【正文】 驗(yàn)室工作人員、外來合作者、進(jìn)修和學(xué)習(xí)人員在進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室及其崗位之前必須經(jīng)過實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人的批準(zhǔn)。 ： 在具有生物安全二級實(shí)驗(yàn)室門口加貼專門的生物安全警示標(biāo)識，以避免無關(guān)人員進(jìn)入相關(guān)區(qū)域，造成感染的危險(xiǎn)。 事故發(fā)生 3日內(nèi)，事故責(zé)任人寫出事故發(fā)生原因、經(jīng)過及教訓(xùn)、責(zé)任，并由發(fā)生事故科室填寫事故報(bào)告單，報(bào)業(yè)務(wù)質(zhì)量管理科和行政管理科。 戴者手套脫掉一次性口罩、手術(shù)帽、內(nèi)層鞋套、然后脫掉一次性隔離衣及手套，放入消毒袋高壓消毒。 進(jìn)入清潔區(qū)時(shí)穿戴一次性口罩，手術(shù)帽，一次性隔離衣、兩副膠乳手套和兩副一次性鞋套。如口罩遭到分泌物飛濺或弄濕，應(yīng)嚴(yán)格洗手后，帶上清潔手套更換。 （ 3）保持實(shí)驗(yàn)室環(huán)境的整潔，每項(xiàng)工作完成之后 ，必須清理和清潔臺面，離開實(shí)驗(yàn)室 （ 4）注意個(gè)人的健康狀況，出現(xiàn)身體不適情況，應(yīng)及時(shí)向?qū)嶒?yàn)室負(fù)責(zé)人報(bào)告。 （ 6）定期檢查實(shí)驗(yàn)室的各項(xiàng)技術(shù)參數(shù)，組織對實(shí)驗(yàn)室裝備的常規(guī)保養(yǎng)。 （ 2）按照上述文件要求組織實(shí)驗(yàn)室的各項(xiàng)工作，保證實(shí)驗(yàn)室運(yùn)行的安全和實(shí)驗(yàn)室 工作質(zhì)量的準(zhǔn)確可靠。 四、 生物安全檢查制度 7 規(guī)范實(shí)驗(yàn)室生物安 全，保證設(shè)備正常運(yùn)行。 （ 5）實(shí)驗(yàn)室消毒凈化的方法。實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人應(yīng)向上級部門報(bào)告，對受傷害者進(jìn)行隔離觀察，同時(shí)根據(jù)情況預(yù)防性用藥，并寫出職業(yè)暴露后預(yù)防感染的評價(jià)和處理方案。用消毒液噴霧和紫外線照射污染的區(qū)域， 24 小時(shí)再進(jìn)行終末消毒，實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人除立即采取對應(yīng)措施外，應(yīng)向上級部門報(bào)告，并填寫意外情況登記與處理記錄表。生物安全柜的濾器必須 按說明書規(guī)定的時(shí)間定期由專業(yè)人員更換，其它儀器設(shè)備也應(yīng)根據(jù)實(shí)際需要清潔保養(yǎng)。 標(biāo)本保管規(guī)則 標(biāo)本進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室 出實(shí)驗(yàn)室采集的標(biāo)本，本實(shí)驗(yàn)室統(tǒng)一登記編號，能反映出標(biāo)本的來源、種類、性質(zhì)、目的等相關(guān)信息。實(shí)驗(yàn)記錄錄入后，一般不得修改。記錄內(nèi)容應(yīng)簡明扼要，包括實(shí)驗(yàn)日期，實(shí)驗(yàn)?zāi)康暮蛯?shí)驗(yàn)的基本條件等提示記憶的內(nèi)容，并較詳細(xì)地記載觀察到的實(shí)際現(xiàn)象及數(shù)據(jù)結(jié)果。所有用過的試劑均應(yīng)歸還原位；使過的吸管等長形器材放入儲(chǔ)存污物的盒內(nèi)；鋒利品放入專用的污物盒；紙巾軟物品放入污物袋；在臺面上 噴灑75%乙醇，保持 20 分鐘，然后以紙巾擦干。 操作 嚴(yán)格按照試劑使用說明進(jìn)行操作。 （ 2）在清潔區(qū)內(nèi)，根據(jù)實(shí)驗(yàn)要求做好防護(hù)。必須攜出實(shí)驗(yàn)室的中間實(shí)驗(yàn)材料、更換維修的儀器設(shè)備、也只有在確保無病原微生物污染的條件下，才能攜出實(shí)驗(yàn)室。 