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發(fā)酵生物化學(xué)基礎(chǔ)(留存版)

  

【正文】 生成該受體。 第七節(jié) 微生物的光合作用 光合作用是自然界一個(gè)極其重要的生物學(xué)過(guò)程,除高等植物外,還有光合微生物,如藻類(lèi)、藍(lán)細(xì)菌和光合細(xì)菌 (包括紫色細(xì)菌、綠色細(xì)菌、嗜鹽菌等 )。 ( 二 )選擇原料的依據(jù) 1,原料選擇的原則 選擇淀粉質(zhì)原料生產(chǎn)酒精時(shí),從工藝 的角度著眼,凡任何含有可發(fā)酵性糖或可變?yōu)榘l(fā)酵糖的原料,都可作為酒精生產(chǎn)的原料。 二、常用主要原料及其化學(xué)組成 ( 一 )原料的種類(lèi) 發(fā)酵 生產(chǎn)的原料,一般可分成下列幾類(lèi): 1, 薯類(lèi) : 甘薯、馬鈴薯、木薯、山藥等。在發(fā)酵過(guò)程中,我們的目的產(chǎn)品是菌體或代謝產(chǎn)物。 在發(fā)酵過(guò)程中,適當(dāng)?shù)匮a(bǔ)充碳源是必要的。在玉米漿中的蛋白質(zhì)、肽、氨基酸等也具有緩沖容量。 一般對(duì)于帶皮殼的原料,處理過(guò)程要先行破碎, 脫去皮殼。 濕法粉碎工藝的優(yōu)點(diǎn) ① 徹底消除了粉塵的危害,改善了勞動(dòng)條件,降低了原料的損耗 ② 提高了原料的粉碎細(xì)度 ③ 節(jié)省了蒸煮時(shí)所消耗的蒸氣 ④ 粉碎機(jī)部件(特別是刀片)的磨損減少 ⑤ 設(shè)備簡(jiǎn)單,對(duì)廠(chǎng)房要求不高 4,常用的粉碎設(shè)備 ( 1)錘式粉碎機(jī)(瓜干、高粱、玉米) 結(jié)構(gòu)示意圖 錘式粉碎機(jī)的計(jì)算: ( a)生產(chǎn)能力的計(jì)算 錘式粉碎機(jī)的 生產(chǎn)能力,可按半經(jīng)驗(yàn)公式計(jì)算 設(shè)從一個(gè)圓孔中排出的產(chǎn)品體積為: 錘刀掃過(guò)篩孔時(shí),才有產(chǎn)品排出,如果轉(zhuǎn)子上有 K 排錘刀,則轉(zhuǎn)動(dòng)一周,錘刀就掃 過(guò)K 次,而排料也為 K 次,如果轉(zhuǎn)子轉(zhuǎn)數(shù)為 n(轉(zhuǎn) /分),篩孔總數(shù)為 Z 個(gè),則每小時(shí)排出產(chǎn)品的體積為 ( b)動(dòng)力消耗的計(jì)算 動(dòng)力消耗可按下列經(jīng)驗(yàn)公式估計(jì): 上式表明錘式粉碎機(jī)的動(dòng)力消耗與錘刀末端直徑平方,轉(zhuǎn)速和長(zhǎng)度成正比。這時(shí)的氣流速度稱(chēng)為顆粒的懸浮速度。 ( 5)采用氣流輸送時(shí)應(yīng)注意的問(wèn)題 水分含量超過(guò) 16%的粉末原料, 特別是鮮原料,不宜采用氣流輸送; ② 所選用風(fēng)機(jī)型號(hào)一般要選擇比實(shí)際需用量大 倍風(fēng)機(jī),風(fēng)壓也要比全系統(tǒng)壓力損失的總和更大一些; ③ 選擇輸送管道的直徑時(shí),要保證空氣通氣量有 110120%的富余量; ④ 所用落料器性能要好,要保證既能較快分料,又能有一定的密封程度,防止落料器落料慢而引起旋風(fēng)分離器出現(xiàn)粉料阻塞現(xiàn)象; ⑤ 整個(gè)輸送原料的管道中,要盡量減少 90176。 氣流速度過(guò)低,被輸送物料不能懸浮或不能完全懸?。? 氣流速度過(guò)高,浪費(fèi)動(dòng)力和增加顆粒的破碎。隨原料品種和種類(lèi)的不同,淀粉顆粒具有不同的形狀和大小。 ?糖的變化 ①己糖的變化(葡萄糖和果糖):果糖在酸性介質(zhì)中不穩(wěn)定,由于容易開(kāi)鏈,所以較易分解。但對(duì)于直鏈結(jié)構(gòu)中的 α 1, 6 糖苷鍵卻不能水解。 