【正文】 時(shí)， 鉬元素密度為 60μ g/L 時(shí)鹽藻培養(yǎng)液中蛋白質(zhì)含量明顯高于 40μ g /L 和 80μ g /L 的鉬濃度。 當(dāng)硼元素的濃度為 2mg/L 和 4mg/L 時(shí)， 培養(yǎng)液中 β 胡蘿卜素 的含量在 鉬元素密度 為40μ g /L 和 80μ g /L 時(shí) 明顯高于 60μ g /L 的鉬 ；當(dāng)硼元素 的濃度為 6mg/L 時(shí)， 培養(yǎng)液中 β胡蘿卜素 含量在 鉬元素濃度 為 60μ g /L 時(shí)明顯大于 40μ g /L 和 80μ g /L 的鉬濃度 。mL1)； N： 細(xì)胞密度 (107cells I瓶 Mo 80μ g/L、 B 6mg/L 使瓶有溶液 60 ml，每組重復(fù) 3 個(gè)。 4H2O 天津市化學(xué)試劑四廠(chǎng) 乙二胺四乙酸二鈉 Na2EDTA 南京化學(xué)試劑一廠(chǎng) 方法 實(shí)驗(yàn)處理 （ 1） 取母液 1（ NaNO3： 5g／ L； KH2PO4： lg／ L； KC1： 7g／ L； MgSO4： 10g／ L；CaCl2： 1g／ L） 180ml 加水稀釋至 1000ml。還有報(bào)道說(shuō)，鉬在植物對(duì)鐵的 吸收和運(yùn)輸中起著不可替代的作用。 鉬是硝酸還原酶的必需部分，參與硝態(tài)氮還原為銨的過(guò)程。莖形成層組織細(xì)胞分裂加強(qiáng)，形成層 細(xì)胞增生。 硼與細(xì)胞壁組分間發(fā)生反應(yīng)生成多羥基化合物增強(qiáng)細(xì)胞壁的穩(wěn)定性和良好的結(jié)構(gòu)。目前 ， 在澳大利亞西部的 Whyalla，養(yǎng)殖鹽藻達(dá) 300公頃，收獲鹽藻的設(shè)備每小時(shí)可處理藻液 1000噸。 鹽生桿氏藻體內(nèi)含 β 胡蘿卜素的量可達(dá)其干重的 10 %左右 ,并富含甘油、蛋白質(zhì)、脂肪酸、葉綠素和四烯酸 ,具有營(yíng)養(yǎng)保健作用 ,是一種經(jīng)濟(jì)藻類(lèi)和新型的“農(nóng)作物” [1]。Mo 60μg/L、 B 2mg/L。 淮 海 工 學(xué) 院 畢業(yè)設(shè)計(jì) (論文 )說(shuō)明書(shū) 題 目： 硼、鉬對(duì)鹽藻生長(zhǎng)與物質(zhì)積累的影響 作 者： 陳 震 東 學(xué) 號(hào)： 5203102202 系 (院 )： 海洋學(xué)院 專(zhuān)業(yè)班級(jí) ： 生物技術(shù) 生技 032 指導(dǎo)者： 郭 金 耀 教 授 評(píng)閱者： 秦 蕾 副 教授 2020年 6 月 連 云 港 畢業(yè)設(shè)計(jì)（論文）中文摘要 硼、鉬對(duì)鹽藻生長(zhǎng)與物質(zhì)積累的影響 摘 要： 本實(shí)驗(yàn)設(shè)定 Mo 40μg/L、 B 2mg/L。Mo 60μg/L、 B 4mg/L。 鹽藻的研究概況 β 胡蘿卜素除了在人體內(nèi)按需要轉(zhuǎn)變?yōu)?VA 外 ,還具有保護(hù)機(jī)體免受輻射損傷、延緩機(jī)體衰老及防癌、抗癌作用 ,可增強(qiáng)機(jī)體免疫力 。日本在以色列也建立了鹽藻養(yǎng)殖場(chǎng)。通過(guò)這種作用，硼影響生長(zhǎng)迅速的分生組織、花粉管的穩(wěn)定性、花粉的萌動(dòng)及生長(zhǎng)。酚類(lèi)化合物積累抑制吲哚乙酸氧化酶的活性。植物中大多數(shù)鉬都集中在這種酶中，這是一種水溶性鉬黃 蛋白，存在于葉綠體被膜中。 鉬促進(jìn)磷的吸收和水解各種磷酸酯的磷酸酶活性，增加植物體內(nèi) VC 的合成。 （ 2） 取母液 2（ Na2EDTA： 18g／ L； FeS04封口后培養(yǎng)。mL1) 3 結(jié)果與分析 硼和鉬對(duì)鹽藻的生長(zhǎng)調(diào)控 培養(yǎng) 15d后， 通過(guò) 檢測(cè) 各瓶藻液 在 450nm處的吸光度 計(jì)算出鹽藻的細(xì)胞密度 ,從而可以看出 不同濃度的硼和鉬對(duì)鹽藻細(xì)胞生長(zhǎng)的調(diào)控作用，結(jié)果見(jiàn)圖 1。 