盤狀聚丙烯酰胺凝膠電泳分離血清蛋白質(zhì)(更新版)
【正文】 電場中泳動不僅有 電荷效應(yīng)、分子篩效應(yīng) ，還具有濃縮效應(yīng) ，因而其分離條帶清晰度及分辨率均較前者佳。 (一 )聚合反應(yīng) 聚丙烯酰胺是由 Acr和 Bis在 催化劑 過硫酸銨 (ammonium persulfate， (NH4)2S2O8簡稱AP)或 核黃素 (ribofavin，即 vitaminB2，C17H20O6N4)和 加速劑 N， N， N’， N’一四甲基乙二胺 (N， N， N， N’一 tetramethyl ethytenediamine，簡稱 TEMED)的作用下，聚合而成的三維網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)。 盤狀聚丙烯酰胺凝膠電泳 分離血清蛋白質(zhì) 一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康? 1．學(xué)習(xí)盤狀聚丙烯酰胺凝膠電泳的基本原理。聚丙烯酰胺凝膠電泳應(yīng)用范圍廣， 可用于 蛋白質(zhì)、酶、核酸等生物大分子的 分離、定性、定量及少量的制備，還可以測定分子量、等電點(diǎn)等 。 聚丙烯酰胺凝膠電泳 (polyacryamide gel electrophoresis簡稱 PAGE)根據(jù)其有無濃縮效應(yīng)，分為 連續(xù)系統(tǒng)與不連續(xù)系統(tǒng)兩大類 。 ?Cl離子泳動 最快 而居先，稱“ 前導(dǎo)離子 ” (1eading ion)， NH2CH2COO離子 最慢 而殿后，稱“ 尾隨離子 ” (trailing ion)。凝膠柱用丙烯酰胺和甲叉雙丙烯酰胺在垂直的玻璃小管中聚合而成。 將已制成分離膠的玻管倒立于濾紙上除去水，再用濾紙條吸去殘留的水，注意不要碰到膠面。用 1ml注射器吸 50 ul樣品液（含 ％溴酚藍(lán)指示劑），沿管壁加到濃縮膠頂上，加樣針頭離膠頂 1 mm處，勿碰到膠面。剝膠時注意不要損傷凝膠表面。 五、實(shí)驗(yàn)報(bào)告及作業(yè) 繪出盤狀電泳圖譜
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