【正文】 本試驗(yàn)金黃色葡萄球菌為陽性。此外，金黃色葡萄球菌還產(chǎn)生溶表皮素、明膠酶、蛋白酶、脂肪酶、肽酶等?！　〗瘘S色葡萄球菌在自然界中無處不在，空氣、水、灰塵及人和動物的排泄物中都可找到。相比之下，黎兆滾等人的方法可在27h內(nèi)完成，比上述方法縮短了一半的時間，頗值得推廣應(yīng)用?！　∫钥贵w為基礎(chǔ)的檢測方法　　利用抗原抗體反應(yīng)的顯著特異性，來進(jìn)行細(xì)菌的鑒別和血清學(xué)定型，已有半個多世紀(jì)的歷史。但至少有三個因素限制了用于臨床病料的方法應(yīng)用在食品分析上。危害及影響　　夏天正是新鮮蔬果搶閘上市的時節(jié)，而在大洋彼岸的美國，這個夏天卻有不少人因生吃西紅柿被“絆倒”了——據(jù)最近統(tǒng)計，目前，美國已有30個州幾百人因生食了從墨西哥進(jìn)口的帶有沙門氏菌的新鮮西紅柿而中毒，患者中至少48人因病情嚴(yán)重住院，其中１人死亡，而“生食療法”被視為一種健康的時尚，如今聽說生吃蔬果也會中毒，不少人十分著急：到底該如何預(yù)防？對此，專家指出，并不是所有的蔬果都越鮮吃越好，其實(shí)生吃蔬果有不少講究，有些菜涼拌前一定要用開水焯一下，徹底除塵去蟲更衛(wèi)生。不穩(wěn)定，經(jīng)60℃加熱、石碳酸處理或人工傳代培養(yǎng)易破壞或丟失。例如乙型副傷寒桿菌有12三個。對于提交的樣品需保留一份拷貝。10. 鞭毛（H）試驗(yàn)陰性培養(yǎng)物的處理：對一些生化反應(yīng)典型，被認(rèn)為是沙門氏菌，但鞭毛（H）試驗(yàn)陰性的培養(yǎng)物，可能是無動力的菌株，或鞭毛抗原發(fā)育不充分，對此培養(yǎng)物的動力測定方法如下：從TSI斜面上挑取少量的培養(yǎng)物，接種于動力試驗(yàn)培養(yǎng)基平板中，在距平板邊緣10mm處一次穿刺23mm深，不要刺到平板底或接種到其他任何部位。培養(yǎng)物的分類：沙門氏菌培養(yǎng)物應(yīng)具有表1反應(yīng)模式。2h。如在25g分析樣品中有一個TSI培養(yǎng)物被劃為沙門氏菌，則該25g分析樣品的其他TSI培養(yǎng)物就無需進(jìn)一步試驗(yàn)。 沙門氏菌血清學(xué)菌體（O）試驗(yàn)。2小時，但24h后觀察反應(yīng)。b、 %衛(wèi)茅醇的紫色肉湯基礎(chǔ)液。制成鹽水對照，將各混合物于4850℃水浴培養(yǎng)，每隔15分鐘觀察一次初步結(jié)果，并于1小時讀數(shù)最終結(jié)果。沙門氏菌菌落有時可使培養(yǎng)基中其它細(xì)菌所造成的膽鹽沉淀區(qū)透明。在LIA瓊脂中，典型的沙門氏菌培養(yǎng)物其試管底層呈堿性（紫色）反應(yīng)。2小時培養(yǎng)后，沒有典型的沙門氏菌菌落，則挑取2個或更多個非典型的沙門氏菌菌落。許多沙門氏菌培養(yǎng)物可有大的光澤黑色中心或呈幾乎全部黑色的菌落。口香糖：SC和TTB肉湯在35℃培養(yǎng)24177。接下來的試驗(yàn)按D,111進(jìn)行。2小時。2小時。177。以下試驗(yàn)按D,311進(jìn)行。1椰子無菌操作稱取25g樣品于滅菌帶螺旋帽的廣口瓶中(500ml)或其它合適的容器內(nèi)，蓋緊瓶塞，室溫下靜置60177。搖勻，用PH試紙測PH值，如果需糾正PH值，用無菌1N NaOH或1N 177。振蕩混勻，用PH試紙測PH值，如果需糾正PH值，用無菌1N NaOH或1N 177。