【正文】 時， 鉬元素密度為 60μ g/L 時鹽藻培養(yǎng)液中蛋白質含量明顯高于 40μ g /L 和 80μ g /L 的鉬濃度。 當硼元素的濃度為 2mg/L 和 4mg/L 時， 培養(yǎng)液中 β 胡蘿卜素 的含量在 鉬元素密度 為40μ g /L 和 80μ g /L 時 明顯高于 60μ g /L 的鉬 ；當硼元素 的濃度為 6mg/L 時， 培養(yǎng)液中 β胡蘿卜素 含量在 鉬元素濃度 為 60μ g /L 時明顯大于 40μ g /L 和 80μ g /L 的鉬濃度 。mL1)； N： 細胞密度 (107cells I瓶 Mo 80μ g/L、 B 6mg/L 使瓶有溶液 60 ml，每組重復 3 個。 4H2O 天津市化學試劑四廠 乙二胺四乙酸二鈉 Na2EDTA 南京化學試劑一廠 方法 實驗處理 （ 1） 取母液 1（ NaNO3： 5g／ L； KH2PO4： lg／ L； KC1： 7g／ L； MgSO4： 10g／ L；CaCl2： 1g／ L） 180ml 加水稀釋至 1000ml。還有報道說，鉬在植物對鐵的 吸收和運輸中起著不可替代的作用。 鉬是硝酸還原酶的必需部分，參與硝態(tài)氮還原為銨的過程。莖形成層組織細胞分裂加強，形成層 細胞增生。 硼與細胞壁組分間發(fā)生反應生成多羥基化合物增強細胞壁的穩(wěn)定性和良好的結構。目前 ， 在澳大利亞西部的 Whyalla，養(yǎng)殖鹽藻達 300公頃，收獲鹽藻的設備每小時可處理藻液 1000噸。 鹽生桿氏藻體內含 β 胡蘿卜素的量可達其干重的 10 %左右 ,并富含甘油、蛋白質、脂肪酸、葉綠素和四烯酸 ,具有營養(yǎng)保健作用 ,是一種經(jīng)濟藻類和新型的“農作物” [1]。Mo 60μg/L、 B 2mg/L。 淮 海 工 學 院 畢業(yè)設計 (論文 )說明書 題 目： 硼、鉬對鹽藻生長與物質積累的影響 作 者： 陳 震 東 學 號： 5203102202 系 (院 )： 海洋學院 專業(yè)班級 ： 生物技術 生技 032 指導者： 郭 金 耀 教 授 評閱者： 秦 蕾 副 教授 2020年 6 月 連 云 港 畢業(yè)設計（論文）中文摘要 硼、鉬對鹽藻生長與物質積累的影響 摘 要： 本實驗設定 Mo 40μg/L、 B 2mg/L。Mo 60μg/L、 B 4mg/L。 鹽藻的研究概況 β 胡蘿卜素除了在人體內按需要轉變?yōu)?VA 外 ,還具有保護機體免受輻射損傷、延緩機體衰老及防癌、抗癌作用 ,可增強機體免疫力 。日本在以色列也建立了鹽藻養(yǎng)殖場。通過這種作用，硼影響生長迅速的分生組織、花粉管的穩(wěn)定性、花粉的萌動及生長。酚類化合物積累抑制吲哚乙酸氧化酶的活性。植物中大多數(shù)鉬都集中在這種酶中，這是一種水溶性鉬黃 蛋白，存在于葉綠體被膜中。 鉬促進磷的吸收和水解各種磷酸酯的磷酸酶活性，增加植物體內 VC 的合成。 （ 2） 取母液 2（ Na2EDTA： 18g／ L； FeS04封口后培養(yǎng)。mL1) 3 結果與分析 硼和鉬對鹽藻的生長調控 培養(yǎng) 15d后， 通過 檢測 各瓶藻液 在 450nm處的吸光度 計算出鹽藻的細胞密度 ,從而可以看出 不同濃度的硼和鉬對鹽藻細胞生長的調控作用，結果見圖 1。 