滬科版生物第二冊(cè)第三節(jié)基因工程與轉(zhuǎn)基因生物之二(更新版)
【正文】 過(guò)對(duì)DNA分子進(jìn)行人工“ 剪切 ”和“ 拼接 ”，對(duì)生物的基因進(jìn)行 改造 和 重新組合 ，然后導(dǎo)入受體細(xì)胞 內(nèi)進(jìn)行無(wú)性繁殖，使重組基因在受體細(xì)胞內(nèi) 表達(dá) ，產(chǎn)生出人類所需要的 基因產(chǎn)物。 ? 作為運(yùn)載體必須具備哪些條件？ 1）能夠在宿主細(xì)胞中 復(fù)制 并穩(wěn)定地 保存 。 ? 步驟一：目的基因的提取 ? 目的基因的提取方法 直接分離基因 人工合成基因 反轉(zhuǎn)錄法 根據(jù)已知的氨基酸序列合成 DNA ： 鳥槍法 在獲取真核細(xì)胞中的目的基因時(shí) ,一般用 人工合成基因 的方法 . ? 哪些新技術(shù)能大大簡(jiǎn)化基因工程的操作技術(shù)？ 1） DNA序列自動(dòng)測(cè)序儀： 2） PCR技術(shù)： 對(duì)提取出來(lái)的基因進(jìn)行核苷酸序列分析。 ? 步驟三：目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞 第三步：將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞 導(dǎo)入 擴(kuò)增 常用的受體細(xì)胞：菌類和動(dòng)植物細(xì)胞 可以分泌人胰島素 的細(xì)菌 導(dǎo)入過(guò)程：運(yùn)載體為質(zhì)粒，受體細(xì)胞為細(xì)菌 受體細(xì)胞：細(xì)菌 細(xì)胞壁的通透性增大 重組質(zhì)粒進(jìn)入受體細(xì)胞 目的基因隨受體細(xì)胞的繁殖而復(fù)制 氯化鈣 大量的目的基因 ? 步驟四：目的基因的檢測(cè)和表達(dá) 四環(huán)素 抗性基因 青霉素抗性基因 檢測(cè)：通過(guò)檢測(cè) 標(biāo)記基因 的有無(wú)，來(lái)判斷 目的基因是否導(dǎo)入 檢測(cè)方法：將受體細(xì)胞放在含有青霉素或四環(huán)素的培養(yǎng)皿中培養(yǎng)，若存活，則導(dǎo)入成功；若死亡，則重組質(zhì)粒沒有導(dǎo)入受體細(xì)胞． 不能，受體細(xì)胞 必須表現(xiàn)出特定的性狀 ，才能說(shuō)明目的基因完成了 表達(dá) 。 （ 4）為了確定耐鹽轉(zhuǎn)基因水稻是否培育成功，既要用放射性同位素標(biāo)記的 作探針進(jìn)行分子雜交檢測(cè)，又要用 方法從個(gè)體水平鑒定水稻植株的耐鹽性。 答案：（ 1）從基因文庫(kù)中獲取 化學(xué)合成（人工合成） （ 2）限制性核酸內(nèi)切酶（限制酶） DNA連接酶（連接酶） （ 3）質(zhì)粒 小型環(huán)狀（雙鏈環(huán)狀、環(huán)狀） （ 4）低 篩選 （ 5）氨基酸 （ 2020，山東理， 8分 ） 繼哺乳動(dòng)物乳腺生物反應(yīng)器研發(fā)成功后，膀胱生物反應(yīng)器的研究也取得了一定進(jìn)展。 顯微注射法 受精卵（或早期胚胎） DNA分子雜交）（核酸探針） 受精卵（或早期胚胎細(xì)胞）具有全能性，可使外源基因在相應(yīng)組織細(xì)胞表達(dá) 去核的卵 膀胱上皮 細(xì)胞核 核移植（或克?。?
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