【正文】 如A型鏈球菌的膜磷壁酸,受體是類蛋白和糖蛋白莢膜和微莢膜：有抗吞噬、抗體液中殺菌物質(zhì)的作用，使病原菌能留在宿主體內(nèi)迅速繁殖，產(chǎn)生病變。1明膠液化試驗（1）原理明膠是一種動物蛋白質(zhì)，某些細菌具有明膠液化酶，明膠經(jīng)分解后，可呈現(xiàn)不同的特征，有利于細菌的鑒定。1氨基酸脫羧酶試驗（1）原理這是腸桿菌科細菌的鑒別試驗，用以區(qū)分沙門氏菌（通常為陽性）和枸椽酸桿菌（通常為陰性），若果細菌能從賴氨酸或鳥氨酸脫去羧基（COOH），導致培養(yǎng)基pH變堿，指示劑溴麝香草酚藍就顯示出藍色，試驗結(jié)果為陽性。（2）試劑 3%H2O2（新配）。② 或?qū)⒓兣囵B(yǎng)物接種于肉湯，肝浸湯瓊脂斜面或血清葡萄糖瓊脂斜面，（浸有飽和醋酸鉛溶液＊），培養(yǎng)于37℃，觀察，紙條變黑者為陽性。石蕊也是一種氧化還原指示劑，可以還原為白色，所以，石蕊牛乳（紫乳）是用來測定被檢細菌幾種代謝性質(zhì)的一種鑒別培養(yǎng)基。則VP是陰性；或者相反。② 取出平板，在菌落處滴加碘液少許，觀察。包括液體靜置深層培養(yǎng)和生物反應(yīng)器（發(fā)酵罐）深層培養(yǎng)。如有超凈工作臺，應(yīng)先打開通風機，過濾除塵，如有紫外線燈應(yīng)同時打開，1015min后可開始工作。② 菌落溶血特征α溶血：又稱草綠色溶血，菌落周圍培養(yǎng)基出現(xiàn)1~2mm的草綠色環(huán)，為高鐵血紅蛋白所致；β溶血：又稱完全溶血，菌落周圍形成一個完全清晰透明的溶血環(huán)，是細菌產(chǎn)生的溶血素使紅細胞完全溶解所致；γ溶血：即不溶血，菌落周圍的培養(yǎng)基沒有變化，紅細胞沒有溶解或缺損。（3）培養(yǎng)基的種類① 基礎(chǔ)培養(yǎng)基：含有一般細菌生長繁殖需要的基本營養(yǎng)物質(zhì)；可作為一些特殊培養(yǎng)基的基礎(chǔ)成分。，寬容作舟，泛舟于海，方知海之寬闊；生活如山，寬容為徑，循徑登山，方知山之高大；生活如歌，寬容是曲，和曲而歌，方知歌之動聽。② 加富培養(yǎng)基：在基礎(chǔ)培養(yǎng)基中加入某些特殊營養(yǎng)物質(zhì)（如血液/血清、酵母浸膏或生長因子等）；用以培養(yǎng)對營養(yǎng)要求高的微生物。③ 色素有些細菌產(chǎn)生水溶性色素，使菌落和周圍的培養(yǎng)基出現(xiàn)綠色、金黃色、白色、橙色、檸檬色等顏色，產(chǎn)生的色素有水溶性或脂溶性。不論在桌面上還是在超凈工作臺上接種，都要事先作好準備工作，把所用的物品器械擺好。透析培養(yǎng)根據(jù)小分子能透過半透膜擴散，而將不同分子量的物質(zhì)分離原理設(shè)計的一種細菌培養(yǎng)裝置進行細菌培養(yǎng)。③ 培養(yǎng)基呈深藍色，說明淀粉未被水解，即淀粉酶陰性。這個試驗對區(qū)別大腸埃希氏菌與腸桿菌是特別有用的。（2）培養(yǎng)基加石蕊酒精飽和溶液于新鮮脫脂乳中，分裝小管，經(jīng)流通蒸汽滅菌而成。硝酸鹽還原試驗（1）原理有些細菌能從硝酸鹽提出氧而將其還原為亞硝酸鹽（偶而還會形成NH3+ NNO、NO2和NH4OH的其它產(chǎn)物），若向培養(yǎng)物中加入對氨基苯磺酸和α萘胺，會形成紅色的重氮染料對磺胺苯偶氮α萘胺，這對鑒定細菌是有用的試驗（鋅也可還原硝酸鹽為亞硝酸鹽，而且對區(qū)別假陰性反應(yīng)和真陰性反應(yīng)是有用的）。