噴射液化的幾種流程: ① 一段高溫噴射液化工藝: 工藝 控制要點(diǎn): 淀粉乳濃度 30%左右 ~ 噴射器出口溫度( 105177。 β淀粉酶 : β淀粉酶能水解 α1, 4 糖苷鍵,不能水解 α 1, 6 糖苷鍵,遇此鍵水解停止,也不能越過(guò)繼續(xù)水解。 糊化 :在溫水中,當(dāng)?shù)矸垲w粒無(wú)限膨脹形成均一的粘稠液體的現(xiàn)象,稱(chēng)為淀粉的 糊化 。 ζb:彎管阻力系數(shù),見(jiàn)下表 空氣彎管阻力系數(shù)表曲率半徑 r/D ζb b,加速段的壓力損失 Δp2 :加入輸料管的的物料, 加入前一般是靜止的,在氣流方向上的初速度一般為零,要求輸送它的空氣流在瞬間將它加速到輸送速度,而產(chǎn)生的壓力損失。 管網(wǎng)系統(tǒng)的設(shè)計(jì)計(jì)算 A,空氣需求量的計(jì)算 ① 混合比 μ的確定 定義:每 1kg 空氣所能提升或輸送的物料流量 G 物 ( kg/h)與空氣流量 G 氣 ( kg/h)之比 。 ② 壓送式流程(壓力輸送) 這種輸送方式是將空氣和物料壓送入輸料管中, 物料被送到指定位置之后,經(jīng)分離器物料自動(dòng)排出,分離出來(lái)的空氣凈化后放空。顆粒在垂直管中和水平管中的懸浮機(jī)理及運(yùn)動(dòng)狀態(tài)是不一樣的。 為了提高原料粉碎細(xì)度,降低電力消耗,采用兩級(jí)破碎。 ( 2)皮殼在生產(chǎn)過(guò)程中,不發(fā)生變化,而大量皮殼匯集起來(lái)會(huì)占據(jù)一定的有效容積,無(wú)形中降低了設(shè)備的生產(chǎn)能力。許多種培養(yǎng)基多加入碳酸鈣作為緩沖劑,以達(dá)到 pH7. 0 左右。 ( 4)碳源具有生物合成的底物和能源的雙重作用,在需氧條件下,對(duì)碳源的需要量可以從菌體對(duì)底物的產(chǎn)率系數(shù) (Yx/s)推算而得。 脂肪 : 對(duì)發(fā)酵有影響,如高粱糠、米糠等含油脂多,則生酸較快,生酸幅度也較大。 例如 ICI 公司因指定用甲醇和氨生產(chǎn)單細(xì)胞蛋白質(zhì)而另行設(shè)計(jì)新的發(fā)酵罐。在異養(yǎng)生長(zhǎng)時(shí),各種氧化還原電位較高的基質(zhì)對(duì) NAD+的還原一般都是由光能推動(dòng)的。 在核苷酸合成中也有固定 CO2 的反應(yīng),如嘌呤核苷酸合成中, 5氨基咪唑核糖 5磷酸與 CO2反應(yīng),生成 5氨基 4羧基咪唑核糖 5 磷酸。 卡爾文環(huán)的能量轉(zhuǎn)化效率相當(dāng)高, 18molATP 約計(jì) , 12molNADPH2 約計(jì),即每合成 lmol 葡萄糖需輸入 。這種差異很重要,因?yàn)檫@樣可以使一個(gè)酶在不同條件下催化兩種性質(zhì)不同的反應(yīng),各自行使功能。 代表性藻株有 :Chlamydomonas reinhardtii。 真養(yǎng)產(chǎn)堿菌中兩種氫化酶的功能。 小球諾卡氏菌對(duì)環(huán)己醇的降解 嗜石油諾卡氏菌 (Nocardia petroleophila)可利用甲基環(huán)己烷生長(zhǎng),其最初降解步驟如下圖所示。 微生物氧化苯的雙氧酶的功能 甲苯轉(zhuǎn)化成環(huán)裂解底物:甲苯氧化成鄰苯二酚有兩條途徑 ( 1) Kitagawa 用 (P. aeruiginosa)試驗(yàn)指出該菌分解甲苯是將甲基氧化成羧基,再 將苯甲酸轉(zhuǎn)化為鄰苯二酚,甲苯與苯甲酸之間的中間產(chǎn)物是苯甲醇和苯甲醛,見(jiàn)下圖。色氨酸調(diào)節(jié)麥角堿的合成等,具體調(diào)節(jié)過(guò)程見(jiàn)代謝調(diào)節(jié)一章有關(guān)部分。聚合后的產(chǎn)物再經(jīng)過(guò)修飾反應(yīng) 如環(huán)化、氧化、甲基化、氯化等。