微生物實(shí)驗(yàn)室 生物安全管理手冊 ***疾病預(yù)防控制中心 2 生物安全管理體系文件目錄 序號 名稱 備注 1 實(shí)驗(yàn)室人員和項(xiàng)目準(zhǔn)入制度 2 人員培訓(xùn)考核制度 3 人員健康監(jiān)護(hù)制度 4 生物安全檢查制度 5 實(shí)驗(yàn)室人員生物安全行為規(guī)范 6 事件、傷害、事故和職業(yè)性疾病報(bào)告制度 7 實(shí)驗(yàn)室生物危險(xiǎn)標(biāo)識使用規(guī)定 8 實(shí)驗(yàn)室內(nèi)務(wù)管理制度 9 實(shí)驗(yàn)室菌（毒）種和生物樣本安全保管和檔案管理制度 10 實(shí)驗(yàn)室廢棄物管理制 度 11 實(shí)驗(yàn)室消毒隔離制度 12 實(shí)驗(yàn)室應(yīng)急處置預(yù)案 13 實(shí)驗(yàn)活動(dòng)生物安全標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程 3 一、 實(shí)驗(yàn)室人員和項(xiàng)目準(zhǔn)入制度 規(guī)范生物安全二級實(shí)驗(yàn)室的使用和管理，保證操作人員，實(shí)驗(yàn)對象和環(huán)境安全，確保檢測結(jié)果準(zhǔn)確可靠。 實(shí)驗(yàn)室的所有廢棄品，必須通過高壓滅菌后才能處理和清洗。 個(gè)人防護(hù) 工作人員按照下列要求進(jìn)行個(gè)人防護(hù)，才能進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室區(qū)域： （ 1）在更衣室中換穿工作服和工作鞋。用完立即歸位，使其在冰箱外停留的時(shí)間盡可能短。 實(shí)驗(yàn)室清潔 每一實(shí)驗(yàn)步驟完成后，均應(yīng)清理臺面。 實(shí)驗(yàn)記錄與實(shí)驗(yàn)報(bào)告 實(shí)驗(yàn)記錄 在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)，實(shí)驗(yàn)記錄應(yīng)使用鉛筆書寫。錄入后，書寫記錄保存 1 周，以備查驗(yàn)。 出具實(shí)驗(yàn)報(bào)告 在需要出具正式實(shí)驗(yàn)報(bào)告的場合，報(bào)告由實(shí)驗(yàn)者填寫署名，交實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人記錄核對后簽字，再由單位簽發(fā)人簽字并加蓋公章發(fā)出。維護(hù)有專業(yè)人員進(jìn)行。 實(shí)驗(yàn)室事故可能造成氣溶膠污染，如壓力容器或管道破裂、離心機(jī)事故等，應(yīng)立即關(guān)閉實(shí)驗(yàn)室，張貼禁止入內(nèi)的標(biāo)識。暴露的黏膜應(yīng)盡快用生理鹽水或清水沖洗干凈。 （ 4）實(shí)驗(yàn)室基本技 術(shù)。出現(xiàn)下列情況，不應(yīng)進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室：身體出現(xiàn)開放性損傷；患發(fā)熱性疾病：感冒、上呼吸道感染；其他導(dǎo)致抵抗力下降的狀況：妊娠、在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)連續(xù)工作 4 小時(shí)以上或其他原因造成的疲勞狀態(tài)。 實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人 （ 1）組織制定安全手冊、操作規(guī)程等文件。 （ 5）針對操作程序、技術(shù)方法和各種條件要求的變更，以及新設(shè)備的引進(jìn)，為全體工作人員提供最新的安全文獻(xiàn)和信息資料。 （ 2）必須按規(guī)定進(jìn)行個(gè)人防護(hù)，方得進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室。一次性使用口罩應(yīng)在使用后 4 小時(shí)丟棄，不能重復(fù)使用，不能與他人共同使用。 個(gè)人防護(hù)用品的穿戴順序 進(jìn)入清潔區(qū)前穿上普通白大衣和實(shí)驗(yàn)室專用鞋。 脫掉外層一次性鞋套，用 75%乙醇溶液消毒內(nèi)層手套。 事故的處理 ，應(yīng)立即采取有效措施，防止事態(tài)擴(kuò)大，搶救受傷人員和儀器設(shè)備 ，報(bào)告上級領(lǐng)導(dǎo)。 10 適用于生物安全二級實(shí)驗(yàn)室。 實(shí)驗(yàn)室內(nèi)不得進(jìn)食和飲水，或者進(jìn)行其他與實(shí)驗(yàn)無關(guān)的活動(dòng)。 實(shí)驗(yàn)室的工作人員在開始工作前必須留本底血清進(jìn)行有關(guān)的檢測，以后定期復(fù)檢。 