5min，旋松塞子，不需混勻和調(diào)整PH，35℃培養(yǎng)24177。c、 煮硬的蛋（雞蛋、鴨蛋或其他種類的蛋）。把瓶蓋松開約1/4圈，置于35℃培養(yǎng)24177。2℃ 冰箱：4177。在新版的手冊（BAM7）中，%SDS的次氯酸鈉溶液(含Cl200PPM)中30分鐘。除口香糖外的所有食品，RV培養(yǎng)基替代了SC培養(yǎng)基。2h和48177。口香糖樣品和增菌肉湯以1：9的比例進(jìn)行混合，得到的混合物非常粘，不易被吸管吸出。根據(jù)樣品的組成成份不同，添加足夠的肉湯培養(yǎng)基保持1:9的比例，除非特殊說明，例如，蛙腿等不需準(zhǔn)確稱量檢測的樣品，需采用特殊的方法。此溶液的配制如下：取8ml %的次氯酸鈉溶液和1gSDS加入992ml蒸餾水中溶解即可。2h，按D111繼續(xù)。把瓶蓋松開約1/4圈，置于35℃培養(yǎng)24177。搖勻，用PH試紙測PH值，如果需糾正PH值，用無菌1N NaOH或1N 177。無菌稱取25g樣品于滅菌的帶螺旋帽的廣口瓶或其它合適的容器內(nèi)，樣品的前增菌培養(yǎng)基用含K2SO4的TSB肉湯(1000mlTSB肉湯中加入5g K2SO4，%)，將K2SO4加入TSB肉湯中，分裝每瓶225ml，121℃高壓滅菌15min，滅菌后，無菌測定其容量。這些表面活性劑要使用最少的量，剛好產(chǎn)生氣泡。177。將瓶蓋旋松1/4轉(zhuǎn)后，將樣品混合物置35℃培養(yǎng)24177。177。2小時?！妫ㄋ　⒀h(huán)的、溫度可調(diào)）中培養(yǎng)24177。 ，對于冷藏食品的前增菌和低水份食品的選擇性增菌(僅SC和TTB肉湯)方法。2小時培養(yǎng)后的BS瓊脂上，則挑取2個或更多個典型菌落。如果經(jīng)48177。在LIA中呈酸性底層反應(yīng)和在TSI中呈斜面堿性，底層酸性的培養(yǎng)物，均視為可疑的沙門氏菌分離物，應(yīng)進(jìn)一步做生化和血清學(xué)試驗(yàn)。b、 可選的尿素酶試驗(yàn)（快速法）。 SpicerEdwards血清試驗(yàn)用這個實(shí)驗(yàn)可代替多價H血清試驗(yàn)，也可用來對于多價H血清反應(yīng)不明顯的培養(yǎng)物的進(jìn)一步的實(shí)驗(yàn)。大多數(shù)沙門氏菌呈陽性實(shí)驗(yàn)結(jié)果，表現(xiàn)為內(nèi)部發(fā)酵管中產(chǎn)氣和培養(yǎng)基變酸（黃色）。因偶爾會出現(xiàn)未接種的丙二酸鹽肉湯在存放期間變蘭（陽性反應(yīng)），所以應(yīng)有未接種的丙二酸鹽肉湯管作對照。這一區(qū)域的下部加1滴生理鹽水。2h。絕大多數(shù)沙門氏菌VP試驗(yàn)陰性，即整個肉湯不呈粉紅至紅色變化。 9. 沙門氏菌屬的擬定性鑒定。如果上述試驗(yàn)仍為陰性，把該培養(yǎng)物定為無動力菌株。其中與人體疾病有關(guān)的主要有甲組的副傷寒甲桿菌，乙組的副傷寒乙桿菌和鼠傷寒桿菌，丙組的副傷寒丙桿菌和豬霍亂桿菌，丁組的傷寒桿菌和腸炎桿菌等。o抗原刺激機(jī)體主要產(chǎn)生lgm抗體。故測定vi抗體有助于對傷寒帶菌者的檢出。美國人對這種病菌一點(diǎn)都不陌生，每年全國大約報告40000例沙門氏菌感染病例。雖然這些方法本身證明是可靠的，但卻很費(fèi)力、耗時，需要4～7天才能完成。采用微量滴定板作為固態(tài)基質(zhì)使反應(yīng)形式標(biāo)準(zhǔn)化，并促成其自動化。