麥角菌 (Claviceps purpurea)可以產(chǎn)生麥角生物堿。擔(dān)子菌產(chǎn)生的松蕈 (三 )酸 (α十六烷基檸檬酸 )就是由十八烷酸 (C17H33 ( 1)與糖代謝有關(guān)的類(lèi)型 以糖或糖代謝產(chǎn)物為前體合成次級(jí)代謝產(chǎn)物 有三種情況: ( A)直接由葡萄糖合成次級(jí)代謝產(chǎn)物。第三章 發(fā)酵生物化學(xué)基礎(chǔ) 第一節(jié) 糖的微生物代謝(自學(xué)) 第二節(jié) 脂類(lèi)和脂肪酸的微生物代謝(自學(xué)) 第三節(jié) 氨基酸和核酸的微生物代謝(自學(xué)) 第四節(jié) 微生物的次級(jí)代謝 從前面的章節(jié)中,我們了解了微生物從外界吸收各種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),通過(guò)分解代謝和合成代謝,產(chǎn)生出維持生命活動(dòng)的物質(zhì)和能量的初級(jí)代謝過(guò)程。例如,曲霉屬 (Aspergillus)產(chǎn)生的曲酸、蛤蟆菌(Amanitamuscarina)產(chǎn)生的蕈毒堿,放線(xiàn)菌產(chǎn)生的鏈霉素以及大環(huán)內(nèi)酯抗生素中的糖苷等。 COOH)的 α亞甲基與草酰乙酸的羰基縮合而成。 毒素:大部分細(xì)菌產(chǎn)生的毒素是蛋白質(zhì)類(lèi)的物質(zhì)。 氧化作用是在加氧酶催化下進(jìn)行的。 2,次級(jí)代謝產(chǎn)物一般在菌體生長(zhǎng)后期合成 初級(jí)代謝貫穿于生命活動(dòng)始終,與菌體生長(zhǎng)平行進(jìn)行。 甲苯的氧化途徑 ( 2) Walker 用 Pseudomonas 菌試驗(yàn)證明甲苯分解存在另一條途徑,即二羥化反應(yīng)將甲苯轉(zhuǎn)化成 3甲基鄰苯二酚作為裂解底物。 嗜石油諾卡氏菌對(duì)甲基環(huán)己烷降解 第六節(jié) H2 和 CO2 的微生物代謝 一、 H2的微生物代謝 1,分解代謝 氫細(xì)菌都是一些呈革蘭氏陰性的兼性化能自養(yǎng)菌。 偶聯(lián)部位以阿拉伯?dāng)?shù)字標(biāo)明。 產(chǎn)氫速率為: mmol H2/L ,100h. ( 2)間接光解產(chǎn)氫(藍(lán)細(xì)菌) 藍(lán)細(xì)菌主要分為:藍(lán)綠藻、藍(lán)藻綱類(lèi)、藍(lán)藻類(lèi) 總反 應(yīng)式為: 12H2O + 6CO2 Light energy C6H12O6 +6O2 C6H12O6 + 12H2O Light energy 12H2 +6CO2 代表性菌(藻)株: Anabaena variablilis( umol H2/mg chla/h) ( 3)光發(fā)酵產(chǎn)氫(無(wú)硫紫細(xì)菌) 無(wú)硫紫細(xì)菌在缺氮條件下,用光能和還原性底物產(chǎn)生氫氣 : C6H12O6 + 12H2O Light energy 12H2 + 6CO2 代表菌株為: Rhodospirillum rubrumL( 180 ml H2/L of culture/h); ( L H2/L or immobilized culture/h)。這也是細(xì)胞如何將生 物合成與降解途徑分開(kāi)的一個(gè)手段。而 1mol 葡萄糖被徹底氧化時(shí)會(huì)放出約。還有 CO2 和 NH3在氨甲酰磷酸合成酶催化下,生成氨甲酰磷酸,作為合成 UMP 的起始物或參與瓜氨酸的合成。紅螺菌科中醌鐵復(fù)合體的氧化還原電位不夠低,不能直接還原 NAD+,它們是通過(guò)環(huán)式電子傳遞 產(chǎn)生 ΔP,再由 ΔP推動(dòng)從琥珀酸到 NAD+的電子逆轉(zhuǎn),以還原 NAD+為 NADH。