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動物細胞大規(guī)模培養(yǎng)方法及其應用(1)-全文預覽

2025-05-20 04:55 上一頁面

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【正文】 了克服這些不利因素, 1967年, van wezell開發(fā)了微載體系統(tǒng)培養(yǎng)貼壁依賴性細胞。 但是懸浮培養(yǎng)的細胞密度較低,轉化細胞懸浮培養(yǎng)有潛在致癌危險,培養(yǎng)病毒易失去病毒標記而降低免疫強力。 懸浮培養(yǎng) 動物細胞的懸浮培養(yǎng)是在微生物發(fā)酵的基礎上發(fā)展起來的。 主要包括: 懸浮培養(yǎng) 微載體培養(yǎng) 微囊化培養(yǎng) 中空纖維法 ? 利用大規(guī)模培養(yǎng)哺乳類細胞是一項重要的生產生物制品的技術,包括 疫苗、干擾素、激素、生長因子和單抗 等,具有很高的經濟和社會效益。 懸浮培養(yǎng),設備結構簡單,有成熟的理論計算,可以借鑒微生物發(fā)酵的部分經驗,放大效應小。但是,滾瓶系統(tǒng)勞動強度大,單位體積提供細胞生長的表面積小。 ? 1967年, Van Wezel開發(fā)了微載體系統(tǒng)培養(yǎng)貼壁細胞。 1) 表面積/體積比大 2) 由于微裁體懸浮于培養(yǎng)基中,是均勻懸浮 培養(yǎng),簡化了細胞生長各種環(huán)境因素的監(jiān)測和控制。 6) 放大較容易。 微囊化培養(yǎng) 在動物細胞微囊化的制備中,主要是應用海藻酸 — 聚氨基酸的方法,簡單過程是動物細胞與海藻酸溶液混合攪拌,經過微囊發(fā)生器將微球滴入氯化鈣溶液中,形成凝膠,然后再用聚氨基酸處理,使微球表面成膜,最后用檸檬酸處理去除微球內的鈣離子,以便球內的海藻酸成液態(tài),動物細胞得以懸浮在其中。每根纖維管內成為“內室”,可灌流無血清培養(yǎng)液供細胞生長;管與管之間稱為“外室”。 典型動物細胞培養(yǎng)反應器 A 中空纖維反應器(貼壁反應器) 其中關鍵的是一個籠式撐拌器。 導流筒隨攪拌同步轉動( 30~60rpm)時,由于離心力的作用,使攪拌器中心管內產生負壓,迫使攪拌器外培
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