金黃色葡萄球菌及檢驗(yàn)一、生物學(xué)特性　　典型的金黃色葡萄球菌為球型，顯微鏡下排列成葡萄串狀。此外，剩飯、油煎蛋、糯米糕及涼粉等引起的中毒事件也有報道。C培養(yǎng)2448小時?！　θ庵破芳庸S，患局部化膿感染的禽、畜尸體應(yīng)除去病變部位，經(jīng)高溫或其他適當(dāng)方式處理后進(jìn)行加工生產(chǎn)。C培養(yǎng)，每隔半小時觀察一次，連續(xù)觀察6小時，出現(xiàn)凝固，即將小試管傾斜或倒置時，內(nèi)容物不流動，判為陽性。金黃色葡萄球菌的致病力強(qiáng)弱主要取決于其產(chǎn)生的毒素和侵襲性酶：：外毒素，分α、β、γ、δ四種，能損傷血小板，破壞溶酶體，引起肌體局部缺血和壞死；：可破壞人的白細(xì)胞和巨噬細(xì)胞；：當(dāng)金黃色葡萄球菌侵入人體時，該酶使血液或血漿中的纖維蛋白沉積于菌體表面或凝固，阻礙吞噬細(xì)胞的吞噬作用。金黃色葡萄球菌有高度的耐鹽性，可在1015%NaCl肉湯中生長。黎兆滾等人的微量板ELISA法(Salmonellatest1)樣品制備過程分三步，共耗時24h：①選用營養(yǎng)肉湯進(jìn)行預(yù)增菌(6h)，使“致傷”、冷凍的沙門氏菌復(fù)蘇。第二，是選擇性增菌步驟，它使沙門氏菌生長而使肉湯中同時存在的微生物數(shù)量減少，與預(yù)增菌培養(yǎng)基相似，對選擇性培養(yǎng)基的選擇，也存在許多不同的觀點(diǎn)。此外，兩種病菌還各自擁有幾百個對方所不具備的基因?！　騍ANGER中心——還是這個中心，連項(xiàng)目的領(lǐng)導(dǎo)者也跟上面的鼠疫桿菌是同一人——從越南弄來了一種能夠抵抗多種抗生素的傷寒沙門氏菌菌株。具有第1相和第2相h抗原的細(xì)菌稱為雙相菌，僅有一相者稱單相菌。根據(jù)國際慣例，要求對易受沙門氏菌污染的食品進(jìn)行分類管理，以使大多數(shù)食物不含沙門氏菌，從而有效預(yù)防沙門氏菌病。試管標(biāo)貼上樣品編號，分析編號和密碼。加試劑，觀察與記錄結(jié)果。置于35℃培養(yǎng)96177。2) 除培養(yǎng)物在TSI瓊脂斜面上產(chǎn)酸和在LIA中呈陽性反應(yīng)，或丙二酸鹽肉湯試驗(yàn)呈陽性的培養(yǎng)物外，棄去乳糖試驗(yàn)陽性的非沙門氏菌培養(yǎng)物。陰性反應(yīng)：混合物試驗(yàn)不凝集，在鹽水對照中也不凝集。并記錄呈桔色和粉色變化的中間型為177。2小時，并按以下進(jìn)行試驗(yàn)。將試管帽旋緊，置于35℃培養(yǎng)48177。0。對所分析的每個25g樣品，至少應(yīng)檢查6個TSI培養(yǎng)物。將已挑過菌落的選擇性平板于58℃儲存。2小時培養(yǎng)的BS平板上挑取了菌落，接種到三糖鐵瓊脂（TSI）和賴氨酸瓊脂（LIA）上，會呈現(xiàn)非典型反應(yīng)以至視為培養(yǎng)物中不存在沙門氏菌 。2小時培養(yǎng)后選擇性平板上挑取2個或更多個菌落。℃（水浴、循環(huán)的、溫度可調(diào)）中培養(yǎng)24177。加入01%已蒸過（15分鐘）的Tergitol7或已蒸過（15分鐘）的Triton100來代替。（纖維素酶溶液在25℃可保存最長2周時間）。從袋中傾倒出乳糖肉湯于另一個滅菌塑料袋內(nèi)。再無菌操作轉(zhuǎn)移已攪拌的混合物到滅菌的帶螺旋帽的500mL廣口瓶中或其他合適的容器內(nèi)。