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牛奶中酪蛋白的分離與鑒定(專業(yè)版)

2025-09-26 23:16上一頁面

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【正文】 將要測A的試樣溶液推入光路,顯示值即為待測樣品的吸光度值A。當(dāng)與蛋白質(zhì)結(jié)合形成復(fù)合物時呈藍(lán)色,最大吸收峰改變?yōu)?595nm,考馬斯亮藍(lán) G250蛋白質(zhì)復(fù)合物的高消光效應(yīng)導(dǎo)致了蛋白質(zhì)定量測定的高敏感度(比 Lowry法靈敏 4倍) 在一定范圍內(nèi),蛋白質(zhì)和染料考馬斯亮藍(lán)結(jié)合符合比爾定律 ,因此可以通過測定染料在 595nm處光吸收的增加量得到與其結(jié)合的蛋白質(zhì)量。它在牛乳中的含量約為 35g/L,比較穩(wěn)定,利用這一性質(zhì)可以檢測牛乳中是否摻假。 三、 適用范圍與特點 ? 適用于脂類含量較高,結(jié)合態(tài)脂類含量少或經(jīng)水解處理過的,(結(jié)合態(tài)已轉(zhuǎn)變成游離態(tài)),樣品應(yīng)能烘干,磨細(xì),不易吸濕結(jié)塊。 利用水分本身的物理性質(zhì)和化學(xué)性質(zhì)測定水分的方法,叫做 直接法, 如 重量法 ,蒸餾法和卡爾 .費休法等; 利用食品的比重,折射率,電導(dǎo),介電常數(shù)等物理性質(zhì)測定水分的方法,叫做 間接法。 ? 應(yīng)用本法測定水分的樣品應(yīng)符合下述條件: (1)水分是唯一的揮發(fā)物質(zhì); (2)水分的排除情況很完全; (3)食品中其他組分在加熱過程中由于發(fā)生化學(xué)反應(yīng)而引起的重量變化可以忽略。 ?取出濾紙包,于戶外晾至無乙醚味,置入恒溫箱內(nèi),烘干,然后移入干燥缸內(nèi)冷卻后稱重,重復(fù)操作至恒重( m7)。將懸浮液冷卻至室溫,室溫放置分層 , 3000r/min離心 15min,收集沉淀。 五 注意事項 ( 1) 如果測定要求很嚴(yán)格 , 可以在試劑加入后的 520 min內(nèi)測定光吸收 , 因為再這段時間內(nèi)顏色最穩(wěn)定 。 注意事項 : ( 1) 儀器接地要良好,否則顯示數(shù)字不穩(wěn)定。 ( 2) 開啟電源開關(guān),指示燈亮,選擇開關(guān)置于“ T”,調(diào)節(jié)透光率[100%T]旋鈕使數(shù)字顯示 []左右,預(yù)熱 20min . 2.校正 ( 1)打開吸收池暗室蓋(光門自動關(guān)閉),調(diào)節(jié) [0% T]旋鈕,使數(shù)字顯示為“ ”,蓋上吸收池蓋,將參比溶液置于光路,使光電管受光,調(diào)節(jié)透光率 [100%T]旋鈕,使數(shù)學(xué)顯示為“ ”。它是生化實驗中提取、分離、純化的常用設(shè)備,操作的關(guān)鍵環(huán)節(jié)是平衡。 過氧化物會導(dǎo)致脂肪氧化 , 在烘干時也有引起爆炸的危險 。 整個提取過程均在索氏提取器中進(jìn)行 。牛奶中活性物質(zhì)的分析 實驗內(nèi)容 ? 1牛奶中水分含量的測定 ? 2牛奶中粗脂肪的提取與測定 ? 3牛奶中酪蛋白的提取 ? 4蛋白質(zhì)含量的測定 ( 1)牛奶中水分含量的測定 ? 水分是食品分析的重要項目之一。 ? 本實驗用重量法 , 利用脂肪能溶于脂溶性溶劑這一特性 , 用脂溶性溶劑將脂肪提取出來 , 借蒸發(fā)除去溶劑后稱量 。 因水和醇可導(dǎo)致水溶性物質(zhì)溶解 , 如水溶性鹽類 、 糖類等 , 使得測定結(jié)果偏高 , 被測樣品也要事先烘干
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