sds-聚丙烯酰胺凝膠電泳(專業(yè)版)
【正文】 （ 4） 電泳 （ 5） 固定 （ 6） 染色 考馬斯亮藍（ coomassie brilliant blue） ① R250 三苯基甲烷，紅藍色，每個分子含有兩個 SO3H基團，偏酸性，和氨基黑一樣也是結合在蛋白質的堿性基團上。 ? SDS和還原劑的作用： （ 1） 分子被解聚 或組成它們的多肽鍵 （ 2）氨基酸側鏈與 SDS充分結合 形成 帶負 電荷的 蛋白質 SDS膠束 。 當?shù)鞍踪|的分子量在 15KD— 200KD之間時， 電泳遷移率與分子量的對數(shù)呈線性關系 影響 SDS電泳的關鍵因素 （ 1） 溶液中 SDS單體濃度（ 1mmol/L) 大多數(shù)蛋白質與 SDS結合的重量比為 1： （ 2） 樣品緩沖液的離子強度（不 ) 低離子強度 的溶液中， SDS單體才具有較高的平衡濃度。 （ 3） “ 拖尾 ” 現(xiàn)象 樣品溶解不佳 引起。 不同分子量范圍的蛋白質應選用不同的凝膠濃度 . （四）分子量測定 相對遷移率（ Rf） Rf即用每個帶的遷移距離除以溴酚藍前沿的遷移距離得到的。SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳 SDSPolyacrylamide gel electrophoresis，SDSPAGE 一、什么是 SDS？ 十二烷基硫酸鈉（ sodium dodecyl sulfate,SDS) 是一種陰離子去污劑。 Tris甘氨酸 系統(tǒng)： 使用最多的緩沖液 Tris硼酸鹽緩沖液： 測定糖蛋白的分子量 （三）凝膠濃度的選擇 由于 SDS電泳分離并不取決于蛋白質的電荷密度，只取決于分子解聚后SDS蛋白質膠束的大小，因此凝膠濃度的選擇會直接影響分辨率。 （ 4） “ 紋理 ”
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