無菌操作稱取25g樣品，放入滅菌的帶螺旋帽的500ml廣口瓶內(nèi)，加入225ml不含煌綠的TTB肉湯混勻，蓋緊瓶塞，室溫下靜止60177。5min。把瓶蓋松開約1/4圈置于35℃培養(yǎng)24177。檢測前最好不要解凍，如檢測樣品必須解凍，需在45℃以下進(jìn)行，置于能自動控溫的水浴鍋內(nèi)，不斷攪拌15分鐘或在25℃解凍18小時。無菌稱取25g樣品于無菌的250ml燒杯或其他適宜的容器內(nèi)，用滅菌的玻璃或紙質(zhì)的漏斗（用帶卷好以便高壓滅菌）將樣液25ml慢慢注入滅菌的500ml的含225ml的普通肉湯的錐形瓶中或其他適宜的容器內(nèi)，使其覆蓋在普通肉湯的表面，也可多個25g檢測單位混合倒入含有相應(yīng)比例普通肉湯的容器內(nèi)，使樣品覆蓋在普通肉湯的表面，將樣品容器室溫靜置60177。置于35℃培養(yǎng)24177。對于非粉末狀的樣品，加入225ml無菌的乳糖肉湯；對于粉末狀的樣品，先加入約15ml無菌的乳糖肉湯，用無菌的玻璃捧、藥匙或舌狀器具攪拌，使其均勻懸浮，再加入3份無菌乳糖肉湯，分別為10ml、10ml和190ml,使總量為225ml。最后，自成BAM7發(fā)行以來，已經(jīng)制定出6種培養(yǎng)基的使用說明。所以，TSI和LIA斜面培養(yǎng)基現(xiàn)在改為培養(yǎng)24177。FDA沙門氏菌檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)中文版（一）. Department of Health and Human Services . Food amp。再培養(yǎng)24h后，試驗(yàn)的結(jié)果沒有什么重大的改變。由于在過去的幾年里，F(xiàn)DA的科學(xué)家們從一些食品中，特別是從海產(chǎn)品中分離出沙門氏菌，其中4%左右在選擇性平板是非典型菌落。無菌稱取25克樣品，放入無菌帶螺旋帽的廣口瓶中(500ML)或其它合適的容器內(nèi)。振蕩混勻，用PH試紙測PH值，如果需糾正PH值，用無菌1N NaOH或1N 177。酪蛋白a、 乳酪。含蛋制品(面條、蛋卷、空心粉、意大利面條)、干酪、面團(tuán)、調(diào)制色拉(火腿、蛋、雞肉、金槍魚、火雞)、新鮮的、冷凍的或干的水果和蔬菜、果仁和甲殼類動物(小蝦、蟹、小龍蝦、大蝦、大龍蝦)和魚。搖勻，用PH試紙測PH值，如果需糾正PH值，用無菌1N NaOH或1N 177。1密餞和糖衣(包括巧克力)無菌操作稱取25g樣品于滅菌的攪拌器內(nèi)，加入225ml重溶的脫脂奶粉，攪拌2分鐘，再無菌操作移取樣品液到滅菌帶螺旋帽的廣口瓶中(500ml)或其它合適的容器內(nèi)，蓋緊瓶塞，室溫下靜置60177。1食品染料和食品色素(10%的水懸浮液)，按上述干全蛋方法(以上C1法)進(jìn)行檢測。加入225mL滅菌的乳糖肉湯，攪拌2分鐘。把袋放入大塑料燒杯內(nèi)或其它合適的容器中，在機(jī)械蕩器上震蕩15min，以4cm（11/2in）機(jī)械振蕩100次/分鐘。%纖維素酶溶液（加1g纖維素酶到99mL無菌水中），置于150mL瓶中。177。含菌量低的食品(口香糖除外)：RV培養(yǎng)基在42177。FDA沙門氏菌檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)中文版（二）典型的沙門氏菌菌落形態(tài)：從每個經(jīng)過24177。2小時后，如果BS平