（3）試驗方法與解釋可用接種環(huán)將一菌落放于載玻片的中央，加一滴3%H2O2于菌落上，立即觀察有無氣泡出現(xiàn)，也可在菌落和H2O2混合物之上放一張蓋玻片，可幫助檢出輕度反應(yīng)，還可降低細菌的氣溶膠顆粒的形成。若細菌不脫羧，培養(yǎng)基不變則為黃色。（2）培養(yǎng)基明膠培養(yǎng)基（見附錄）。所以有莢膜的細菌的毒力比該種細菌失去莢膜時的毒力明顯增強。G+菌：菌體表面的突出物。（3）試驗方法取一環(huán)細菌純培養(yǎng)物接種在ONPG培養(yǎng)基上置37℃培養(yǎng)13h或24h，如有β半乳糖苷酶，會在3h內(nèi)產(chǎn)生黃色的鄰硝基酚；如無此酶，則在24h內(nèi)不變色。② 試 劑：10% FeCl3水溶液（3）試驗方法將被檢菌1824h培養(yǎng)物取出，（或45滴）10%FeCl3，溶液于生長面上，變綠色者為陽性。1接觸酶試驗（1）原理本試驗是檢測細菌有無接觸酶的存在，過氧化氫的形成看作是糖需氧分解的氧化終未產(chǎn)物，因為H2O2的存在對細菌是有毒性的，細菌產(chǎn)生酶將其分解，這些酶為接觸酶（過氧化氫酶）和過氧化物酶。（3）試驗方法與解釋① 用接種針蘸取純培養(yǎng)物，沿試管壁作穿刺，37℃孵育2448h或更長時間，培養(yǎng)基變黑者為陽性。石蕊牛乳試驗（1）原理石蕊是一種指示劑，；pH接近中性，未接種的培養(yǎng)基為紫藍色故稱紫乳。VP試驗則是某些細菌能使葡萄糖發(fā)酵而產(chǎn)生丙酮酸，丙酮酸再變?yōu)橐阴＜谆状迹姨谆状加肿兂?,3,丁二烯醇，2,3,丁二烯醇在有堿存在時氧化成二乙酰，后者和胨中的胍基化合物起作用產(chǎn)生粉紅色化合物。（2）培養(yǎng)基與試劑 3%可溶性淀粉瓊脂平板（見附錄）和革蘭氏碘溶液（見附錄一）（3）試驗方法① 將細菌劃線接種于3%可溶性淀粉瓊脂平板上，在37℃培養(yǎng)24h。深層培養(yǎng)將細菌液接種于液體培養(yǎng)基進行培養(yǎng)。（2）各種物品的準備取出待檢病料，置于工作臺上；接種前準備好酒精燈、接種環(huán)、火柴、酒精棉球、試管架等。多見于厚莢膜或豐富粘液層的細菌、結(jié)核桿菌等。（2）制作培養(yǎng)基的基本要求①適宜的水分和各種營養(yǎng)物質(zhì)；②適宜的酸堿度與滲透壓；③不含抑制細菌生長的物質(zhì)；④應(yīng)均質(zhì)透明；⑤應(yīng)徹底滅菌；⑥對某些微生物必須提供一些特殊物質(zhì)。病原細菌的分離與鑒定 發(fā)布日期：20090509 瀏覽次數(shù)：827 字號：[ 大 中 小 ] 一、實驗?zāi)康南到y(tǒng)學習獸醫(yī)臨床病原細菌的分離與鑒定技術(shù)，促進學生系統(tǒng)掌握各類病原細菌的基本特性與實驗診斷技術(shù)，增強學生應(yīng)用所學知識解決生產(chǎn)實踐過程中的傳染病的診斷和防控問題的能力，為預防、控制和消滅畜禽病原微生物，保障畜牧業(yè)生產(chǎn)的健康發(fā)展服務(wù)。③ 選擇培養(yǎng)基：利用細菌對某種或某些化學物質(zhì)