 C3b受體在血清 I因子滅活 C3b時起輔因子的作用采用酶活性測定法 （ Enzymic assay， EA） ：將人 C3b分離出來用 125碘標記 ， 加入固定濃度的 I因子 ， 再加人待測紅細胞或紅細胞膜的提取物 ，37℃ 下共同作用一段時間 ， 中止反應后 ， 用SDS聚丙烯酸胺凝膠電泳 ， 用放射照相術觀察凝膠上碘標蛋白的裂解圖像 ， 然后將凝膠切成小條測其放射性 。在治療上，應用胸腺素、轉(zhuǎn)移因子、 ILγ 干擾素以及多糖類中藥等都可提高紅細胞免疫功能，促進機體恢復正常。l冰浴30分種 ， 洗二遍 。 棄去戊二醛 ， 加 200181。 ? 放射碘標記二聚體