【正文】 份膿細(xì)胞和雜菌，上皮細(xì)胞少見(jiàn)。若陰性對(duì)照出現(xiàn)凝集則需重新稀釋配制診斷菌懸液重做試驗(yàn)。適用范圍：微生物檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室的所有臨床檢測(cè)標(biāo)本。保存2天后標(biāo)本由室負(fù)責(zé)人酌情處理。 崗位1 班(負(fù)責(zé)樣本接收、核對(duì)、接種以及上日進(jìn)行的鑒定和藥敏結(jié)果進(jìn)行分析、發(fā)報(bào)等工作)。 普通培養(yǎng)樣本的接種選擇：① 痰液、咽拭子分別接種：血平皿、麥康凱平皿；② 尿液接種：取100μl 接種血平皿、麥康凱平皿；③ 泌尿生殖道：血平板、麥康凱平板；④ 大便：SS 或中國(guó)蘭、血平板；⑤ 各種無(wú)菌體液、腦脊液、膿液等標(biāo)本：血平皿、麥康凱平皿，用增菌肉湯增菌；⑥ 衣原體、支原體培養(yǎng)+藥敏，按說(shuō)明書(shū)接種支原體專用培養(yǎng)基；⑦ 真菌培養(yǎng)，各種標(biāo)本均接種沙保弱平皿和真菌斜面培養(yǎng)基；⑧ 所有標(biāo)本在接種的同時(shí)應(yīng)進(jìn)行涂片或?qū)ζ涑猎M(jìn)行革蘭或抗酸染色，并做相應(yīng)的記錄。 負(fù)責(zé)配制培養(yǎng)基，并做好記錄。碰到異常的耐藥模式，如碰到耐萬(wàn)古霉素的葡萄球菌、糞腸球菌，耐泰能的大腸埃希菌、克雷伯菌屬、腸桿菌屬等報(bào)告時(shí)一定要慎重。6 注：崗位職責(zé)分開(kāi)是相對(duì)的，同事間需要互相協(xié)作，互相幫助，共同完成當(dāng)天的工作。3)引流液 標(biāo)本3000 轉(zhuǎn)/分離心5 分鐘，取離心沉淀物，接種環(huán)取樣涂于普通血平板、麥康凱平板成原始線，再以無(wú)菌接種環(huán)畫(huà)線分離后置35℃溫箱培養(yǎng)。真菌培養(yǎng)陰性操作程序仔細(xì)查對(duì)標(biāo)本標(biāo)簽與檢驗(yàn)單是否正確，標(biāo)本質(zhì)量是否合格，若收檢標(biāo)本與檢驗(yàn)單查對(duì)正確，標(biāo)本質(zhì)量合格則進(jìn)行接收檢驗(yàn)，否則查找原因并在有關(guān)記錄本上記錄。培養(yǎng)第2472 小時(shí)觀察平板上有否出現(xiàn)可疑菌落，若繼續(xù)培養(yǎng)至第4 天未見(jiàn)可疑菌落，則報(bào)告未培養(yǎng)出真菌。2)尿液標(biāo)本 取5ml 尿液,3000 轉(zhuǎn)/分離心5 分鐘，取離心沉淀物，接種環(huán)取樣涂于普通血平板、巧克力(含V、X 因子)平板成原始線，再畫(huà)線分離后置C02 缸，35℃溫箱培養(yǎng)。培養(yǎng)第2472 小時(shí)觀察各平板上有否出現(xiàn)可疑菌落，若繼續(xù)培養(yǎng)至第5 天未見(jiàn)可疑菌落，則報(bào)告未培養(yǎng)出弧菌、螺桿菌等細(xì)菌。A 排第一孔加入培養(yǎng)液100μL 作為陰性對(duì)照；將標(biāo)本拭子直接放入培養(yǎng)液中充分振蕩并在瓶壁擠干拭子，若為男性尿液取離心沉淀物150μL 或陽(yáng)性標(biāo)本取50μL 于培養(yǎng)液中混勻。結(jié)果一：第24 小時(shí)B1 孔由橙黃色變成紅色示解脲支原體陽(yáng)性，藥敏看結(jié)果判斷；第24 小時(shí)、48 小時(shí)觀察B2 孔均不變色，示無(wú)人型支原體生長(zhǎng)或濃度極低，報(bào)告培養(yǎng)出解脲支原體，未培養(yǎng)出人型支原體。藥敏孔A 排為高濃度，B 排為低濃度，變紅則耐藥，不變紅示敏感而不生長(zhǎng)。支原體培養(yǎng)檢驗(yàn)操作程序一、接收標(biāo)本：標(biāo)本與檢驗(yàn)單查對(duì)正確，標(biāo)本質(zhì)量合格。5)糞便或肛拭子等腸道標(biāo)本 以無(wú)菌接種環(huán)桃取可疑處標(biāo)本涂于血平板、布氏血平板成原始線，再分離畫(huà)線后置于C02 缸，放入35℃溫箱培養(yǎng)。