【正文】
n V 單位的地方。在此條件下可能會識別出兩群細胞,一是位于散點圖的右下方(ANN+/PI)還有就是右上方(ANN+/PI+)。如果有顆粒出現(xiàn)在上端象限則說明有熒光滲漏;此時FL1的熒光被FL2(或FL3)PMT檢測到了。建議在實驗開始階段分析經(jīng)Annexin V、PI 分別單染的細胞來調(diào)整熒光補償去除光譜重疊。(貼壁細胞用不含EDTA的胰酶消本試劑盒采用重組人Annexin VEGFP融合蛋白作為熒光探針,利用流式細胞儀或熒光顯微鏡可檢測細胞凋亡的發(fā)生。 原理:碘化丙啶有毒,應(yīng)小心保存和使用,注意個人保護。4. 在細胞懸浮液中加入5ul Annexin VEGFP,輕輕混勻后于28176。4. 檢測PI 單染的細胞并檢查FL1FL2(或FL3)散點圖,保證在右上和右下象限內(nèi)沒有顆粒。過度補償可以從陽性細胞十分貼近從標這一現(xiàn)象觀察出來。注:在陰性群體門以外的細胞可被識為Annexin V 或Annexin V 和PI 陽性的細胞。對照組細胞體積太少,根本不夠調(diào)試細胞團位置(FSC和SSC參數(shù))、自身熒光和熒光補償?shù)?br />