蛋白質(zhì)的四級(jí)結(jié)構(gòu)ppt課件(專業(yè)版)
【正文】 蛋白質(zhì)的沉淀 (precipitation) 概念 : 應(yīng)用 : (1)蛋白質(zhì)分離純化 (2)解毒 (3)臨床檢驗(yàn) (1) 鹽析法 ( salting out) 向蛋白質(zhì)溶液中加入大量中性鹽使蛋白質(zhì)沉淀稱為鹽析 ?常用的中性鹽： 不破壞蛋白質(zhì)的構(gòu)象，蛋白質(zhì)不發(fā)生變性 硫酸銨、 硫酸鈉、 氯化鈉等 使蛋白質(zhì)沉淀的方法 ?概念： ?特點(diǎn)： ?作用原理 : 鹽離子與水親和力極強(qiáng)， 奪去蛋白質(zhì)的 水化層 ，減少分子間 靜電斥力 (2) 有機(jī)溶劑沉淀法 使蛋白質(zhì)脫去水化層 ,又能降低溶液的介電常數(shù)使蛋白質(zhì)表面電荷減少，導(dǎo)致蛋白質(zhì)分子聚集而沉淀 必須在低溫下操作 ?注意事項(xiàng) : 盡量縮短處理的時(shí)間 及時(shí)將蛋白質(zhì)中殘存的有機(jī)溶劑除去 甲醇 、 乙醇 、 丙酮 ?缺點(diǎn)： ? 原理 : ?常用有機(jī)溶劑 : 常會(huì)使蛋白質(zhì)變性 重金屬離子如 Cu2+、 Hg2+、 Ag2+、 Pb2+等帶有正電荷，能與蛋白質(zhì)分子中帶負(fù)電的基團(tuán)結(jié)合，生成不溶性的重金屬蛋白鹽而沉淀 (3) 重金屬鹽沉淀法 此法常使蛋白質(zhì)變性失活 若溶液 pH大于蛋白質(zhì)的 pI，沉淀更易發(fā)生 ?缺點(diǎn)： ?原理 : 生物堿試劑 (如鞣酸 、 苦味酸 、鎢酸等 )， 某些酸類 (主要是指三氯醋酸 、 磺酰水楊酸和硝酸等 )， 與帶正電的蛋白質(zhì) 結(jié)合生成不溶性的鹽而沉淀 (4) 生物堿試劑和某些酸類沉淀法 反應(yīng)溶液的 pHpI，確保蛋白質(zhì)以陽離子形式存在 缺點(diǎn)： 原理 : 常引起蛋白質(zhì)變性 注意事項(xiàng) : 3. 蛋白質(zhì)的凝固作用 蛋白質(zhì)的凝固作用實(shí)際上是蛋白質(zhì)變性后進(jìn)一步發(fā)展的不可逆結(jié)果 如加熱可使蛋白質(zhì)變?yōu)椴蝗菰偃芙獾哪龎K 二、 蛋白質(zhì)的分離純化 (一 ) 鹽析和有機(jī)溶劑沉淀 (二 ) 電泳 (三 ) 透析和超濾 (四 ) 層析 (五 ) 超速離心 分類： 根據(jù)支持物的不同，電泳電泳可分為：
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