實(shí)驗(yàn)室事故處理：工作人員在操作過程中發(fā)生意外，如針刺和切傷、皮膚污染、感染性標(biāo)本濺及體表和口鼻眼內(nèi)、衣物污染實(shí)驗(yàn)臺面等均視為安全事故，應(yīng)視事故類型的不同情況，立即進(jìn)行緊急處理。按期傳代、鑒定，必須在無菌室或接種罩內(nèi)進(jìn)行，并做好有關(guān)記錄。 檔案管理制度 、非實(shí)驗(yàn)室人員不得隨意查看實(shí)驗(yàn)室記 錄 、實(shí)驗(yàn)室人員負(fù)責(zé)妥善保存各種樣品登記本、報(bào)告單及實(shí)驗(yàn)室原始記錄，不得擅自修改和銷毀 、專人負(fù)責(zé)保管感染者檔案 、未經(jīng)領(lǐng)導(dǎo)批準(zhǔn)不得向無關(guān)人員或單位提供任何實(shí)驗(yàn)室及感染者信息 、 HIV 抗體初篩實(shí)驗(yàn)室檢測的陽性結(jié)果不是最終結(jié)果，須進(jìn)一步確認(rèn)，確認(rèn)前不得出具陽性報(bào)告及告知受檢者本人或有關(guān)單位 十、 實(shí)驗(yàn)室廢棄物管理制度 規(guī)范廢棄物處理 尖銳器具和其他廢棄物的處理。盛污染針、銳器及碎玻璃的容器在丟棄前必須徹底消毒。 十一、 實(shí)驗(yàn)室消毒隔離制度 規(guī)范微生物實(shí)驗(yàn)室和生物安全二級實(shí)驗(yàn)室的消毒隔離工作。 培養(yǎng)基、組織、體液等必須放在防漏密閉的容器中儲(chǔ)運(yùn)。 實(shí)驗(yàn)器材的分類消毒：將使用后的銳器方入防刺破、防滲漏的密閉專用銳器處置盒內(nèi)，121℃高壓消毒 30 分鐘。 這張消毒：應(yīng)用 80ml/m3 福爾馬林，密閉熏蒸消毒 6 小時(shí)后方可帶出。 按“實(shí)行”鍵執(zhí)行滅菌程序，此時(shí)“滅菌”燈閃爍。 高壓滅菌安全操作步驟 在滅菌前將雙層的高壓滅菌帶包好，廢物在滅菌袋中的體積不能超過袋子體積的 3/4，滅菌袋用橡皮帶捆好，但不能扎得太死，否則蒸汽不能進(jìn)入所料袋內(nèi)影響滅菌效果。 3．職責(zé) 遇有緊急情況所有工作人員嚴(yán)格按此規(guī)程處理。受到傷害的人員應(yīng)立即就醫(yī)，并將受傷原因及接觸微生物的情況通報(bào)負(fù)責(zé)人。 實(shí)驗(yàn)室事故可能造成氣溶 膠污染，如壓力容器或管道破裂等，立即關(guān)閉實(shí)驗(yàn)室，疏散現(xiàn)場的所有人員，對所有暴露人員提出相應(yīng)的醫(yī)學(xué)建議。污染區(qū)域應(yīng)當(dāng)用消毒劑清洗。發(fā)現(xiàn)蓄意破壞情況后報(bào)告實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人及生物安全員，視破壞種類按照上述方法進(jìn)行處理，并詳細(xì)填寫意外情況登記與處理記錄表。試管上標(biāo)明姓名、時(shí)間、編號，將試管放入專門帶蓋的容器內(nèi)，容器的材料要易于消毒處理，在所放試管周圍上下墊有軟性物質(zhì)，以免碰碎，容器外標(biāo)有HIV檢測專用字樣和生物危害標(biāo)志。 實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備 將試劑從冰箱中取出，按試劑盒要求時(shí)間恢復(fù)室溫。 溫育 貼好封板膜，按照試劑盒要求的溫度和時(shí)間進(jìn)行溫育，最好選擇濕育方法。 結(jié)果判斷計(jì)算 根據(jù)試劑盒說明書要求的陰陽對照 OD值范圍判斷實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確性，陰陽性對照 OD 值在范圍之內(nèi)，試驗(yàn)方可成立，超出范圍，試驗(yàn)失敗，整個(gè)實(shí)驗(yàn)重做。 標(biāo)本留存轉(zhuǎn)送 陰性標(biāo)本收集血清冷凍保存一年。 （ 6）試驗(yàn)室人員應(yīng)做結(jié)核菌素試驗(yàn)，試驗(yàn)結(jié)果為陰性時(shí)，應(yīng)接種卡介苗，并做好登記記錄。 （ 2）實(shí)驗(yàn)室儀器設(shè)備及功能的要求 結(jié)核菌素檢查時(shí)必須在二級生物安全柜內(nèi)進(jìn)行 ,無菌操作內(nèi)禁放雜物 , 并應(yīng)制定地面 ,門窗 ,墻壁 ,設(shè)施等的定期清潔 ,滅菌規(guī)程 ,操作間沒有紫外線燈 。 ,檢查各實(shí)驗(yàn)室水 ,電 ,防火設(shè)備 ,打開防盜報(bào)警裝置。 （ 6）污染物處理及消毒 ,吸管及其他器械 ,需裝載加蓋不漏的容器內(nèi) ,經(jīng)高壓滅菌后 ,拿出