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正文內(nèi)容

微生物學(xué)考研筆記(更新版)

  

【正文】 儲(chǔ)藏物將被作為碳源和能源而用于合成反應(yīng)。巨大芽孢桿菌(Bacillus megaterium)在含乙酸或丁酸的培養(yǎng)基中生長(zhǎng)時(shí),細(xì)胞內(nèi)貯藏PHB可達(dá)其干重的60%。不同看法:青霉素酶分泌、DNA復(fù)制、分配以及細(xì)胞分裂有關(guān);“間體”僅是電鏡制片時(shí)因脫水操作而引起的一種贗像(5)古生菌細(xì)胞膜的獨(dú)特性和多樣性 參見(jiàn)周德慶p20① 古生菌與真細(xì)菌細(xì)胞膜中的磷脂有明顯差異真細(xì)菌:磷酸甘油酯古生菌:異戊二烯甘油醚② 古生菌細(xì)胞膜中存在著獨(dú)特的單分子層或單、雙分子層混合膜細(xì)胞質(zhì)和內(nèi)含物P25細(xì)胞質(zhì)(cytoplasm)是細(xì)胞質(zhì)膜包圍的除核區(qū)外的一切半透明、膠狀、顆粒狀物質(zhì)的總稱。膜的流動(dòng)性很大程度上取決于不飽和脂肪酸的結(jié)構(gòu)和相對(duì)含量。古生菌細(xì)胞壁中沒(méi)有真正的肽聚糖,而是由假肽聚糖、糖蛋白或蛋白質(zhì)構(gòu)成。4)支原體(Mycoplasma)在長(zhǎng)期進(jìn)化過(guò)程中形成的、適應(yīng)自然生活條件的無(wú)細(xì)胞壁的原核生物??讖娇s小,結(jié)構(gòu)更緊密孔徑增大,結(jié)構(gòu)變得疏松脂蛋白(lipoprotein)是一種通過(guò)共價(jià)鍵使外膜層牢固地連接在肽聚糖內(nèi)壁層上的蛋白,分子量約為7200。脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)位于細(xì)胞壁最外層的一層較厚的類脂多糖類物質(zhì)(相對(duì)分子質(zhì)量在1 0000以上)由三部分組成:類脂A(內(nèi)毒素的主要成分)、核心多糖、O特異側(cè)鏈(O多糖,O抗原)O特異側(cè)鏈糖的種類、順序和空間構(gòu)型是菌株特異的,是抗原特異性的物質(zhì)基礎(chǔ)KDO:2酮3脫氧辛糖酸;Hep:L甘油D甘露庚糖;Man:甘露糖;Rha:鼠李糖;Gal:半乳糖;Abe:阿可比糖LPS層的主要功能:1)LPS結(jié)構(gòu)的多變,決定了革蘭氏陰性細(xì)菌細(xì)胞表面抗原決定簇的多樣性;根據(jù)LPS抗原性的測(cè)定,沙門氏菌(Salmonella)的抗原型多達(dá)2107種,一般都源自O(shè)特異側(cè)鏈種類的變化。分支桿菌具有抗酸染色的特性,是由于細(xì)胞壁中含分支菌酸的緣故。用稀酸或稀堿可以提取。 (N—乙酰胞壁酸——原核生物所特有的已糖)肽聚糖單體由三部分組成:雙糖單位 四肽尾 肽 橋雙糖單位中的β1,4糖苷鍵很容易被溶菌酶(lysozyme)所水解,從而引起細(xì)菌因肽聚糖細(xì)胞壁的“散架”而死亡。細(xì)胞壁堅(jiān)韌,菌體較硬?!安苁鲜謨?cè)”將古生菌分為5個(gè)主要類群:產(chǎn)甲烷菌、極端嗜鹽菌、還原硫酸鹽細(xì)菌、極端嗜熱S0代謝菌、無(wú)細(xì)胞壁古生菌。(3)在應(yīng)用研究方面,向著更自覺(jué)、更有效和可人為控制的方向發(fā)展,至70年代初,有關(guān)發(fā)酵工程的研究已與遺傳工程、細(xì)胞工程和酶工程等緊密結(jié)合,微生物已成為新興的生物工程中的主角。以研究微生物對(duì)維生素需要、酶的特性、尋找和研究抗生素以及逐步深入到以研究它們的遺傳變異和基因?yàn)橹鞯男码A段。福:抗生素效價(jià)提高,酶活性提高,代謝產(chǎn)物產(chǎn)量提高等禍:耐藥性的產(chǎn)生五、微生物學(xué)及其研究?jī)?nèi)容與分科微生物學(xué)(Microbiology)定義:是一門在細(xì)胞、分子或群體水平上研究微生物的形態(tài)構(gòu)造、生理代謝、遺傳變異、生態(tài)分布和分類進(jìn)化等生命活動(dòng)基本規(guī)律,并將其應(yīng)用于工業(yè)發(fā)酵、醫(yī)藥衛(wèi)生、生物工程和環(huán)境保護(hù)等實(shí)踐領(lǐng)域的科學(xué)。因此,發(fā)掘、利用、改造和保護(hù)有益微生物;控制、消滅和改造有害微生物3.