動物細胞大規(guī)模培養(yǎng)方法及其應用(1)(更新版)
【正文】 累是抑制細胞生長的主要因素之一。右圖所示為由膠原制成的微粒直徑約 500μ m， 具有像海綿一樣的多孔性用非毒性物質增加其比重使之達到 1． 6或更高，以便它在高速向上流動的培養(yǎng)波中里流態(tài)化。由于這類反應器能提供動物細胞生長中所需的溶氧要求，產生的 剪切力較小以及在通氣中不產生泡沫，避免了在其它反應器中常見的某些弱點，如泡隊等，因而己廣泛地應用于實驗室研究和中試工業(yè)生產?；\式通氣裝置的特點主要是可以避免在向培養(yǎng)基中通氣時，氣泡不會直接損傷細胞。動物細胞的微囊化中海藻酸和聚氨基酸是關鍵材料。 3) 培養(yǎng)基利用率高。為了克服這些不利因素， 1967年， van wezell開發(fā)了微載體系統(tǒng)培養(yǎng)貼壁依賴性細胞。 懸浮培養(yǎng) 動物細胞的懸浮培養(yǎng)是在微生物發(fā)酵的基礎上發(fā)展起來的。 懸浮培養(yǎng)，設備結構簡單，有成熟的理論計算，可以借鑒微生物發(fā)酵的部分經驗，放大效應小。 ? 1967年， Van Wezel開發(fā)了微載體系統(tǒng)培養(yǎng)貼壁細胞。 6) 放大較容易。每根纖維管內成為“內室”，可灌流無血清培養(yǎng)液供細胞生長；管與管之間稱為“外室”。 導流筒隨攪拌同步轉動（ 30~60rpm)時，由于離心力的作用，使攪拌器中心管內產生負壓，迫使攪拌器外培養(yǎng)基流入中心管，沿管螺旋上升，再從三導 流筒口排出，繞攪拌器外緣螺旋下降，培養(yǎng)基和懸浮的細胞或附著細胞或微載體反復循環(huán)。對于不濕潤的硫水膜，相對于水的氣泡壓力約在 13X10’Pa。 這種反應器傳質性能很好，并在循環(huán)系統(tǒng)中采用膜氣體交換器，能快速提供 給高密度細胞所需的氧，同時排除代謝產物如二氧化碳 (c02)。因此一種“細胞靜止”過程可以有效降低營養(yǎng)成分消耗和代謝毒物產生，提高 CHO細胞的目的蛋白產率。
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