標(biāo)本處理、檢驗(yàn)與結(jié)果報(bào)告：1)拭子、分泌物標(biāo)本 標(biāo)本涂于普通血瓊脂平板、巧克力(含V、X 因子)平板成原始線，再以無(wú)菌接種環(huán)畫(huà)線分離后置C02 缸，35℃溫箱培養(yǎng)。培養(yǎng)第2472 小時(shí)觀察平板上有否出現(xiàn)可疑菌落，若繼續(xù)培養(yǎng)至第4 天未見(jiàn)可疑菌落，則報(bào)告未培養(yǎng)出真菌。6)留置針頭、小導(dǎo)管等標(biāo)本 標(biāo)本置無(wú)菌管中，加入增菌液2ml，35℃溫箱培養(yǎng)48 小時(shí)觀察培養(yǎng)液有無(wú)混濁，采樣涂于普通血平板、麥康凱平板成原始線，再以無(wú)菌接種環(huán)畫(huà)線分離后置35℃溫箱培養(yǎng)。2)尿液標(biāo)本 取5ml 尿液,3000 轉(zhuǎn)/分離心5 分鐘，取離心沉淀物，接種環(huán)取樣涂于普通血平板、麥康凱平板成原始線，再以無(wú)菌接種環(huán)畫(huà)線分離后置35℃溫箱培養(yǎng)。③ 腦脊液隱球菌涂片，應(yīng)快速離心后倒去上清液，沉淀涂片、加相應(yīng)的優(yōu)質(zhì)墨汁混勻后鏡檢。用于鑒定或藥敏試驗(yàn)的菌落應(yīng)選取培養(yǎng)1824 小時(shí)的純菌落進(jìn)行試驗(yàn)。 厭氧培養(yǎng)應(yīng)接種血平皿或厭氧平皿置于厭氧袋中培養(yǎng)，同時(shí)接種BMP 進(jìn)行普通培養(yǎng)。 接收樣本：核對(duì)各樣本與化驗(yàn)單名是否一致，核查各送檢樣本是否符合要求，否則立即與病房聯(lián)系以便作出相應(yīng)的處理，如退單或重送樣本等，并做好聯(lián)系情況的記錄。1 崗位班、2 崗位班采用輪轉(zhuǎn)制。 原始樣本在報(bào)告發(fā)出前均需置4℃保存，不得丟棄。若陰性對(duì)照出現(xiàn)凝集則需重新稀釋配制診斷菌懸液重做試驗(yàn)。結(jié)果判斷：菌體沉淀至試管底成圓點(diǎn)為陰性管，出現(xiàn)散在顆粒狀凝集為陽(yáng)性管。 白帶常規(guī)檢查：鹽水管直接將棉簽點(diǎn)至玻片后以高倍鏡檢有無(wú)滴蟲(chóng)；涂片標(biāo)注編號(hào)后固定，行革蘭氏染色，先滴加第一液染色1 分鐘，水洗，加第二液媒染1 分鐘，水洗干凈；以95%酒精脫色30 秒鐘后立即水洗，再加第四液復(fù)染30 秒鐘，水洗涼干后鏡檢查找革蘭氏陰性雙球菌、霉菌或陽(yáng)性球菌、線索細(xì)胞等。鏡檢與報(bào)告：油鏡下查找分枝、不規(guī)則紅色桿菌，按如下標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行結(jié)果報(bào)告。 經(jīng)校準(zhǔn)過(guò)的溫度計(jì)可作為微量恒溫器溫度校溫的參照。每月用中性的清潔劑清潔轉(zhuǎn)子一次，并在儀器使用記錄本上作好記錄，以延長(zhǎng)轉(zhuǎn)子的壽命。 做好校準(zhǔn)記錄。 電子天平：放置于無(wú)塵和震動(dòng)影響的臺(tái)面上，房間盡可能有空調(diào)。 本SOP 的改動(dòng)，可由任一使用本SOP 的工作人員提出，并報(bào)經(jīng)下述人員批準(zhǔn)簽字：室負(fù)責(zé)人、科主任。程序： 根據(jù)環(huán)境潔凈程度，定期將預(yù)過(guò)濾器中的濾料拆下清洗，一般間隔時(shí)間為3~6 個(gè)月。 水浴箱工作溫度波動(dòng)范圍是：預(yù)設(shè)+2 ℃范圍。 若溫控調(diào)節(jié)無(wú)效，報(bào)請(qǐng)?jiān)O(shè)備科維修，修理后須驗(yàn)收合格并簽字后方能正常使用。 本SOP 的改動(dòng)，可由任一使用本SOP 的工作人員提出，并報(bào)經(jīng)下述人員批準(zhǔn)簽字：室負(fù)責(zé)人、科主任。 運(yùn)行：離心條件設(shè)定好后，按“Start/Stop”鍵，離心機(jī)啟動(dòng)，“Open”鍵的指標(biāo)燈滅。