臨床微生物檢測的基因同源性分析(專業(yè)版)
【正文】 反轉(zhuǎn)電場凝膠電泳(field inversion gelelectrophoresis，F(xiàn)IGE)，交變電場均一并且是180’反向的。結(jié)果容易分析。實(shí)驗(yàn)流程：；b.實(shí)驗(yàn)流程：；Analyzer分析電泳結(jié)果。Polymorphism優(yōu)勢：膠片顯影；d.有可能有相同的核糖體型圖譜。優(yōu)勢：四、核糖體分型（Ribotyping）原理：PFGE)原理：實(shí)驗(yàn)流程：；（主要是Hind缺點(diǎn)：III）；%瓊脂糖電泳；染色、凝膠成像。,軟件分析。由于整個基因組存在眾多反向重復(fù)序列，單一引物與反向重復(fù)序列結(jié)合。實(shí)驗(yàn)方法的評價：、PCR；%瓊脂糖電泳；。PCR擴(kuò)增；；隨著越來越多的分子技術(shù)應(yīng)用到醫(yī)院感染的病原菌研究中，為流行病學(xué)調(diào)查和患者的治療提供了快捷準(zhǔn)確的支持。 電泳后DNA樣品染色，采用0．5ug／mlEB浸泡30～45min，紫外燈下觀察拍照。通過測定擴(kuò)增產(chǎn)物以及分析核糖體操縱子相對變化的區(qū)域，就可以確定感染性微生物的類型。因?yàn)橹貜?fù)序列的數(shù)目和位點(diǎn)變化很大，所以不同菌株擴(kuò)增產(chǎn)生重復(fù)片段的大小和數(shù)目也就相應(yīng)的不同。缺點(diǎn)：GeneticLength實(shí)驗(yàn)流程：，抽提基因組DNA、pvuII酶消化；、轉(zhuǎn)膜；針雜交、Xray缺點(diǎn)：Eelectrophoresis同一種的不同分離菌株的DNA序列的變異可造成限制性位點(diǎn)數(shù)目和分布的變化，所以可以導(dǎo)致其REA圖譜出現(xiàn)差異。醫(yī)院感染的流行病學(xué)研究是臨床微生物學(xué)工作者的重要課題，在醫(yī)院感染監(jiān)測的研究中，一個很重要的問題就是如何確定感染途徑和傳播途徑，以采取有效預(yù)防和控制措施，從而防止醫(yī)院感染或者暴發(fā)流行，因此對微生物鑒定和菌株同源性分析提出了更高的要求。對實(shí)驗(yàn)儀器要求不高。實(shí)驗(yàn)方法的評價：腸桿菌和葡萄球菌基因分型的金標(biāo)準(zhǔn)。實(shí)驗(yàn)方法的評價：使重復(fù)序列之間的區(qū)域得以擴(kuò)增。AFLPPCR）原理：實(shí)驗(yàn)方法的評價：software序列比對，得出鑒定結(jié)果。然而，醫(yī)院感染病原菌存在廣泛而迅速的變異，這些變異使得菌株的基因同源性分析資料的解釋變得錯綜復(fù)雜。 PFGE施加在凝膠上至少有兩個電場方向，時間與電流大小也交替改變，使得DNA分子能夠不斷地調(diào)整泳動方向，以適應(yīng)凝膠中不規(guī)則的孔
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