【正文】 – ②激活 Chk2，使 P53被磷酸化而激活，然后 P53作為轉(zhuǎn)錄因子，導(dǎo)致 P21的表達(dá)， P21抑制 G1S期 CDK的活性，中斷細(xì)胞周期。 脊椎動(dòng)物 芽殖酵母 激酶復(fù)合體 C y cli n CDK C y cli n CDK G1 CDK C y cli n D* CD K 4 、 6 Cl n 3 CD K 1 ( CD C 2 8 ) G1/S CDK C y cli n E CD K 2 Cl n 1 、 2 CD K 1 ( CD C 2 8 ) S CDK C y cli n A CD K 2 Cl b 5 、 6 CD K 1 ( CD C 2 8 ) M CDK C y cli n B CD K 1 ( CD C 2 ) Cl b 1 4 CD K 1 ( CD C 2 8 ) ? G1期，在生長因子的刺激下， cyclin D表達(dá)，并與 CDKCDK6結(jié)合，使下游的蛋白質(zhì)如 Rb磷酸化， Rb釋放出轉(zhuǎn)錄因子 E2F，促進(jìn)許多基因的轉(zhuǎn)錄，如編碼 cyclinE、 A和CDK1的基因。 ? 結(jié)合 cyclin B的 CDK1被 Wee1將 Thr14和 Tyr15磷酸化而不具有活性，使 CDK/cyclin不斷積累。 PCC 早熟凝集染色體 ? 1960s Leland Hartwell,1970s Paul Nurse 以芽殖酵母和裂殖酵母為實(shí)驗(yàn)材料 ， 利用溫度敏感突變株 ， 發(fā)現(xiàn)許多與細(xì)胞分裂有關(guān)的基因 (cell division cycle gene, CDC)。 2） 其它時(shí)期的形態(tài)功能特征： ? 減數(shù)分裂 meiosis I 的染色體行為有別于普通有絲分裂 ，是同源染色體配對(duì)分離 ， 同源染色體分別趨向兩極 ， 而不是染色體單體分別趨向兩極 ， 這是由于每條染色體兩側(cè)的2個(gè)動(dòng)粒移位朝向同一極的緣故 ， 但這一對(duì)動(dòng)粒究竟朝向哪一極是隨機(jī)的 ， 因?yàn)楹笃谮呄蚰硺O的父方母方來源的染色體是隨機(jī)組合 ， 所以導(dǎo)致子代基因組的遺傳變異 。 ? 動(dòng)物細(xì)胞的胞質(zhì)分裂是受微絲構(gòu)成的收縮環(huán)控制 ，因?yàn)榧?xì)胞松馳素 B能對(duì)其抑制 。 3） G2期：此期細(xì)胞生化活動(dòng)是為 M期的細(xì)胞分裂作準(zhǔn)備 ， 主要是活躍地合成 G2蛋白質(zhì) ， 微管蛋白質(zhì) （ 形成紡錘絲 base） ， RNA及 ATP， 這些都是通過 G2/M檢驗(yàn)點(diǎn)所必需的 。 ? ② Go期細(xì)胞 （ 休眠細(xì)胞 ） 即暫時(shí)脫離周期 ， 但在適當(dāng)?shù)拇碳は氯钥苫謴?fù)進(jìn)入周期的細(xì)胞 。 ? 2）核仁解體： 是由于此期 RNA轉(zhuǎn)錄停止，原形成的 rRNA和 rRNP裝配成的核糖體 unit轉(zhuǎn)移到細(xì)胞質(zhì)中去，而原插入核仁的染色質(zhì) fibre helix化進(jìn)入核仁染色體上，所以逐漸縮小消失。 ? 來自高爾基體囊泡沿微管轉(zhuǎn)運(yùn)到成膜體中間 。 ? SC的功能： ? （ 1）維持同源染色體精確配對(duì)的結(jié)構(gòu)； ? （ 2）確保非姐妹染色體單體之間的染色體片段交換的機(jī)構(gòu)。 ? 1988年 Lohka將非洲爪蟾的 MPF純化 。 現(xiàn)已知有 A、 B、C、 D、 E、 F、 G、 H等多種 ， 其共同特點(diǎn)是細(xì)胞中呈現(xiàn)含量增長與消失的周期性變化規(guī)律 ， 而且在不同階段其為主的類型也有不同 。 – 分裂期周期蛋白 N端有一段序列與其降解有關(guān)，稱降解盒(destruction box)。 – 如通過 ras途徑，激活 MAPK， MAPK進(jìn)入細(xì)胞核內(nèi)，激活 cmyc，myc作為轉(zhuǎn)錄因子促進(jìn) cyclin D、 SCF、 E2F等 G1S有關(guān)的基因表達(dá)，細(xì)胞進(jìn)入 G1期。 – S期檢驗(yàn)點(diǎn)： DNA復(fù)制是否完成？ – G2/M檢驗(yàn)點(diǎn)： DNA是否損傷？細(xì)胞體積是否足夠大？ – 中 后期檢驗(yàn)點(diǎn)：紡錘體組裝檢驗(yàn)點(diǎn)。含有一段約 100個(gè)氨基酸的保守序列，稱為周期蛋白框，介導(dǎo)周期蛋白與CDK結(jié)合。 ? PCC現(xiàn)象不受物種分類所限制 ， 即人 、 牛 、 馬 、雞 、 魚 、 昆蟲的細(xì)胞之間都能誘導(dǎo) PCC ， 因此而言 ，MPF（ 有共性的 ） 在真核細(xì)胞中普遍存在的 。 第二節(jié) 細(xì)胞周期的調(diào)控 一、研究背景 ? 1970s Rao和 Johnson發(fā)現(xiàn)與 M期細(xì)胞 (Hela)融合的間期細(xì)胞染色體發(fā)生凝縮，稱為早熟凝集染色體 (prematurely condensed chromosome， PCC)。 1） 前期 I各期形態(tài)功能特征： 細(xì)線期：染色體是細(xì)長盤繞的單條 fibre， 其上有眾多 ch粒分布 。 （ 三 ） 后期 (anaphase) ? 此期主要事件是：染色體著絲粒區(qū)縱向斷裂 ，一分為二 ， 兩姊妹染色體單體分別趨向兩級(jí) ， 其原因是 ， 著絲粒區(qū)域在 S期 chr復(fù)制時(shí)已奠定了斷裂分離的結(jié)構(gòu)基礎(chǔ) ， 到后期時(shí)細(xì)胞質(zhì)中 Ca2+濃度倍增 ，誘導(dǎo)了核區(qū)域的聯(lián)接蛋白質(zhì)解體而出現(xiàn)斷裂分離 。 分裂中期阻斷法 ： （ 1） 細(xì)胞周期檢驗(yàn)點(diǎn)： ? 細(xì)胞周期沿 G1—S—G2—M有序地進(jìn)行 ， 是與細(xì)胞分裂周期有關(guān)基因 cdc的有序表達(dá)結(jié)果 ， 而 cdc基因的表達(dá)效應(yīng)是受周期中一些檢驗(yàn)點(diǎn) （ or 稱調(diào)控點(diǎn) ） 監(jiān)控的 ， 以保持嚴(yán)格有序 ， 精確的運(yùn)轉(zhuǎn) ， 而不正常的細(xì)胞會(huì)被阻止在檢驗(yàn)點(diǎn)階段 ， 常說的