原因是在 硼 元素濃度為 6mg/L 時(shí)， 40μ g /L 的鉬濃度過(guò)低不利于氮和磷等元素的吸收利用， 而且缺鉬會(huì)使 葉綠體的結(jié)構(gòu)受損， 從而影響培養(yǎng)液中 β 胡蘿卜素 的含量。原因是在硼元素濃度為 6mg/L 時(shí)， 40μ g /L 的鉬濃度過(guò)低不利于氮和磷等元素的吸收利用，影響蛋白質(zhì)的合成，而 80μ g /L 的鉬濃度又過(guò)高，造成銅含量不足不利細(xì)胞生長(zhǎng)從而大大的抑制了培養(yǎng)液中蛋白質(zhì)的含量。兩種元素不同組合時(shí)，當(dāng)硼濃度為 6mg/L 、鉬濃度為 60μ g /L 最適合鹽藻細(xì)胞生長(zhǎng)、培養(yǎng)液中 β 胡蘿卜素 的積累和 培養(yǎng)液中蛋白質(zhì)的積累，而硼濃度為6mg/L 、鉬濃度 為 40μ g /L 的組合最不適合鹽藻細(xì)胞生長(zhǎng)以及培養(yǎng)液中代謝物質(zhì)的積累。mL1） 表 5 鹽藻細(xì)胞蛋白質(zhì)含量 單位： （ pg 在 鹽藻的培養(yǎng)過(guò)程中 ，不僅應(yīng)注意單一元素的濃度，而且要考慮元素之間的平衡，同時(shí)還需注意它們之間的互作效應(yīng)，以便收到最佳的效果。 其原因可能是在九種組合中硼濃度為 6mg/L 、鉬濃度為60μ g/L 時(shí)，兩種元素之間相互促進(jìn)的作用較大，而在硼濃度為 6mg/L 、鉬濃度為 40μ g /L時(shí)兩元素間的抑制作用較強(qiáng)。 從圖 2和表 2的整體來(lái) 看 ， 硼濃度為 6mg/L 、鉬濃度為 60μ g /L 的組合最適合 培養(yǎng)液中 β 胡蘿卜素 的積累；硼濃度為 6mg/L 、鉬濃度為 40μ g /L 的組合最不適合鹽藻 培養(yǎng)液中 β 胡蘿卜素 的積累。 表 1 各組鹽藻細(xì)胞 密度的數(shù)據(jù)的 兩兩比較 Tukey B 硼鉬對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)的影響 Subset for alpha = .01 N 1 2 3 3 4 3 1 3 5 3 7 3 9 3 2 3 8 3 6 3 淮海工學(xué)院二○○七屆畢業(yè)設(shè)計(jì)（論文） 第 7 頁(yè) 共 19 頁(yè) 由圖 1 和表 1 可以得出 ， 鹽藻細(xì)胞生長(zhǎng)隨硼和鉬元素濃度的變化而變化 。 培養(yǎng) 15d后，進(jìn)行培養(yǎng)結(jié)果的分析比較。 （ 3） 稱(chēng)取 MnC12另一種是葉片瘦長(zhǎng)畸形、葉片變厚，甚至焦枯。缺鉬時(shí)鉬黃蛋白不能合成，導(dǎo)致硝酸鹽積累，影響同化過(guò)程的順利進(jìn)行。在木質(zhì)素形成和木質(zhì)部導(dǎo)管分化過(guò)程中，硼對(duì)羥基化酶和酚類(lèi)化合物酶的活性起控制作用。硼能刺激花粉萌發(fā)，特別是花粉管伸長(zhǎng)。 藻產(chǎn)品的產(chǎn)量和種類(lèi)不斷增加 ,質(zhì)量也穩(wěn)步上升 ,經(jīng)濟(jì)價(jià)值可觀(guān)。 Wackenrode在 1831年揭示了 β胡蘿卜素的存在，化學(xué)家于 1931年弄清了它的化學(xué)結(jié)構(gòu)，并于 1950年成功地合成了 β胡蘿卜素。Mo 80μg/L、 B 2mg/L。 Mo 40μ g/L、 B 6mg/L。Mo 40μg/L、 B 4mg/L。因細(xì)胞內(nèi)常含有大量的胡蘿卜素而使其個(gè)體呈橘紅色 。 國(guó)外對(duì)這類(lèi)藻的生物學(xué)和生態(tài)學(xué)做了大量研究 [2] , 國(guó)內(nèi)近年也在其地理分布 [3] 、細(xì)胞和分子鑒定 [4][5][6][7 ] 、基因工程 [8][9 ] 、活性物質(zhì)分析 [11][12] 、環(huán)境因子對(duì)其生長(zhǎng)、營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)積累以及培養(yǎng)采收技術(shù)等方面 [13]開(kāi)展了廣泛的研究。缺硼導(dǎo)致病害癥狀的出現(xiàn)因不同植物而異。