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8味單藥提取液體外抑制未孢子化卵囊成熟的研究設(shè)計(jì)與記錄(專業(yè)版)

2025-07-29 14:44上一頁面

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【正文】 實(shí)驗(yàn)方法 : 在試管中分別配置質(zhì)量濃度為 、 、 、 2mg/ml、 、 、 、 、 ,每樣平行設(shè) 3管,并設(shè)不加藥物空白對照組。 20xxr/min離心 10分鐘,檢上清,無球蟲 時(shí)棄上清(將上清倒入另外高壓過的離心管里進(jìn)行檢測);于沉渣中加少量生理鹽水并將沉渣攪開,再加生理鹽水到離心管的 3/4,離心,重復(fù)洗 3次。 ( 8)判定:如果視野中發(fā)現(xiàn)球蟲卵囊,可判定為陽性,即說明該動(dòng)物 (群 )己受到球蟲的感染。 密閉門窗,進(jìn)行熏蒸消毒(福爾馬林毫升數(shù)與高錳酸鉀克數(shù)之比為 2: 1。 試驗(yàn)方法 : 8味單藥分別稱取 10g粉碎,過 60目篩,中藥粉末用清水浸泡 24h,砂鍋熬煮30min,取藥液,再將剩余藥渣加適量清水再熬煮 30min,將兩次得到的藥液混勻,分成兩份,其中一份添加適量滲透劑,兩種藥液分別制成含原藥 。 用塑料布包裹消過毒的雞籠,將 40W的燈泡接于雞籠中,提前 12h開啟燈泡,使溫度能均衡保持在 34℃左右,并用干濕溫度計(jì)測定濕度,使其能均衡保持在 60~ 65%左右,準(zhǔn)備養(yǎng)雞。養(yǎng)雞過程中注意雞舍的清潔與衛(wèi)生,出現(xiàn)病死雞及時(shí)剖檢,查找病因。 ②取 50ml飽和鹽水,加入 10ml濾液中。 于每支試管內(nèi)分別加入 1 mL每毫升含 105個(gè)未孢子化柔嫩艾美爾球蟲卵囊懸液,在 27~ 28℃溫箱培養(yǎng),于 h、 h計(jì)數(shù)卵囊的孢子化率。在保存時(shí),糞便和盲腸的卵囊要分開保存。第一次過濾后剩余糞便用 5倍于糞便的生理鹽水稀釋并攪勻后再過濾,第二次過濾后剩余糞便用 3倍于糞便的生理鹽水稀釋并攪勻后再過濾。 ( 4)傾去上清液,各管沉淀物中加入少量飽和鹽水,混勻。 第 3 頁 共 10 頁 實(shí)驗(yàn)二 艾美耳球蟲卵囊對雛雞的感染試驗(yàn) 實(shí)驗(yàn) 目的 用柔嫩艾美爾球蟲感染雛 雞 以便從糞便中收取大量的球蟲卵囊 實(shí)驗(yàn)材料 : 滴管、鑷子、剪刀、玻璃棒、錐形瓶、載玻片、桌布、牙簽、燒杯、紗布、手套等均應(yīng)在 80℃干燥箱中烘干消毒 30min。將稀釋得到的藥液裝入小瓶中密封,與剩余原液一同放入冰箱冷藏備用。 ( 3)將濾液移入 4支 10 mL~ 15 mL試管, 2500r/ min離心 l0min。先用60目篩過濾,后用 200目篩過濾糞便,過濾三次。當(dāng)完成孢子化卵囊 達(dá)到 85%的時(shí),停止培養(yǎng);貼標(biāo)簽后 4℃冰箱保存(不要靠近冰箱后壁),同時(shí)于蟲株登記記錄本登記批號與收集量。 : 在試管中分別配置質(zhì)量濃度為 、 、 、2mg/ml、 、 、 、 、 、 , 第 8 頁 共 10 頁 每樣平行設(shè) 3管,并設(shè)不加藥物空白對照組。 ③混勻,用吸管吸取少量混合液體,加入計(jì)數(shù)室內(nèi)(液體要充滿計(jì)數(shù)室但不要溢出),放于顯微鏡載物臺上,靜置 1~ 2分鐘。收集接種后第139— 168h糞便及 168h盲腸中的球蟲卵囊,同時(shí)鏡檢其他腸段有無球蟲。
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