動(dòng)物細(xì)胞大規(guī)模培養(yǎng)方法及其應(yīng)用(1)-全文預(yù)覽
【正文】 了克服這些不利因素， 1967年， van wezell開(kāi)發(fā)了微載體系統(tǒng)培養(yǎng)貼壁依賴性細(xì)胞。 但是懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞密度較低，轉(zhuǎn)化細(xì)胞懸浮培養(yǎng)有潛在致癌危險(xiǎn)，培養(yǎng)病毒易失去病毒標(biāo)記而降低免疫強(qiáng)力。 懸浮培養(yǎng) 動(dòng)物細(xì)胞的懸浮培養(yǎng)是在微生物發(fā)酵的基礎(chǔ)上發(fā)展起來(lái)的。 主要包括： 懸浮培養(yǎng) 微載體培養(yǎng) 微囊化培養(yǎng) 中空纖維法 ? 利用大規(guī)模培養(yǎng)哺乳類細(xì)胞是一項(xiàng)重要的生產(chǎn)生物制品的技術(shù)，包括 疫苗、干擾素、激素、生長(zhǎng)因子和單抗 等，具有很高的經(jīng)濟(jì)和社會(huì)效益。 懸浮培養(yǎng)，設(shè)備結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單，有成熟的理論計(jì)算，可以借鑒微生物發(fā)酵的部分經(jīng)驗(yàn)，放大效應(yīng)小。但是，滾瓶系統(tǒng)勞動(dòng)強(qiáng)度大，單位體積提供細(xì)胞生長(zhǎng)的表面積小。 ? 1967年， Van Wezel開(kāi)發(fā)了微載體系統(tǒng)培養(yǎng)貼壁細(xì)胞。 1) 表面積／體積比大 2) 由于微裁體懸浮于培養(yǎng)基中，是均勻懸浮 培養(yǎng)，簡(jiǎn)化了細(xì)胞生長(zhǎng)各種環(huán)境因素的監(jiān)測(cè)和控制。 6) 放大較容易。 微囊化培養(yǎng) 在動(dòng)物細(xì)胞微囊化的制備中，主要是應(yīng)用海藻酸 — 聚氨基酸的方法，簡(jiǎn)單過(guò)程是動(dòng)物細(xì)胞與海藻酸溶液混合攪拌，經(jīng)過(guò)微囊發(fā)生器將微球滴入氯化鈣溶液中，形成凝膠，然后再用聚氨基酸處理，使微球表面成膜，最后用檸檬酸處理去除微球內(nèi)的鈣離子，以便球內(nèi)的海藻酸成液態(tài)，動(dòng)物細(xì)胞得以懸浮在其中。每根纖維管內(nèi)成為“內(nèi)室”，可灌流無(wú)血清培養(yǎng)液供細(xì)胞生長(zhǎng)；管與管之間稱為“外室”。 典型動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)反應(yīng)器 A 中空纖維反應(yīng)器（貼壁反應(yīng)器） 其中關(guān)鍵的是一個(gè)籠式撐拌器。 導(dǎo)流筒隨攪拌同步轉(zhuǎn)動(dòng)（ 30~60rpm)時(shí)，由于離心力的作用，使攪拌器中心管內(nèi)產(chǎn)生負(fù)壓，迫使攪拌器外培
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