因此一般對(duì)硼的需求也僅限于維管植物。 鉬的 研究概況 植物對(duì)鉬的需要量低于任何其它礦質(zhì)元素。 缺鉬使固氮酶和硝酸還原酶活性降低 [18]，葉綠體的結(jié)構(gòu)受損，葉綠素含量減少 [19]，碳代謝異常，碳水化合物的合成受阻 [20]。 7H2O 江蘇徐州試劑二廠(chǎng) 硫酸鋅 ZnSO4 G瓶 Mo 80μ g/L、 B 2mg/L。mL1） =－ 單個(gè)細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)含量 （ pg其原因是在 鉬的濃度為 40μ g/L 時(shí)， 6mg/L的 硼 濃度過(guò)高 造成的， 過(guò)多的硼會(huì)影響細(xì)胞對(duì)鈣、鐵等元素的吸收因而不利于 β 胡蘿卜素的積累 ； 當(dāng)鉬的濃度為 60μ g/L 時(shí)，培養(yǎng)液中 β 胡蘿卜素 的含量在 硼元素密度 為 6mg/L 時(shí)，明顯高于 2mg/L和 4mg/L兩組，且這兩組的差異不顯著。 當(dāng)硼元素的濃度為 2mg/L 時(shí)，鉬元素密度 為 80μ g/L時(shí) 鹽藻培養(yǎng)液中蛋白質(zhì)含量 高于40μ g /L 和 60μ g /L 的鉬濃度 ， 且鉬為 40μg /L和 60μ g /L 時(shí)兩組數(shù)據(jù)差異不大。 這樣的結(jié)果 可能是兩種元素在不同濃度時(shí)相互的作用不同， 在 所給定的硼、鉬濃度范圍內(nèi)，硼為 6mg/L 、鉬為 60μ g /L 的組合中兩元素之間相互 的 促進(jìn) 作用較強(qiáng) ，而硼濃度為 6mg/L 、鉬濃度為 40μ g /L 的組合中兩元素之間是相互 的 抑制 作用較強(qiáng) ； 單個(gè)細(xì)胞中 β 胡蘿卜素的含量和培養(yǎng)液中蛋白質(zhì)的含量則在 硼濃度為 6mg/L 、鉬濃度為 60μ g /L 的組合 時(shí)最低，在 硼濃度為 6mg/L 、鉬濃度為40μ g /L 的組合 時(shí)較高，這可能僅是在硼、鉬過(guò)多或過(guò)低的逆境條件下鹽藻細(xì)胞的適應(yīng)性反應(yīng) [23]。 2020。實(shí)驗(yàn)過(guò)程中郭老師嚴(yán)謹(jǐn)?shù)慕虒W(xué)思路和開(kāi)放的教學(xué)方法讓我在實(shí)驗(yàn)中能充分 發(fā)揮自己的能力， 并且 讓我知道如何去自己尋找資源獨(dú)立的完成每一個(gè)步驟 。 細(xì)胞中蛋白質(zhì)含量各組之間差異不顯著，但是 從圖 5 中可以看出硼濃度為 2mg/L 、鉬濃度為 80μ g /L 的組合最適合鹽藻細(xì)胞中蛋白質(zhì)的積累；硼濃度為 4mg/L 、鉬濃度為 40μ g /L 的組合最不適合鹽藻細(xì)胞中蛋白質(zhì)的積累。 淮海工學(xué)院二○○七屆畢業(yè)設(shè)計(jì)（論文） 第 9 頁(yè) 共 19 頁(yè) 40 60 80Mo濃度:μg/L細(xì)胞中β胡蘿卜素含量(pg/cell)B 2mg/LB 4mg/LB 6mg/L 圖 3 硼和鉬對(duì)鹽藻 細(xì)胞 β 胡蘿卜素積累的影響 各組鹽 藻細(xì)胞 中 β 胡蘿卜 素含量 的數(shù)據(jù)經(jīng) SPSS 軟件單因素處理得 F= (8,18)=,說(shuō)明實(shí)驗(yàn)結(jié)果差異不顯著。 當(dāng)硼元素的濃度為 2mg/L 時(shí)，鉬元素密度 在 40μ g /L、 60μ g /L 和 80μ g /L 時(shí)，鹽藻細(xì)胞密度 差異不 大 ，這可能是實(shí)驗(yàn)過(guò)程中的誤差造成的； 當(dāng)硼元素的濃度為 4mg/L 時(shí) , 鹽藻的細(xì)胞密度在鉬為 40μ g/L 和 80μ g/L 時(shí)明顯高于 60μ g/L； 當(dāng)硼元素的濃度為 6mg/L時(shí)，鉬元素濃度 在 60μ g /L 時(shí) 鹽藻的細(xì)胞密度顯著高于 40μ g/L 和 80μ g/L 兩組 。鹽藻細(xì)胞密度單位采用 “ x107cells 淮海工學(xué)院二○○七屆畢業(yè)設(shè)計(jì)（論文） 第 5 頁(yè) 共 19 頁(yè) （ 4） 取備用藻液用離心機(jī)離心 5 分鐘