【正文】 這種油菜在噴施另一種除草劑 2,4D后即被全部殺死。 雙元系統(tǒng)的特點(diǎn) 三、植物細(xì)胞的直接轉(zhuǎn)化程序 ?槍擊法 將待轉(zhuǎn)化的 DNA沉淀在細(xì)小金屬珠的表面 ， 用特制槍將金屬珠直接打入植物細(xì)胞 ， 槍的威力為430 m / s， 植物細(xì)胞通常是胚胎細(xì)胞 、 玉米籽 、葉子等 ， 但進(jìn)去的 DNA片段整合效率極低 。 (5) 天然 Ti質(zhì)粒作載體的缺點(diǎn) （ 6）、 Ti 質(zhì)粒的改造 ? 除去 TDNA上的 tmt， tms和 tmr生物合成基因； ? 除去 Ti 質(zhì)粒的其它非必需序列 ， ? 安裝大腸桿菌復(fù)制子 ， ? 安裝植物細(xì)胞的篩選標(biāo)記，如 neor 基因，使用植物基因的啟動(dòng)子和 polyA化信號(hào)序列； ? 插入人工多克隆位點(diǎn) ， 以利于外源基因的克隆 。第六章 植物基因工程 ? 轉(zhuǎn)基因植物 將 外源基因 導(dǎo)入 植物細(xì)胞 ，經(jīng) 組織培養(yǎng) ，獲得能夠 表達(dá)外源基因 的植物稱為轉(zhuǎn)基因植物。 改造后的 Ti質(zhì)粒載體模式 ori (7) Ti載體的類型 ? 共整合載體（ cointegrate vectors） 由比利時(shí)科學(xué)家 1983年改造的 pGV3850 受體載體，需要同源重組才能插入外源基因。 基因槍介導(dǎo)的 DNA轉(zhuǎn)移 ? 基因槍法最早是由美國康奈爾大學(xué)的Sanford最先提出的。 美國轉(zhuǎn)基因長(zhǎng)粒米污染事件 ? 2023年 8月，拜耳公司對(duì)外公布未經(jīng)批準(zhǔn)的轉(zhuǎn)基因水稻少量混入商品稻米 ? 日本、歐盟宣布停止進(jìn)口美國長(zhǎng)粒米。 中國 Bt抗蟲棉事件 加拿大“超級(jí)雜草”事件 由于基因漂流，在加拿大的油菜地里發(fā)現(xiàn)了個(gè)別油菜植株可以抗 13種除草劑，因而有人稱此為“超級(jí)雜草”。 穿梭質(zhì)?？稍谵r(nóng)桿菌內(nèi)自主復(fù)制 ? 插入外源基因的重組穿梭質(zhì)粒直接轉(zhuǎn)化含有 Ti質(zhì)粒的根瘤農(nóng)桿菌，經(jīng)篩選后直接感染植物細(xì)胞。且單一的酶切位點(diǎn)很少； ③ tms和 tmr 基因產(chǎn)物干擾植物內(nèi)源激素的平衡，產(chǎn)生冠癭瘤，阻礙轉(zhuǎn)基因植物細(xì)胞的分化和再生； ④冠癭堿的合成過程消耗大量的精氨酸和谷氨 酸，直接影響轉(zhuǎn)基因植物細(xì)胞的生長(zhǎng)代謝； ⑤無大腸桿菌的復(fù)制起點(diǎn)和作為轉(zhuǎn)化載體的選擇標(biāo)記基因。 抗蟲 抗病 抗逆 生產(chǎn)藥物 ? 外源基因 ：選擇？克??？ ? 植物細(xì)胞 ：受體細(xì)胞的種類？ ? 導(dǎo)入 ：方法？ ? 組織培養(yǎng) ：（略） ? 表達(dá)外源基因 ：如何檢測(cè)、篩選？ 植物遺傳轉(zhuǎn)化的 受體系統(tǒng) 、 載體系統(tǒng) 和 遺傳轉(zhuǎn)化方法 是轉(zhuǎn)基因植物生產(chǎn)的關(guān)鍵 一、高等植物的遺傳特性 植物的基本特征 : ? 遺傳操作的簡(jiǎn)易性 能產(chǎn)生大量的后代 ? 整株植物的再生性 不能有效地吸收外源 DNA； 細(xì)胞全能性 ? 染色體的多倍體性 多倍體植物的遺傳不穩(wěn)定性，導(dǎo)致體細(xì)胞變異 二、 高等植物的基因轉(zhuǎn)移系統(tǒng) ?Ti 質(zhì)粒介導(dǎo)的整合轉(zhuǎn)化程序 ?植物病毒介導(dǎo)的轉(zhuǎn)染程序 (略 ) ?植物細(xì)胞的直接轉(zhuǎn)化程序 ?植物原生質(zhì)體的再生