同樣的理由,在一個(gè)巳設(shè)定的發(fā)酵罐中,發(fā)酵必然會(huì)受到培養(yǎng)基組份改變的影響。一些 發(fā)酵 廠(chǎng)如采用玉米作為原料,總是把玉米坯芽除去。 該系數(shù)的定義是:細(xì)胞干物質(zhì)的產(chǎn)量/碳源底物的被利用量 下表中列出了一些 Yx/s 值。如果pH 下降,則碳酸鈣分解,如果是 pH 上升,可以自然地校正微生物的產(chǎn)酸量。 ( 3)醪液糖化后進(jìn)行發(fā)酵時(shí),皮殼會(huì)聚集在液面上,而引起較厚的醪蓋,醪蓋的形成會(huì)妨礙熱量的逸散和 CO2 的放出,致使液體溫度升高,細(xì)菌容易繁殖,特別是醋酸菌,出現(xiàn)這些現(xiàn)象,都會(huì)對(duì)發(fā)酵帶來(lái)不利。在一級(jí)破碎機(jī)的進(jìn)料口,裝有進(jìn)水管,將水和原料一起加入破碎機(jī)中,水量的大小,根據(jù)加料的速度和工藝要求的水料比,由浮子流量計(jì)控制。 垂直管中的懸浮輸送機(jī)理 設(shè)物料小顆粒,在靜止的空氣中自由降落,顆粒上作用力有三:顆粒重力 Ws,浮力 Wa,及空氣阻力 fs。在加料處要用封閉較好的加料器,防止物料反吹,空氣用鼓風(fēng)機(jī)送入系統(tǒng)中。 μ= G 物 / G 氣 選擇依據(jù): ? μ大,每 1kg 空氣輸送的物料量大; ? 過(guò)高的 μ易造成管道阻塞,阻力損失大,需較高壓力的空氣,增大設(shè)備費(fèi)用; ? 松散顆粒(大 μ),潮濕易結(jié)快物料和粉狀物料(小 μ); ? 吸入式流程(小 μ ),壓送式流程(大 μ)。 mmDPavpPavpDLKKKKaabDLa:空氣管的內(nèi)徑,:空氣管路的長(zhǎng)度,舊焊接管,焊接管光滑管)(:空氣的摩擦系數(shù),)(彎管:)(直管:氣氣氣氣彎直111110 0 1 121210 12211?????????????????)(氣氣 PavCp 22 2)( ?????C:供料系數(shù),其直為 1~10,連續(xù)穩(wěn)定供料取小值,間斷供料或從吸嘴供料取大值。此時(shí)的溫度稱(chēng)為 糊化溫度 。水解由淀粉分子的非還原末端開(kāi)始,水解相隔的 α 1, 4 鍵麥芽糖,屆于 β構(gòu)型。3 ) ?C,保溫 97~100 ?C, 30~60m。 異淀粉酶 : 異淀粉酶能水解支鏈淀粉和糖原分子中支叉地位的 α 1, 6 糖苷鍵,使支叉結(jié)構(gòu)斷裂。 ( 4)淀粉質(zhì)原料的各個(gè)組分在水 熱處理過(guò)程中的變化 淀粉的變化 – 自糖化 : 在 50~ 60℃預(yù)煮時(shí),原料自身的淀粉 酶系統(tǒng)活化,并分解淀粉生成糖和糊精 – 酸水解 :在微酸條件( ~ ),淀粉的局部酸水解現(xiàn)象 – 在 70℃以下,水解的產(chǎn)物是糖, 75~ 80℃產(chǎn)物是糊精。 曲率半徑比 r/D 2 4 6 7 阻力系數(shù) ζe d,分離器(卸料器)的壓力損失 ??????2250233????????vvvvDLavvvpp氣氣氣:系數(shù),由下式確定失垂直輸料管中的壓力損??????2332????????vPavHHDLaHHHpp氣氣氣:系數(shù),由下式計(jì)算)(損失水平壓力輸料管的壓力用:阻力系數(shù),依下表選)(彎管輸料管的壓力損失氣氣?? ??eeeePavpp2332????)(時(shí),壓力降為:當(dāng)旋風(fēng)分離器用作除塵)()(時(shí),壓力降為:當(dāng)旋風(fēng)分離器作卸料器氣氣氣氣PavPavcccccpKKp241214228~51?????????????? e,空氣進(jìn)出口的壓力損失 D,氣流輸送系統(tǒng)中總 的壓力損失 ΔpΔp= Δp1+ Δ
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