【正文】 濟性狀如生殖、生長、抗性 的功能基因組和分子設(shè)計育種的基礎(chǔ)方面， 重點解析這些主要經(jīng)濟性狀的基因調(diào)控網(wǎng)絡(luò)，開拓關(guān)鍵技術(shù)，其主要研究內(nèi)容包括： 1） 魚類生殖基因調(diào)控網(wǎng)絡(luò) 及其分子設(shè)計育種的基礎(chǔ)研究 采用基因轉(zhuǎn)移、 morpholino 介導(dǎo)的基因敲降等技術(shù)，配合整體原位雜交、細胞示蹤和免疫熒光定位等方法，重點解析魚類生殖質(zhì) (germ plasm)的基因調(diào)控網(wǎng)絡(luò)；揭示重要生殖調(diào)控基因在魚類卵母細胞成熟和卵 胚轉(zhuǎn)換中的功能作用及其調(diào)控機制；探討魚類配子發(fā)生過程中雙親特異性甲基化在生殖調(diào)控中的作用及其及其調(diào)控網(wǎng)絡(luò)；通過大規(guī)模 RFLP 分析等呈現(xiàn)技術(shù)，篩選雌雄個體間性別特異的 DNA 片段標記，進而通過 Genomic Walking 克隆分離與性別決定和性別分化相關(guān)基因；揭示魚類性別決定和性別 分化的基因調(diào)控網(wǎng)絡(luò)及其作用機理；篩選鑒定出可用于魚類分子設(shè)計育種的性別特異表達基因和分子標記；開拓生殖調(diào)控基因和分子標記用于魚類分子設(shè)計育種的可行性途徑。 3) 新 穎 的學(xué)術(shù)思路， 起到前瞻性、戰(zhàn)略性和引領(lǐng)性作用 ： 本項目瞄準了國際上有關(guān)魚類分子設(shè)計育種的難點和熱點問題，試圖直接通過解析魚類生殖、生長和抗性的基因調(diào)控網(wǎng)絡(luò)來闡明其調(diào)控機理，篩選鑒定可用于魚類分子設(shè)計育種的關(guān)鍵基因和分子標記，由此創(chuàng)建魚類分子設(shè)計育種的關(guān)鍵技術(shù)及其技術(shù)體系，對 指導(dǎo)并推動我國水產(chǎn)業(yè)的可持續(xù)健康發(fā)展具有重要的前瞻性、戰(zhàn)略性和引領(lǐng)性作用。 承 擔(dān) 單 位 ： 中國科學(xué)院遺傳與發(fā)育研究所、中國科學(xué)院海洋研究所 課題負責(zé)人 ： 陳良標 主要學(xué)術(shù)骨干 ： 沈玉、曹立雪、譚訓(xùn)剛、尤鋒 經(jīng)費比例： 10% 課題 5 魚類數(shù)量性狀多基因聚合育種技術(shù)研究 主要研究目標： 建立魚類數(shù)量性狀基因調(diào)控網(wǎng)絡(luò)信息整合技術(shù)；揭示魚類經(jīng)濟性狀主效基因的圖譜定位、同線性和性狀關(guān)聯(lián)性關(guān)系；闡明魚類經(jīng)濟性狀 主效基因轉(zhuǎn)錄組以及在群體和家系中的功能；確定魚類經(jīng)濟性狀主效基因標記及基因不同組合的遺傳效應(yīng)，評估其育種效率；創(chuàng)建可用于魚類分子設(shè)計育種的多基因聚合育種的技術(shù)路線。 