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正文內(nèi)容

微生物實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)操作程序手冊(cè)(更新版)

  

【正文】 心取沉淀物涂片,膿性或拭子標(biāo)本直接涂片并寫(xiě)號(hào),以無(wú)菌接種環(huán)粘取少量印度墨汁與玻片上標(biāo)本混勻,壓蓋玻片,先低倍鏡下找到視野再轉(zhuǎn)離倍鏡觀察。 做好標(biāo)本簽收,核對(duì)檢驗(yàn)單與標(biāo)本標(biāo)簽是否清楚無(wú)誤,送檢標(biāo)本是否正確、合格,給所有標(biāo)本按順序編號(hào),按如下操作規(guī)程操作。程序 由設(shè)備科人員送質(zhì)檢局對(duì)溫度計(jì)進(jìn)行校準(zhǔn)。對(duì)離心室清潔,應(yīng)先打開(kāi)離心機(jī)蓋,撥掉電源線,用專用設(shè)備將離心機(jī)轉(zhuǎn)子旋下,再用中性去污劑(70%的異丙醇/水混合物或乙醇去污染)清潔離心室;離心室內(nèi)的橡膠密封圈經(jīng)去污劑處理后,用水沖洗,再用甘油潤(rùn)滑。 校準(zhǔn)步驟: 將加樣器調(diào)至擬校準(zhǔn)體積,選擇合適的吸頭; 調(diào)節(jié)好天平; 來(lái)回吸吹蒸餾水3 次,以使吸頭濕潤(rùn),用紗布拭干吸頭; 垂直握住加樣器,將吸頭浸入液面2~3mm 處,緩慢(1~3 秒)一致的吸取蒸餾水; 將吸頭離開(kāi)液面,靠在管壁,去掉吸頭外部的液體; 將加樣器以30℃角放入稱量燒杯中,緩慢一致地將加樣器壓至第一檔,等待1~3 秒,再壓致第二檔,使吸頭里的液體完全排出; 記錄稱量值; 擦干吸頭外面; 按上述步驟稱量10 次; 取10 次稱量值的均值作為最后加樣器吸取的蒸餾水重量,按附表Ⅰ所列蒸餾水Z 因子計(jì)算體積:體積=重量/Z 因子 按校準(zhǔn)結(jié)果調(diào)節(jié)加樣器 新購(gòu)的合格的移液器出廠前經(jīng)過(guò)廠家校準(zhǔn),使用前無(wú)需校準(zhǔn)。校準(zhǔn)程序 校準(zhǔn)環(huán)境和用具要求: 室溫:20~25℃,測(cè)定中波動(dòng)范圍不大于177。2 適用范圍:適用于本室使用的ZXC 型紫外線消毒車(chē)(上海躍進(jìn)醫(yī)用光學(xué)器械廠生廠)。職責(zé): 實(shí)驗(yàn)室工作人員均應(yīng)熟知并嚴(yán)格遵守本SOP,室負(fù)責(zé)人監(jiān)督落實(shí)。 當(dāng)水槽內(nèi)測(cè)定溫度達(dá)到設(shè)定溫度時(shí),加熱中斷、指示燈熄滅,溫度保持穩(wěn)定。 每日由專人負(fù)責(zé)觀察冰箱內(nèi)溫度并記錄于表中,記錄表貼于門(mén)上,每月一張,一年裝訂成冊(cè)存檔。適用冰箱范圍:本實(shí)驗(yàn)室使用的各種品牌、型號(hào)的冰箱。 離心條件的設(shè)定:通過(guò)按“Temp”、“Speed”、“Time”鍵的上下箭頭分別設(shè)定離心的溫度、速度和時(shí)間。 繼續(xù)移液操作,就可重復(fù)轉(zhuǎn)移相同體積液體。 遺留在管嘴時(shí)的液體或者隨管嘴一起扔掉,或者放回原來(lái)的容器中。待管嘴液體放干凈后,將管嘴貼在容器瓶壁上防止形成液滴滴入瓶中,撤出管嘴。適用范圍:本實(shí)驗(yàn)室使用的可調(diào)式移液。 接通電源,使用前應(yīng)提前15~30 分鐘同時(shí)開(kāi)啟紫外燈和風(fēng)機(jī)組工作。 由冰箱管理人或其委托人每工作日記錄冰箱溫度,冰箱溫度記錄表貼于冰箱門(mén),每月更換1次,存檔。引用的表格 冰箱溫度記錄表:Tabtemp_record回目錄超低溫冰箱標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程確保低溫冰箱的正常使用。 本SOP 的改動(dòng),可由任一使用本SOP 的工作人員提出,并報(bào)經(jīng)下述人員批準(zhǔn)簽字:室負(fù)責(zé)人、科主任。