【正文】 若平板上無(wú)菌落生長(zhǎng)，判供試品未檢出梭菌；若平板上有菌落生長(zhǎng)，應(yīng)挑選2～3個(gè)菌落分別進(jìn)行革蘭染色和過(guò)氧化氫酶試驗(yàn)。陽(yáng)性對(duì)照試驗(yàn)應(yīng)檢出相應(yīng)的控制菌。水溶性供試液過(guò)濾前先將少量的沖洗液過(guò)濾以潤(rùn)濕濾膜。點(diǎn)計(jì)菌落數(shù)后，計(jì)算各稀釋級(jí)供試液的平均菌落數(shù)，按菌數(shù)報(bào)告規(guī)則報(bào)告菌數(shù)。（2）陰性菌對(duì)照組 設(shè)立陰性菌對(duì)照組是為了驗(yàn)證該控制菌檢查方法的專(zhuān)屬性。用該法做一個(gè)樣品的細(xì)菌、霉菌和酵母菌計(jì)數(shù)驗(yàn)證試驗(yàn)，需要多少個(gè)平皿呢？試驗(yàn)組：510=50個(gè)，即每個(gè)菌株做2ml共需50個(gè)；菌液組：52=10個(gè)，即每個(gè)菌株的加菌量，每株2個(gè)皿。％無(wú)菌氯化鈉溶液制成每1ml含菌數(shù)為50～l00cfu的菌懸液。接種黑曲霉的新鮮培養(yǎng)物至改良馬丁瓊脂斜面培養(yǎng)基中，培養(yǎng)5~7天，加入3~5ml ％無(wú)菌氯化鈉溶液，將孢子洗脫。 共80個(gè)本底菌組：10個(gè)細(xì)菌計(jì)數(shù)，10個(gè)霉菌和酵母菌計(jì)數(shù)。方法同試驗(yàn)組，驗(yàn)證大腸埃希菌、大腸菌群、沙門(mén)菌檢查法時(shí)的陰性對(duì)照菌采用金黃色葡萄球菌；驗(yàn)證銅綠假單胞菌、金黃色葡萄球菌、梭菌檢查法時(shí)的陰性對(duì)照菌采用大腸埃希菌。若同稀釋級(jí)兩個(gè)平板的菌落平均數(shù)不小于15，則兩個(gè)平板的菌落數(shù)不能相差1倍或以上。油類(lèi)供試品，其濾膜和過(guò)濾器在使用前應(yīng)充分干燥。陰性對(duì)照試驗(yàn) 取稀釋液10m1照相應(yīng)控制菌檢查法檢查，作為陰性對(duì)照。 過(guò)氧化氫酶試驗(yàn) 取上述平板上的菌落，置潔凈玻片上，滴加3％過(guò)氧化氫試液，若菌落表面有氣泡產(chǎn)生，為過(guò)氧化氫酶試驗(yàn)陽(yáng)性，否則為陰性。如試驗(yàn)管不出現(xiàn)渾濁、產(chǎn)氣、消化碎肉、臭氣等現(xiàn)象，判供試品未檢出梭菌；否則，涂抹接種于含慶大霉素的哥倫比亞瓊脂培養(yǎng)基平板上，在厭氧條件下培養(yǎng)48～72小時(shí)。陽(yáng)性對(duì)照試驗(yàn)的加菌量為l0～l00cfu，方法同供試品的控制菌檢查。使用時(shí)，應(yīng)保證濾膜在過(guò)濾前后的完整性。菌落蔓延生長(zhǎng)成片的平板不宜計(jì)數(shù)。當(dāng)采用薄膜過(guò)濾法時(shí)，取規(guī)定量供試液，過(guò)濾，沖洗，試驗(yàn)菌應(yīng)加在最后一次沖洗液中，過(guò)濾后，注入增菌培養(yǎng)基或取出濾膜接入增菌培養(yǎng)基中。具體操作：（以1ml分至5個(gè)皿為例）就是取1:10的供試液1ml均勻分注到5個(gè)平皿中，每株試驗(yàn)菌平行制備2ml的平皿數(shù)，然后加入相應(yīng)的瓊脂培養(yǎng)基，培養(yǎng)，計(jì)算各菌株的回收率。菌液的制備：接種大腸埃希菌、金黃色葡萄球菌、枯草芽孢桿菌的新鮮培養(yǎng)物至營(yíng)養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基或營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基中，培養(yǎng)18～24小時(shí)；接種白色念珠菌的新鮮培養(yǎng)物至改良馬丁培養(yǎng)基或改良馬丁瓊脂培養(yǎng)基中，培養(yǎng)24～48小時(shí)。然后，吸出胞子懸液(用管口帶有薄的無(wú)菌棉花或紗布能過(guò)濾菌絲的無(wú)菌毛細(xì)吸管)至無(wú)菌試管內(nèi)，％無(wú)菌氯化鈉溶液制成每lml含孢子數(shù)50～l00cfu的孢子懸液。3．離心沉淀集菌法取一定量的供試液，3000轉(zhuǎn)/分離心20分鐘(供試液如有沉淀，先以500轉(zhuǎn)/分離心5分鐘，取全部上清液再離心) ,棄去上清液，留底部集菌液約2ml，加稀釋液補(bǔ)至原量。陰性對(duì)照菌不得檢出。一般營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基用于細(xì)菌計(jì)數(shù)；玫瑰紅鈉瓊脂培養(yǎng)基用于霉菌及酵母菌計(jì)數(shù)；酵母浸出粉胨葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基用于酵母菌計(jì)數(shù)。為發(fā)揮濾膜的最大過(guò)濾效率，