本文來自網(wǎng)絡(luò)，請不要使用盜版，謝謝閱讀 版權(quán)所有 2020 本文來自網(wǎng)絡(luò)，請不要使用盜版，謝謝 閱讀 版權(quán)所有 201 我愛朱丹老婆 本文來自網(wǎng)絡(luò)，請不要使用盜版，謝謝閱讀 版權(quán)所有 2020 本文來自網(wǎng)絡(luò)，請不要使用盜版，謝謝閱讀 版權(quán)所有 我愛朱丹老婆 本文來自網(wǎng)絡(luò)，請不要使用盜版，謝謝閱讀 版權(quán)所有 2020 本文來自網(wǎng)絡(luò)，請不要使用盜版，謝謝閱讀 版權(quán)所有 我愛朱丹老婆 本文來自網(wǎng)絡(luò)，請不要使用盜版，謝謝閱讀 版權(quán)所有 2020 本文來自網(wǎng)絡(luò)，請不要使用盜版，謝謝閱讀 版權(quán)所有 2020 本文來自網(wǎng)絡(luò)，請 不要使用盜版，謝謝閱讀 版權(quán)所有 我愛朱丹老婆 本 文 來 自 網(wǎng) 絡(luò) ， 請 不 要 使 用 盜 版 ， 謝 謝 閱 讀 版權(quán)所有 2020 本文來自網(wǎng)絡(luò)，請不要使用盜版，謝謝閱讀 版權(quán)所有 2020 本文來自網(wǎng)絡(luò)，請不要使用盜版，謝謝閱讀 版權(quán)所有 2020 本文來自網(wǎng)絡(luò)，請不要使用盜版，謝謝閱讀 版權(quán)所有 我愛朱丹老婆 本文來自網(wǎng)絡(luò)，請不要使用盜版，謝謝閱讀 版權(quán)所有 2020 本文來自網(wǎng)絡(luò)，請不要使用盜版，謝謝閱讀 版權(quán)所有 2020 本文來自網(wǎng)絡(luò)，請不要使用盜版 ，謝謝閱讀 版權(quán)所有 我愛朱丹老婆 本文來自網(wǎng)絡(luò)，請不要使用盜版，謝謝閱讀 版權(quán)所有 2020 本文來自網(wǎng)絡(luò)，請不要使用盜版，謝謝閱讀 版權(quán)所有 我愛朱丹老婆 本文來自網(wǎng)絡(luò)，請不要使用盜版，謝謝閱讀 版權(quán)所有 2020 本文來自網(wǎng)絡(luò)，請不要使用盜版，謝謝閱讀 版權(quán)所有 我愛朱丹老婆 本文來自網(wǎng)絡(luò)，請不要使用盜版，謝謝閱讀 版權(quán)所有 2020 本文來自網(wǎng)絡(luò)，請不要使用盜版，謝謝閱讀 版權(quán)所有 我愛朱丹老婆 我愛朱丹老婆 網(wǎng)絡(luò)賺錢 群： 40635958 。 承擔(dān)單位： 中國科學(xué)院水生生物研究所、中國水產(chǎn)科學(xué)研究院 黑龍江水產(chǎn)研究所 課題負責(zé)人 ： 童金茍 主要學(xué)術(shù)骨干 ： 孫效文 、王忠衛(wèi)、俞小牧、張驍鋒、耿波、賈智英、梁利群 經(jīng)費比例： 16% 課題 6 基于魚類分子設(shè)計育種的基因操作技術(shù)研究 主要研究目標： 創(chuàng)制基于蛋白分子設(shè)計、 BAC 克隆、轉(zhuǎn)座子系統(tǒng)、 Cre/lox 基因靶位操作的穩(wěn)定、高效的魚類轉(zhuǎn)基因技術(shù)；優(yōu)化和完善基于蛋白質(zhì)鋅指結(jié)構(gòu)的魚類基因快速敲除系統(tǒng)；揭示性腺特異小 RNA 在基因表達調(diào)控中的新途徑，闡明 piRNA 與互作蛋白及其調(diào)控途徑；創(chuàng)建基于破壞原生殖細胞發(fā)生或維持的具有遺傳安全的魚類轉(zhuǎn)基因技術(shù)體系；研制出持續(xù)激 活的生長激素受體基因的轉(zhuǎn)基因魚；揭示持續(xù)轉(zhuǎn)激活生長激素受體基因與轉(zhuǎn)生長激素基因的轉(zhuǎn)基因魚的效應(yīng)及其信號通路的調(diào)控差異。本項目的研究內(nèi)容是在這些基礎(chǔ)上進一步凝聚而來，目標更為明確。 