動物細(xì)胞大規(guī)模培養(yǎng)方法及其應(yīng)用(1)(更新版)
【正文】 累是抑制細(xì)胞生長的主要因素之一。右圖所示為由膠原制成的微粒直徑約 500μ m， 具有像海綿一樣的多孔性用非毒性物質(zhì)增加其比重使之達(dá)到 1． 6或更高，以便它在高速向上流動的培養(yǎng)波中里流態(tài)化。由于這類反應(yīng)器能提供動物細(xì)胞生長中所需的溶氧要求，產(chǎn)生的 剪切力較小以及在通氣中不產(chǎn)生泡沫，避免了在其它反應(yīng)器中常見的某些弱點，如泡隊等，因而己廣泛地應(yīng)用于實驗室研究和中試工業(yè)生產(chǎn)。籠式通氣裝置的特點主要是可以避免在向培養(yǎng)基中通氣時，氣泡不會直接損傷細(xì)胞。動物細(xì)胞的微囊化中海藻酸和聚氨基酸是關(guān)鍵材料。 3) 培養(yǎng)基利用率高。為了克服這些不利因素， 1967年， van wezell開發(fā)了微載體系統(tǒng)培養(yǎng)貼壁依賴性細(xì)胞。 懸浮培養(yǎng) 動物細(xì)胞的懸浮培養(yǎng)是在微生物發(fā)酵的基礎(chǔ)上發(fā)展起來的。 懸浮培養(yǎng)，設(shè)備結(jié)構(gòu)簡單，有成熟的理論計算，可以借鑒微生物發(fā)酵的部分經(jīng)驗，放大效應(yīng)小。 ? 1967年， Van Wezel開發(fā)了微載體系統(tǒng)培養(yǎng)貼壁細(xì)胞。 6) 放大較容易。每根纖維管內(nèi)成為“內(nèi)室”，可灌流無血清培養(yǎng)液供細(xì)胞生長；管與管之間稱為“外室”。 導(dǎo)流筒隨攪拌同步轉(zhuǎn)動（ 30~60rpm)時，由于離心力的作用，使攪拌器中心管內(nèi)產(chǎn)生負(fù)壓，迫使攪拌器外培養(yǎng)基流入中心管，沿管螺旋上升，再從三導(dǎo) 流筒口排出，繞攪拌器外緣螺旋下降，培養(yǎng)基和懸浮的細(xì)胞或附著細(xì)胞或微載體反復(fù)循環(huán)。對于不濕潤的硫水膜，相對于水的氣泡壓力約在 13X10’Pa。 這種反應(yīng)器傳質(zhì)性能很好，并在循環(huán)系統(tǒng)中采用膜氣體交換器，能快速提供 給高密度細(xì)胞所需的氧，同時排除代謝產(chǎn)物如二氧化碳 (c02)。因此一種“細(xì)胞靜止”過程可以有效降低營養(yǎng)成分消耗和代謝毒物產(chǎn)生，提高 CHO細(xì)胞的目的蛋白產(chǎn)率。
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