【正文】 2．操作方法 麻醉、切口、暴露前列腺，在精囊內(nèi)側(cè)的前列腺背葉注射消痔靈，縫合，術(shù)后 7日前列腺炎造模成功。 (2)大鼠前列腺纖維增生炎癥病理模型：以 25％消痔靈注射 0． 2ml注射囊內(nèi)側(cè)前列腺背。 3．藥物療效觀察 用 B型超聲顯象法測定前列腺體積 (近似值：最大橫徑x縱桿 x厚徑 )，比較用藥前后體積變化。 (4)前列腺 DNA：可用牛胸腺 DNA作為標準，按二苯胺法測定。 3．造模成功的指標和藥物療效觀察 同 Masugi腎炎模型。加生理鹽水 20ml，制成懸液。常見有肺腎氣虛、脾腎陽虛、肝腎虛、水濕、濕熱、血瘀。 (4)如果用藥時間長或需要損傷程度輕，可在手術(shù)前用低蛋白飼料。 藥物療效觀察： (1)一般觀察：動物的體重、尿量、體毛和 — 般活動狀況。根據(jù)新藥可能的作用機制特點選擇適當?shù)哪Ｐ?。抑制腎皮質(zhì)細胞溶酶體內(nèi)的磷脂酶 A和 C，導致磷脂、磷脂酰肌醉在溶酶體內(nèi)菖積，溶酶體由于磷脂的沉積，最后破裂而致細胞損傷。腎衰陽性對照組用地塞米松 (0． 1mg／ kg)或右旋糖酐 (相對分子質(zhì)量 75000， 10ml／ kg，靜脈注射 )。 所試藥物的藥效可根據(jù)用藥后對以上指標的改善來評價，結(jié)果進行組間比較，統(tǒng)計學處理采用 t檢驗。特點為簡單易行，病變較穩(wěn)定，用家兔、大鼠、小鼠作模型動物。 二、藥效學研究的實驗設(shè)計 (一 )急性腎衰動物模型 l 常用動物模型 (1)大鼠血紅蛋白尿 ARF模型；以甘油肌內(nèi)注， 24h后即有尿素氮升高，少尿或無尿等類似人的 ARF癥狀。 2 觀察指標 (1)生化指標：①血肌酐 (BUN)、血清尿素氮 (Scr)水平；② 24h肌酐、尿素總排出量；③ 24h肌酐清除率。 (2)維拉帕米 (異博定 )。從腎動脈按每分鐘 0． 75ug／ kg，滴注去甲腎上腺素，連續(xù) 40min停藥。 受損的腎小管通透性增高，原尿漏出并返回腎血管，因而產(chǎn)生少尿、無尿。 (3)尿 NAG酶反溶曲酶的檢查。 (2)其他可供分析的指標：①各組動物間體重、死亡率的比較；②尿量及尿液成分分析 (主要為尿蛋白含量的比較 )；③各組動物紅細胞數(shù)、血紅蛋白和紅細胞比積的比較；④各組動物間血鈉、鈣、磷、鉀等電解質(zhì)含量的比較；⑤腎臟組織病理學觀察。 (2)采血時應(yīng)特別住意防溶血 . (3)配制飼料時，腺嘌呤要充分與飼料混合均勻。 2星期后，以同樣的操作二期手術(shù)，摘右腎。 二、藥效學研究的實驗設(shè)計 (一 )對慢性腎炎動物模型的治療作用實驗 1 常用動物模型 (1)兔 Masugi模型：以抗兔 (大鼠 )腎血清靜肺注射兔，至蛋白尿出現(xiàn)，形成模型。 水浴中 o． 5h滅活用。中醫(yī)認為前列腺肥大屬”癃閉”范疇。本癥?？诜o藥．應(yīng)注意劑量的合理性。 3．造模成功的指標和藥物療效觀察指標 同激素法模型。 (3)卵磷質(zhì)小體密度 (前列腺液中 )。 