動物細(xì)胞大規(guī)模培養(yǎng)方法及其應(yīng)用(1)(文件)
【正文】 迅速改變，在線過程監(jiān)控更為重要。 ? 在生產(chǎn)疫苗、單抗和各種生物活性蛋白等生物制品的應(yīng)用領(lǐng)域中，優(yōu)化無血清培養(yǎng)基的成分可使不同的細(xì)胞在最有利于細(xì)胞生長和表達(dá)目的產(chǎn)物的環(huán)境中維持高密度培養(yǎng)。 ? 方法是向 CHO細(xì)胞中導(dǎo)入 p2 p27的基因，使細(xì)胞周期中 G1期延長 (細(xì)胞靜止 )，改造后，細(xì)胞活力正常，外源基因表達(dá)蛋白量提高。 ? 體外動物細(xì)胞培養(yǎng)中氨離子的積累是抑制細(xì)胞生長的主要因素之一。 反應(yīng)器中的液體流速能足以使細(xì)胞微粒懸浮，卻不會損壞脆弱的細(xì)胞；培養(yǎng)的細(xì)胞密度同且細(xì)胞長時間停留在反應(yīng)器中，細(xì)胞生長環(huán)境可方便地調(diào)控。右圖所示為由膠原制成的微粒直徑約 500μ m， 具有像海綿一樣的多孔性用非毒性物質(zhì)增加其比重使之達(dá)到 1． 6或更高，以便它在高速向上流動的培養(yǎng)波中里流態(tài)化。 上述這一要求是容易實現(xiàn)的，即加在管上的壓力 應(yīng)比管內(nèi)流動壓力降和氣泡壓力的總和高出 10％。由于這類反應(yīng)器能提供動物細(xì)胞生長中所需的溶氧要求，產(chǎn)生的 剪切力較小以及在通氣中不產(chǎn)生泡沫，避免了在其它反應(yīng)器中常見的某些弱點，如泡隊等，因而己廣泛地應(yīng)用于實驗室研究和中試工業(yè)生產(chǎn)。由流體攪拌加流體循環(huán)，使反應(yīng)器內(nèi)流體混和相當(dāng)好?；\式通氣裝置的特點主要是可以避免在向培養(yǎng)基中通氣時，氣泡不會直接損傷細(xì)胞。接種的細(xì)胞就貼在管壁上，并吸取“內(nèi)室”滲透出來的養(yǎng)分，迅速生長繁殖。動物細(xì)胞的微囊化中海藻酸和聚氨基酸是關(guān)鍵材料。 7) 勞動強(qiáng)度小，占用空間小 與微載體結(jié)合的生物反應(yīng)器系統(tǒng) ? 收獲細(xì)胞 ? 接種 —— 球傳球 包埋培養(yǎng) 懸浮生長和對貼壁依賴生長的細(xì)胞都適用，細(xì)胞生長的密度高，抗剪切力和抗污染能力強(qiáng)。 3) 培養(yǎng)基利用率高。 ? 微載體是直徑 60250μm的微珠。為
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