原因是在 硼 元素濃度為 6mg/L 時， 40μ g /L 的鉬濃度過低不利于氮和磷等元素的吸收利用， 而且缺鉬會使 葉綠體的結構受損， 從而影響培養(yǎng)液中 β 胡蘿卜素 的含量。原因是在硼元素濃度為 6mg/L 時， 40μ g /L 的鉬濃度過低不利于氮和磷等元素的吸收利用，影響蛋白質的合成，而 80μ g /L 的鉬濃度又過高，造成銅含量不足不利細胞生長從而大大的抑制了培養(yǎng)液中蛋白質的含量。兩種元素不同組合時，當硼濃度為 6mg/L 、鉬濃度為 60μ g /L 最適合鹽藻細胞生長、培養(yǎng)液中 β 胡蘿卜素 的積累和 培養(yǎng)液中蛋白質的積累，而硼濃度為6mg/L 、鉬濃度 為 40μ g /L 的組合最不適合鹽藻細胞生長以及培養(yǎng)液中代謝物質的積累。mL1） 表 5 鹽藻細胞蛋白質含量 單位： （ pg 在 鹽藻的培養(yǎng)過程中 ，不僅應注意單一元素的濃度，而且要考慮元素之間的平衡，同時還需注意它們之間的互作效應，以便收到最佳的效果。 其原因可能是在九種組合中硼濃度為 6mg/L 、鉬濃度為60μ g/L 時，兩種元素之間相互促進的作用較大，而在硼濃度為 6mg/L 、鉬濃度為 40μ g /L時兩元素間的抑制作用較強。 從圖 2和表 2的整體來 看 ， 硼濃度為 6mg/L 、鉬濃度為 60μ g /L 的組合最適合 培養(yǎng)液中 β 胡蘿卜素 的積累；硼濃度為 6mg/L 、鉬濃度為 40μ g /L 的組合最不適合鹽藻 培養(yǎng)液中 β 胡蘿卜素 的積累。 表 1 各組鹽藻細胞 密度的數(shù)據(jù)的 兩兩比較 Tukey B 硼鉬對細胞生長的影響 Subset for alpha = .01 N 1 2 3 3 4 3 1 3 5 3 7 3 9 3 2 3 8 3 6 3 淮海工學院二○○七屆畢業(yè)設計（論文） 第 7 頁 共 19 頁 由圖 1 和表 1 可以得出 ， 鹽藻細胞生長隨硼和鉬元素濃度的變化而變化 。 培養(yǎng) 15d后，進行培養(yǎng)結果的分析比較。 （ 3） 稱取 MnC12另一種是葉片瘦長畸形、葉片變厚，甚至焦枯。缺鉬時鉬黃蛋白不能合成，導致硝酸鹽積累，影響同化過程的順利進行。在木質素形成和木質部導管分化過程中，硼對羥基化酶和酚類化合物酶的活性起控制作用。硼能刺激花粉萌發(fā)，特別是花粉管伸長。 藻產(chǎn)品的產(chǎn)量和種類不斷增加 ,質量也穩(wěn)步上升 ,經(jīng)濟價值可觀。 Wackenrode在 1831年揭示了 β胡蘿卜素的存在，化學家于 1931年弄清了它的化學結構，并于 1950年成功地合成了 β胡蘿卜素。Mo 80μg/L、 B 2mg/L。 Mo 40μ g/L、 B 6mg/L。Mo 40μg/L、 B 4mg/L。因細胞內常含有大量的胡蘿卜素而使其個體呈橘紅色 。 國外對這類藻的生物學和生態(tài)學做了大量研究 [2] , 國內近年也在其地理分布 [3] 、細胞和分子鑒定 [4][5][6][7 ] 、基因工程 [8][9 ] 、活性物質分析 [11][12] 、環(huán)境因子對其生長、營養(yǎng)物質積累以及培養(yǎng)采收技術等方面 [13]開展了廣泛的研究。缺硼導致病害癥狀的出現(xiàn)因不同植物而異。因此一般對硼的需求也僅限于維管植物。 