工作程序: 確定要配制消毒液的量。適用范圍:適用于本室各工作區(qū)中按裝于天化板上的紫外線消毒燈。 檢測(cè)報(bào)告的簽發(fā)依據(jù)檢測(cè)結(jié)果報(bào)告程序:ProRep。職責(zé): 實(shí)驗(yàn)室工作人員均應(yīng)熟知并嚴(yán)格遵守本SOP。 保持室內(nèi)空氣流通,且在實(shí)驗(yàn)完畢后,按實(shí)驗(yàn)室清潔消毒程序進(jìn)行清潔、消毒工作。 記錄溫濕度計(jì)讀數(shù)。sop_tc。 記錄溫濕度計(jì)讀數(shù)。非本實(shí)驗(yàn)室工作人員未經(jīng)允許不得進(jìn)入。無(wú)菌室公能用于分裝培養(yǎng)管或倒制平板培養(yǎng)基操作。在整個(gè)本區(qū)的實(shí)驗(yàn)操作過(guò)程中,操作者必須戴手套、口罩和帽子,嚴(yán)格按照操作規(guī)程進(jìn)行。試劑配制和無(wú)菌區(qū)工作制度進(jìn)入該區(qū)需穿專用工作服和工作鞋。室內(nèi)備有空調(diào)設(shè)備,以保證不因溫度而影響工作。職責(zé): 實(shí)驗(yàn)室工作人員均應(yīng)熟知并遵守本室相關(guān)SOP。 不同廠家的試劑勿混用,同廠家的不同檢測(cè)項(xiàng)目試劑盒中的相同試劑也不宜混用,除非廠家有特別說(shuō)明。sop_hcv 實(shí)驗(yàn)室清潔程序:proc_lab_7 冰箱溫度記錄表:Tabtemp_record 溫濕度計(jì)記錄表:Tabtemp_record標(biāo)本處理區(qū)標(biāo)準(zhǔn)操作程序目的:規(guī)定在標(biāo)本制備區(qū)內(nèi)所進(jìn)行的工作及其操作。 標(biāo)本的接收處理和保存按臨床標(biāo)本的管理程序進(jìn)行:ProSam。sop_ng。實(shí)驗(yàn)中須戴手套、帽子,手套需常更換。引用的文件: 檢測(cè)結(jié)果報(bào)告程序:proc_rept_1 項(xiàng)目SOP:sop tb。操作程序: 實(shí)驗(yàn)結(jié)束后先對(duì)實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行必要的清潔工作; 根據(jù)需要設(shè)定時(shí)間,通常為30 分鐘,根據(jù)需要適當(dāng)延長(zhǎng)時(shí)間。 消佳凈:20g 加水4000ml,作用2030 分鐘。 關(guān)機(jī):若冰箱較長(zhǎng)時(shí)間不用或需要送修時(shí)需按以下步驟操作:(1)關(guān)閉冰箱電源,并拔下電源插頭。 本SOP 的改動(dòng),可由任一使用本SOP 的工作人員提出,并報(bào)經(jīng)下述人員批準(zhǔn)簽字:室負(fù)責(zé)人、科主任。引用的表格: 冰箱溫度記錄表:tab_temp_record回目錄潔凈工作臺(tái)使用操作規(guī)程目的:正確使用潔凈工作臺(tái)。 工作臺(tái)面上禁止存放不必要的物品,以保持工作區(qū)的潔凈氣流不受干擾。 裝上配套的Tip。 倒退移液法:適用于高粘度液體及/或易起泡沫液體的移液。 將移液管管嘴浸入液面下2~3mm 深處,然后慢慢松開(kāi)按鈕吸入液體。職責(zé): 實(shí)驗(yàn)室工作人員均應(yīng)熟知并嚴(yán)格遵守本SOP,室負(fù)責(zé)人監(jiān)督落實(shí)。當(dāng)達(dá)到設(shè)定的時(shí)間后,離心機(jī)自動(dòng)停止,并發(fā)出提示音,“Open”鍵的指標(biāo)燈亮,按“Open”鍵,打開(kāi)機(jī)蓋,旋開(kāi)轉(zhuǎn)子蓋,取出離心管。操作方法 冰箱應(yīng)放置于水平地面并留有一定的散熱空間。引用的表格 冰箱溫度記錄表:tab_temp_record電熱恒溫水浴箱操作程序1 目的:保證水浴箱工作溫度恒定。 