3） 魚類抗性的基因調(diào)控網(wǎng)絡(luò)和分子設(shè)計育種的基礎(chǔ)研究 利用我們自主建立的分離魚類抗病毒基因的細胞模型，重點解析魚類干擾素系統(tǒng)和抗菌肽基因的調(diào)控網(wǎng)絡(luò)和抗病作用機理；揭示重要魚類病原與宿主免疫系統(tǒng)的相互作用及其作用機制；探討在魚類抗病免疫反應(yīng)中主效基因調(diào)控網(wǎng)絡(luò)、功能和抗病機理； 研制具有抗病性狀的雌核發(fā)育系和近交家系；鑒別出與魚類抗病性狀密切相關(guān)的分子標記和等位基因及其抗病 QTL 定位；建立魚類抗病分子設(shè)計育種的理論和技術(shù)方法，開拓其可行性途徑。將含有這些基因的真核表達載體，或在大腸桿菌中表達出的蛋白，注射到胚胎中或轉(zhuǎn)染到細胞中，觀察生物學(xué)效應(yīng)； 11. 將目的基因的反義 RNA或其蛋白的抗體注射到胚胎中，觀察生物學(xué)效應(yīng)； 12. 對生殖調(diào)控基因而言，設(shè)立人工性反轉(zhuǎn)實驗，分別提取不同性反轉(zhuǎn)階段實驗組和對照組性腺的 mRNA 和蛋白，采用上述方法研究基因表達的時序性； 13. 對生長和生殖功能基因而言，合成重要調(diào)控生長生殖基因的結(jié)構(gòu)類似物或表達具有生物活性重組蛋白，取魚類的下丘腦、垂體、肝臟和性腺，通過碎片灌流和細胞孵育等離體研究方法，或直接注射結(jié)構(gòu)類似物或重組蛋白，采用放射免疫測定等方法研究其活性，測定各種靶組織、血清中調(diào)控生殖生長激素的含量，分析這些生長調(diào)控因子和生殖調(diào)控因子的相互作 用及其信號傳遞機制，分析它們對魚類生殖和生長的影響； 14. 通過體外合成小分子 RNA，建立魚類系統(tǒng)中適用于實驗室日常工作的、簡潔、高效的 siRNA 技術(shù)平臺；通過克隆獲得的魚類來源的啟動子構(gòu)建針對草魚出血病病毒的 siRNA 載體，建立抗病轉(zhuǎn) siRNA 基因魚模型；通過 Creloxp 介導(dǎo)的系統(tǒng)進行魚類胚胎中的條件基因打靶研究；建立魚類胚胎干細胞和生殖干細胞系，建立魚類培養(yǎng)細胞體外基因操作和個體重建技術(shù)途徑； 15. 通過 morpholino 介導(dǎo)的基因敲降技術(shù)，配合整體原位雜交、細胞示蹤等方法，研究目的基因的生理 學(xué)功能及其基因調(diào)控網(wǎng)絡(luò)、信號通路和作用機理等； 16. 采用已經(jīng)建立的細胞模型，研究病毒與宿主細胞的相互作用，在此基礎(chǔ)上，通過轉(zhuǎn)染目的基因和 siRNA 干擾等技術(shù)手段，研究目的基因的生理學(xué)功能以及基因的調(diào)控網(wǎng)絡(luò)； 17. 通過 AFLP 和微衛(wèi)星等遺傳標記的大規(guī)模篩選，鑒定出與魚類性別等等主要經(jīng)濟性狀相關(guān)的分子遺傳標記，進而通過 Genomic walking 克隆鑒定相關(guān)功能基因；通過人工選育和家系分析，利用遺傳標記進行基因型分析的優(yōu)勢，研究特定標記與某些經(jīng)濟性狀（例如生長、性別、抗病或抗寒）的連鎖關(guān)系，進行分子標 記輔助育種；開展魚類生長、飼料轉(zhuǎn)化率等經(jīng)濟性狀的 QTL 定位分析和eQTL 定位分析； 18. 改造基于蛋白質(zhì)鋅指結(jié)構(gòu)的基因敲除載體系統(tǒng)，優(yōu)化基因敲除載體，引入更多的克隆位點，以簡化特異基因敲除載體的構(gòu)建；利用 Zinc Finger Tools 網(wǎng)上軟件包（ ） ,選取代表性基因進行鋅指結(jié)構(gòu)域的索尋，