鉬的 研究概況 植物對鉬的需要量低于任何其它礦質元素。 缺鉬使固氮酶和硝酸還原酶活性降低 [18]，葉綠體的結構受損，葉綠素含量減少 [19]，碳代謝異常，碳水化合物的合成受阻 [20]。 7H2O 江蘇徐州試劑二廠 硫酸鋅 ZnSO4 G瓶 Mo 80μ g/L、 B 2mg/L。mL1） =－ 單個細胞內蛋白質含量 （ pg其原因是在 鉬的濃度為 40μ g/L 時， 6mg/L的 硼 濃度過高 造成的， 過多的硼會影響細胞對鈣、鐵等元素的吸收因而不利于 β 胡蘿卜素的積累 ； 當鉬的濃度為 60μ g/L 時，培養(yǎng)液中 β 胡蘿卜素 的含量在 硼元素密度 為 6mg/L 時，明顯高于 2mg/L和 4mg/L兩組，且這兩組的差異不顯著。 當硼元素的濃度為 2mg/L 時，鉬元素密度 為 80μ g/L時 鹽藻培養(yǎng)液中蛋白質含量 高于40μ g /L 和 60μ g /L 的鉬濃度 ， 且鉬為 40μg /L和 60μ g /L 時兩組數(shù)據(jù)差異不大。 這樣的結果 可能是兩種元素在不同濃度時相互的作用不同， 在 所給定的硼、鉬濃度范圍內，硼為 6mg/L 、鉬為 60μ g /L 的組合中兩元素之間相互 的 促進 作用較強 ，而硼濃度為 6mg/L 、鉬濃度為 40μ g /L 的組合中兩元素之間是相互 的 抑制 作用較強 ； 單個細胞中 β 胡蘿卜素的含量和培養(yǎng)液中蛋白質的含量則在 硼濃度為 6mg/L 、鉬濃度為 60μ g /L 的組合 時最低，在 硼濃度為 6mg/L 、鉬濃度為40μ g /L 的組合 時較高，這可能僅是在硼、鉬過多或過低的逆境條件下鹽藻細胞的適應性反應 [23]。 2020。實驗過程中郭老師嚴謹?shù)慕虒W思路和開放的教學方法讓我在實驗中能充分 發(fā)揮自己的能力， 并且 讓我知道如何去自己尋找資源獨立的完成每一個步驟 。 細胞中蛋白質含量各組之間差異不顯著，但是 從圖 5 中可以看出硼濃度為 2mg/L 、鉬濃度為 80μ g /L 的組合最適合鹽藻細胞中蛋白質的積累；硼濃度為 4mg/L 、鉬濃度為 40μ g /L 的組合最不適合鹽藻細胞中蛋白質的積累。 淮海工學院二○○七屆畢業(yè)設計（論文） 第 9 頁 共 19 頁 40 60 80Mo濃度:μg/L細胞中β胡蘿卜素含量(pg/cell)B 2mg/LB 4mg/LB 6mg/L 圖 3 硼和鉬對鹽藻 細胞 β 胡蘿卜素積累的影響 各組鹽 藻細胞 中 β 胡蘿卜 素含量 的數(shù)據(jù)經(jīng) SPSS 軟件單因素處理得 F= (8,18)=,說明實驗結果差異不顯著。 當硼元素的濃度為 2mg/L 時，鉬元素密度 在 40μ g /L、 60μ g /L 和 80μ g /L 時，鹽藻細胞密度 差異不 大 ，這可能是實驗過程中的誤差造成的； 當硼元素的濃度為 4mg/L 時 , 鹽藻的細胞密度在鉬為 40μ g/L 和 80μ g/L 時明顯高于 60μ g/L； 當硼元素的濃度為 6mg/L時，鉬元素濃度 在 60μ g /L 時 鹽藻的細胞密度顯著高于 40μ g/L 和 80μ g/L 兩組 。鹽藻細胞密度單位采用 “ x107cells 淮海工學院二○○七屆畢業(yè)設計（論文） 第 5 頁 共 19 頁 （ 4） 取備用藻液用離心機離心 5 分鐘