每天應(yīng)使用水銀溫度計(jì)水浴箱應(yīng)記錄每天溫度;如溫度超出正常范 圍,該溫度應(yīng)劃上紅圈,并把修正操作記錄下來(lái)。 每次使用潔凈臺(tái)后,均需對(duì)潔凈臺(tái)進(jìn)行清潔。操作程序: 打開(kāi)保護(hù)門(mén); 用手托住燈臂往上抬至需要位置; 插上電源,打開(kāi)帶燈開(kāi)關(guān); 根據(jù)需要設(shè)定時(shí)間; 使用完畢將按鈕摁到底,同時(shí)另一手托住燈臂慢慢將燈管放進(jìn)燈箱內(nèi)關(guān)上保護(hù)門(mén)。稱量時(shí)為保證天平內(nèi)的濕度(相對(duì)濕度60~90%),天平內(nèi)應(yīng)放置一裝有10ml 蒸餾水的小燒杯。引用的表格儀器設(shè)備校準(zhǔn)記錄表:tab_pipt_cal離心機(jī)維護(hù)保養(yǎng)操作程序目的:對(duì)離心機(jī)進(jìn)行正確的維護(hù),以保證儀器正常運(yùn)轉(zhuǎn)。 離心完畢后,應(yīng)及時(shí)用干的軟布拭去離心室的冷凝水。引用表格: 儀器設(shè)備校準(zhǔn)記錄:tab_inst_cal臨床非培養(yǎng)標(biāo)本的采集及處理操作程序目的:規(guī)范臨床待檢標(biāo)本的正確采集、送檢和處理。1)、鏡檢100300 個(gè)視野(時(shí)間不少于4 分鐘)未發(fā)現(xiàn)抗酸菌,繼續(xù)觀察至300 個(gè)視野仍未發(fā)現(xiàn)抗酸菌者報(bào)告抗酸菌(—);2)、鏡檢100 個(gè)視野找到抗酸菌12 條者,報(bào)告抗酸菌可疑(177。陰道清潔度的按如下判斷標(biāo)準(zhǔn)報(bào)告:Ⅰ度:陰道桿菌為主,并可見(jiàn)大量上皮細(xì)胞。以最高稀釋管出現(xiàn)散在顆粒狀凝集為報(bào)告滴度。 拒收標(biāo)本記錄表:tab_rejec臨床標(biāo)本的保存程序目的:臨床標(biāo)本正確保存,以便必要是復(fù)查。報(bào)告發(fā)出后保存2 天,以備查。如遇有當(dāng)班同事休息或值班,第3 人就頂上其所上的班。 樣本編號(hào):對(duì)合格的樣本作出編號(hào)。 標(biāo)本培養(yǎng)處理后幫助2 班將需要的各種標(biāo)本收集并滅菌處理。 對(duì)一些不適合用儀器檢測(cè)的細(xì)菌,改用手工簽定或用標(biāo)準(zhǔn)的KB 法進(jìn)行藥敏。 對(duì)新到崗的實(shí)習(xí)或進(jìn)修人員應(yīng)認(rèn)真交代本崗位的一切事宜并且認(rèn)真作好帶教工作。培養(yǎng)第248 小時(shí)觀察各平板上有否出現(xiàn)可疑菌落,若繼續(xù)培養(yǎng)至72 小時(shí)未見(jiàn)可疑菌落,則報(bào)告未培養(yǎng)出普通致病細(xì)菌。培養(yǎng)第248 小時(shí)觀察各平板上有否出現(xiàn)可疑菌落,若繼續(xù)培養(yǎng)至72 小時(shí)未見(jiàn)可疑菌落,則報(bào)告未培養(yǎng)出普通致病細(xì)菌。4)痰液或咽拭子標(biāo)本 無(wú)菌接種環(huán)可疑處采樣涂于TTC沙保羅平板成原始線,再以無(wú)菌接種環(huán)畫(huà)線分離后置25℃溫箱培養(yǎng)。培養(yǎng)第2472 小時(shí)觀察各平板上有否出現(xiàn)可疑菌落,若繼續(xù)培養(yǎng)至第5 天未見(jiàn)可疑菌落,則報(bào)告未培養(yǎng)出奈瑟氏菌、嗜血桿菌等苛養(yǎng)菌。另取約1g 標(biāo)本接種堿性蛋白胨水中,35℃溫箱培養(yǎng)2472 小時(shí),再轉(zhuǎn)種高鹽平板、中國(guó)蘭平板、山梨醇麥康凱平板。二、標(biāo)本處理:接種Uu、Mh 培養(yǎng)藥敏一體試劑盒:操作前將所需試劑取出置室溫30 分鐘。當(dāng)高濃度與低濃度兩孔均不生長(zhǎng)(不變色)為該藥敏感;高濃度不變色低濃度變紅為該藥物中介;高濃度與低濃度均變紅為該藥物
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