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正文內(nèi)容

20xx年醫(yī)學(xué)專題—免疫細(xì)胞分泌研究進(jìn)展(專業(yè)版)

  

【正文】 而生長(zhǎng)激素(GH)對(duì)幾乎所有免疫細(xì)胞如淋巴細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、 NK細(xì)胞、 胸腺細(xì)胞等都有促進(jìn)分化和加強(qiáng)功能的作用。   最近, Paumet等[23]在RBL2H3肥大細(xì)胞株上對(duì)細(xì)胞胞吐的SNARE分子機(jī)制進(jìn)行了研究, 發(fā)現(xiàn)了幾種SNARE蛋白質(zhì)復(fù)合體的異構(gòu)體表達(dá),其中一種23 kDa的SNAP (SNAP23)對(duì)SNARE的形成非常重要。46。關(guān)于膜融合孔調(diào)控的分子機(jī)制研究還剛剛起步。人的中性粒白細(xì)胞是成功應(yīng)用wholecell和oncell膜片鉗法進(jìn)行研究的少數(shù)免疫細(xì)胞之一[10]。絲裂酶原刺激后24 h可使K電流增大。神經(jīng)遞質(zhì)的分泌與細(xì)胞鈣離子濃度緊密偶聯(lián)(與鈣離子濃度的3~4次方成正相關(guān))。 [!]  電化學(xué)技術(shù)監(jiān)測(cè)分泌的最大優(yōu)點(diǎn)是時(shí)間分辨率高(ms級(jí)), 能監(jiān)測(cè)單個(gè)囊泡的釋放以及囊泡中 的遞質(zhì)含量, 且較膜電容測(cè)量更為直觀。細(xì)胞分泌的最后一步是囊泡膜與胞漿膜融合的過(guò)程,當(dāng)分泌發(fā)生時(shí)細(xì)胞膜的表面積會(huì)增加, 而細(xì)胞膜的電容大小正比于細(xì)胞膜的表面積(~1 μF/cm2),因此細(xì)胞膜電容的增加就代表細(xì)胞分泌量。故而有關(guān)細(xì)胞分泌活動(dòng)的研究近年在國(guó)際上形成一個(gè)新的熱點(diǎn)。   1amp。施加的電壓可為恒電位或三角波循環(huán)電壓,前者的優(yōu)點(diǎn)是時(shí)間分辨率高, 后者的優(yōu)點(diǎn)是能區(qū)分不同的信息分子。1amp。Na通道僅存在于少數(shù)T細(xì)胞、 T細(xì)胞株和自然殺傷細(xì)胞。2 免疫細(xì)胞分泌抗體或細(xì)胞因子的研究   經(jīng)過(guò)適當(dāng)處理, 免疫細(xì)胞可應(yīng)用膜片鉗測(cè)量細(xì)胞膜電容。在融合孔閃爍過(guò)程中,其電導(dǎo)通常<1 ns, 并且在開(kāi)和關(guān)兩種狀態(tài)的大小是一致的, 這表明中性粒細(xì)胞的融合孔在低電導(dǎo)時(shí)不存在細(xì)胞膜脂質(zhì)的流動(dòng)。 這一過(guò)程除需要激活酪氨酸激酶(tyrosine kinase)外,還需要PKC的激活來(lái)使絲氨酸和蘇氨酸磷酸化。amp。形態(tài)學(xué)研究表明,在幾乎所有免疫細(xì)胞上都有不同神經(jīng)遞質(zhì)和激素的受體, 同時(shí)許多種神經(jīng)遞質(zhì)和激素受體在免疫細(xì)胞上都有分布。   細(xì)胞因子和神經(jīng)遞質(zhì)以及激素的多功能位點(diǎn)特性是其神經(jīng)和免疫調(diào)節(jié)的分子基礎(chǔ)。細(xì)胞內(nèi)膜結(jié)構(gòu)上存在4種VAMP蛋白: VAMP cellubrevin、 tIVAMP和VAMP8, 其中以VAMP8對(duì)細(xì)胞胞吐活動(dòng)最為重要。MHCI類抗原NK細(xì)胞受體可抑制NK細(xì)胞的脫顆粒和自然殺傷作用,但是尚不清楚是哪種特異性受體介導(dǎo)了這種作用, 以及這些受體是否影響細(xì)胞因子分泌等NK細(xì)胞的其他功能。與融合孔的研究相比, 對(duì)膜分裂孔(fission pore)的研究非常有限, 因?yàn)榘嬆遗萃ǔ7浅P? 不能被全細(xì)胞膜電容記錄所分辨, 而細(xì)胞貼附式膜電容記錄可分辨出單個(gè)囊泡的胞飲, Lollike已經(jīng)分辨出直徑300~700 nm的小囊泡分裂孔[2]。進(jìn)一步研究Ca2 和GTPγS的促分泌效率的差別和他們分別在什么情況下起作用將是一個(gè)重要課題。電壓依賴性Ca通道僅在B淋巴細(xì)胞上存在, 而在T淋巴細(xì)胞以及T淋巴細(xì)胞株均未見(jiàn)報(bào)道。DMnitrophen在光解前對(duì)Ca2 有很高的親和力,對(duì)靜息的細(xì)胞鈣緩沖幾乎沒(méi)有影響, 是研究細(xì)胞鈣緩沖和鈣穩(wěn)態(tài)系統(tǒng)的非常理想的材料。但是電極只能檢測(cè)到少部分信息物質(zhì)(10%左右),而且對(duì)于那些不能被氧化的物質(zhì)的釋放不能直接檢測(cè)[16]。46。細(xì)胞分泌活動(dòng)涉及一系列復(fù)雜的分子活動(dòng)和信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)過(guò)程, 隨著新技術(shù)尤其是細(xì)胞分泌檢測(cè)技術(shù)的不斷出現(xiàn),這一過(guò)程正在被逐步揭示出來(lái)。54卷測(cè)定。2 電化學(xué)測(cè)量   用電化學(xué)技術(shù)監(jiān)測(cè)細(xì)胞分泌的原理是: 在電極尖端表面施加一定的電壓, 容易氧化的化學(xué)信使物質(zhì)就會(huì)在電極尖端釋放出電子而發(fā)生氧化,電極可獲得電子并產(chǎn)生一定的電流[3]。另一種方法是通過(guò)基因轉(zhuǎn)染方法將熒光基因如綠色熒光蛋白(GFP)基因轉(zhuǎn)入靶細(xì)胞中并選擇性地在囊泡中表達(dá),然后用激光掃描共聚焦熒光顯微鏡等檢測(cè)囊泡的運(yùn)動(dòng)過(guò)程[5]。1 免疫細(xì)胞的離子通道和細(xì)胞功能   免疫細(xì)胞不屬于可興奮性細(xì)胞(如神經(jīng)細(xì)胞、 肌肉細(xì)胞等)之列, 但也具有某些與神經(jīng)細(xì)胞相類似的電生理特性。聯(lián)合應(yīng)用膜片鉗技術(shù)、單細(xì)胞熒光測(cè)量以及報(bào)告基因(如GFP、 rFP)等研究方法, 有望闡明免疫細(xì)胞的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)、 淋巴
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