3．造模成功的指標 鏡檢前列腺液中卵磷質(zhì)小體密度減少，白細胞數(shù)增加，前列腺標本病理形態(tài)學檢查診斷為前列腺炎模型。 三、動物模型的建立方法 (一 )非菌性前列腺炎的模型的建立 1．原理 注入角叉菜膠生理鹽水．能引起前列腺液檢驗指標的顯著改變，而注入等量滅菌生理鹽水則不能引起顯著改變。前列腺炎多由大腸桿菌，金黃色葡萄球菌感染所致。 3．造模成功指標與藥物療效觀察 鏡檢前列腺，與空白對照組比較增生程度，或取前列腺稱重計算前列腺指數(shù)以及測前列腺中 DNA含量與空白對照組比較，藥效可根據(jù)前列腺鏡檢、前列腺指數(shù)、 DNA含量、磷酸酶含量來評價。 2．觀察指標 (1)前列腺指數(shù) [前列腺重 mg／ g(體重 )]。 (二 )大鼠 Heymann腎小球腎炎模型 1．原理 本方法用大白鼠腎組織，注射給同種大鼠，經(jīng)過一段時間，受試動物產(chǎn)生抗原 — 抗體復合物，沉淀于腎小球血管壁而形成腎小球腎炎。 (二 )陽性對照藥 藥典或中成藥中用治療慢性腎炎的新藥，均可用作對照藥。將經(jīng)燒灼的腎臟放回，縫合肌層與皮膚．操作全過程不超過 l0min?？梢姎堄嗄I臟代償性增大，鏡檢可見腎小球毛細管擴張，內(nèi)皮細胞肥大，系膜基質(zhì)增生，大鼠上皮內(nèi)皮細胞壞死，毛細管腔消失的腎小球玻璃樣變性從硬化的病理過程。 三、動物模型建立方法 (一 )大鼠腺嘌呤 CRF模型 1. 原理 高濃度腺嘌吟通過黃嘌呤氧化酶的作用生成極難溶于水的 2， 8— 二羥腺嘌吟，后者沉積在腎小管，影響了氮質(zhì)化合物的排世，導致氮質(zhì)血癥、毒素蓄積從電解質(zhì)和氨基酸代謝紊亂，最終引起腎功能衰竭。 二、藥效學研究的實驗設(shè)計 (一 )對疾病動物模型的治療作用試驗 1．常用動物模型 (1)大鼠腺嘌呤 CRF模型：大鼠經(jīng)含 0． 5％～ 0. 75％腺嘌吟 (adenine)飼料喂養(yǎng)引起的。進行尿常規(guī)檢查。 (3)病理學檢查。 1— 5日內(nèi)進行實驗。在此模型早期，腎血管阻力增加，腎血流量減少，腎皮質(zhì)區(qū)域的血管重度收縮，如所試藥物可能有類似于異博定的降低腎血管力、增加腎血流量等作用，采用此模型較適當。泌尿系統(tǒng)與男性生殖系統(tǒng)藥效學研究的設(shè)計和方法 第一節(jié) 急性腎功能衰竭藥 一、試驗設(shè)計的醫(yī)學基礎(chǔ) 急性腎功能衰竭 (簡稱 ARF)是危急重癥，屬中醫(yī)“癃閉”、“關(guān)格”、“腎風”等范疇。 一般認為大鼠血紅蛋白尿性 ARF模型二種機制均有，接近于人的創(chuàng)傷性 ARF，特別是積壓綜合征。選體重減輕并有脫水的大鼠以 50％甘油按 10ml／ kg分別在兩側(cè)后肢肌內(nèi)注射 .大鼠自由進食和飲水， — 般于 2h后出現(xiàn)血紅蛋白尿，48h形成穩(wěn)定模型。 (2)BUN、 Scr、血清總蛋白和白蛋白、血清 K和 Na(藥前 1h及用藥 1h、 2