范圍：本SOP 僅適用于各類(lèi)普通離心機(jī)。 將操作按鈕向下壓至第二停點(diǎn)位置。需要時(shí)，可更換管嘴繼續(xù)移液操作。操作程序： 轉(zhuǎn)動(dòng)旋鈕設(shè)定移液量，設(shè)定的移液量不可超出該移液器規(guī)定的范圍。風(fēng)機(jī)、照明均由批示燈指示其工作狀態(tài)，工作時(shí)，發(fā)光。 超低溫冰箱全室共用，若室外人員需存放試劑或標(biāo)本，須經(jīng)管理人同意。職責(zé)： 實(shí)驗(yàn)室工作人員均應(yīng)熟知并嚴(yán)格遵守本SOP，室負(fù)責(zé)人監(jiān)督落實(shí)。系統(tǒng)進(jìn)入正常運(yùn)行狀態(tài)后即可正常使用。以1000 毫升為例，取278 毫升的36%的次氯酸鈉母液，加蒸餾水至1000 毫升。 本SOP 的改動(dòng)，可由任一使用本SOP 的工作人員提出，并報(bào)經(jīng)下述人員批準(zhǔn)簽字：室負(fù)責(zé)人、科主任。 保持室內(nèi)空氣流通，且在實(shí)驗(yàn)完畢后，清潔、消毒工作臺(tái)面。標(biāo)準(zhǔn)操作： 實(shí)驗(yàn)人員進(jìn)入該區(qū)須穿本區(qū)工作服。sop_tc。 臨床標(biāo)本的接收、保存，細(xì)菌手工鑒定或上機(jī)前處理在本區(qū)內(nèi)進(jìn)行。sop_hbv。根據(jù)當(dāng)天的標(biāo)本驗(yàn)收登記表，取出當(dāng)天實(shí)驗(yàn)須配制和使用的試劑放置于即用冰箱，其余試劑要立即收好放回貯藏冰箱內(nèi)。適用范圍：試劑的貯存和制備。無(wú)菌室僅限操作者進(jìn)入，操作時(shí)嚴(yán)格關(guān)門(mén)。非本實(shí)驗(yàn)室工作人員未經(jīng)允許不得進(jìn)入。工作結(jié)束后必須立即對(duì)工作區(qū)進(jìn)行清潔或消毒。使用前以紫外燈消毒至少30 分鐘，定期用乳酸熏蒸，徹底消毒。試劑貯存和配制區(qū)標(biāo)準(zhǔn)操作程序目的：規(guī)定在本區(qū)進(jìn)行的工作，確保試劑正確貯存和制備。 記錄冰箱的溫度計(jì)讀數(shù)。sop_ng。 記錄恒溫箱的溫度計(jì)讀數(shù)。引用的文件及表格 臨床標(biāo)本的管理程序進(jìn)行：proc_smpl_1 項(xiàng)目SOP：sop tb。 本SOP 的改動(dòng)，可由任一使用本SOP 的工作人員提出，并報(bào)經(jīng)下述人員批準(zhǔn)簽字：室負(fù)責(zé)人、科主任。 做好儀器和實(shí)驗(yàn)記錄。職責(zé)： 實(shí)驗(yàn)室工作人員均應(yīng)熟知并嚴(yán)格遵守本SOP。 將36%的次氯酸鈉配制成10%的稀溶液。操作程序： 開(kāi)、關(guān)機(jī)：試劑冰箱按說(shuō)明書(shū)要求放好后，插上電源線，冷藏室溫度開(kāi)關(guān)置于4℃，冷凍室溫度開(kāi)關(guān)置于 20℃，2 小時(shí)后用溫度計(jì)確認(rèn)。適用范圍：本SOP 適用于 公司的 型超低溫冰箱。 超低溫冰箱由專人保管，試劑和物品應(yīng)按指定位置存放。 當(dāng)需要調(diào)節(jié)風(fēng)機(jī)風(fēng)速時(shí)，用工作臺(tái)操作面板上的風(fēng)速調(diào)節(jié)鈕進(jìn)行調(diào)節(jié)。職責(zé)：實(shí)驗(yàn)室工作人員必須嚴(yán)格按照本SOP 進(jìn)行操作。 松開(kāi)按鈕使之回到起點(diǎn)位置。 重復(fù)操作法：重復(fù)操作移液法可以快速、簡(jiǎn)便地重復(fù)轉(zhuǎn)移同體積的同種液體?；啬夸涬x心機(jī)操作標(biāo)準(zhǔn)操作程序目的：使每個(gè)工作人員能正確地使用本儀器。其中離心速度可分為每分鐘轉(zhuǎn)速（rpm）和離心力（cfg）兩種，可通過(guò)同時(shí)按下“Speed”鍵的上下鍵頭相互轉(zhuǎn)換。職責(zé)： 實(shí)驗(yàn)室工作人員均應(yīng)