最終目的:為人類社會(huì)的進(jìn)步服務(wù)細(xì)菌數(shù)億/g土壤,土壤中的細(xì)菌總重量估計(jì)為: 10034 10 12 噸每張紙幣帶細(xì)菌:900萬(wàn)個(gè) 人體體表及體內(nèi)存在大量的微生物:皮膚表面:均10萬(wàn)個(gè) 細(xì)菌/平方厘米 口腔:細(xì)菌種類超過(guò)500種 腸道: 微生物總量達(dá)100萬(wàn)億 糞便干重的1/3是細(xì)菌, 每克糞便的細(xì)菌總數(shù)為:1000 億個(gè) 每個(gè)噴嚏的飛沫含4500150000個(gè)細(xì)菌福:微生物在許多重要產(chǎn)品中所起的不可替代的作用,例如:面包、奶酪、啤酒、抗生素、疫苗、維生素、酶等重要產(chǎn)品的生產(chǎn). 體內(nèi)的正常菌群是人及動(dòng)物健康的基本保證;幫助消化、提供必需的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)、組成生理屏障是人類生存環(huán)境中必不可少的成員,有了它們才使得地球上的物質(zhì)進(jìn)行循環(huán). 以基因工程為代表的現(xiàn)代生物技術(shù)的發(fā)展及其美妙的前景也是微生物對(duì)人類作出的又一重大貢獻(xiàn)。現(xiàn)代定義:一般是指絕大多數(shù)憑肉眼看不見(jiàn)或看不清,必須借助顯微鏡才能看見(jiàn)或看清,以及少數(shù)能直接通過(guò)肉眼看見(jiàn)的單細(xì)胞、多細(xì)胞和無(wú)細(xì)胞結(jié)構(gòu)的微小生物的總稱。 m(微米)級(jí):光學(xué)顯微鏡下可見(jiàn)(細(xì)胞) n m(納米)級(jí):電子顯微鏡下可見(jiàn)(細(xì)胞器,病毒)簡(jiǎn)(構(gòu)造簡(jiǎn)單) 單細(xì)胞微生物 簡(jiǎn)單多細(xì)胞 非細(xì)胞(即“分子生物”) 低(進(jìn)化地位低) 原核類:細(xì)菌(真細(xì)菌,古生菌),放線菌,藍(lán)細(xì)菌,支原體,立克次氏體,衣原體等。, 吸收多, 轉(zhuǎn)化快吸收營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)和排出廢物,有最大的代謝速率。:18611897實(shí)質(zhì):生理水平研究階段 開(kāi)創(chuàng)者:巴斯德,德國(guó)人柯赫特點(diǎn):①建立了一系列研究微生物所必要的獨(dú)特方法和技術(shù),從而解決了認(rèn)識(shí)微生物的第二、三、四個(gè)障礙;②借助于良好的研究方法,開(kāi)創(chuàng)了尋找病原微生物的“黃金時(shí)期”;③把微生物學(xué)的研究從形態(tài)描述推進(jìn)到生理學(xué)研究的新水平;④開(kāi)始客觀上以辯證唯物主義的“實(shí)踐一理論一實(shí)踐”的思想方法指導(dǎo)科學(xué)實(shí)驗(yàn);⑤微生物學(xué)以獨(dú)立的學(xué)科形式開(kāi)始形成,但當(dāng)時(shí)主要還是以其各應(yīng)用性分支學(xué)科的形式存在 微生物學(xué)奠基人:法國(guó)化學(xué)家巴斯德 (1) 徹底否定了“自然發(fā)生”學(xué)說(shuō):著名的曲頸瓶試驗(yàn)無(wú)可辯駁地證實(shí),空氣內(nèi)確實(shí)含有微生物,是它們引起有機(jī)質(zhì)的腐敗。(3)開(kāi)始出現(xiàn)微生物學(xué)史上的第二個(gè)“淘金熱”一一尋找各種有益微生物代謝產(chǎn)物的熱潮。桿狀(桿菌bacillus, bacilli)細(xì)胞呈桿狀或圓柱形,一般其粗細(xì)(直徑)比較穩(wěn)定,而長(zhǎng)度則常因培養(yǎng)時(shí)間、培養(yǎng)條件不同而有較大變化。一般生活在淡水中固形物的表面,其異常形態(tài)使得菌體的表面積與體積之比增加,能有效地吸收有限的營(yíng)養(yǎng)物;2)星形細(xì)菌(starshaped bacteria )3)方形細(xì)菌(squareahaped bacteria)4)異常形態(tài)(畸形,衰頹型) 環(huán)境條件的變化: 正常形態(tài)物理、化學(xué)因子的刺激 阻礙細(xì)胞正常發(fā)育 環(huán)境條件恢復(fù)正常培養(yǎng)時(shí)間過(guò)長(zhǎng) 細(xì)胞衰老 營(yíng)養(yǎng)缺乏 異常形態(tài) 自身代謝產(chǎn)物積累過(guò)多常用的染色方法簡(jiǎn)單染色法 正染色 革蘭氏染色法 鑒別染色法 抗酸性染色法 死菌 芽孢染色法 姬姆薩染色法細(xì)菌染色法 負(fù)染色: 莢膜染色法等 活菌:用美藍(lán)或TTC(氧化三苯基四氮唑)等作活菌染色(二)大小范圍一般細(xì)菌的大小范圍:測(cè)量單位——um(微米)球菌: ~ 1 um (直徑)桿菌:~ 1 um (直徑) X 1~ 80 um(長(zhǎng)度)螺旋菌:~ 1 um (直徑) X 1~ 50 um(長(zhǎng)度)(長(zhǎng)度是菌體兩端點(diǎn)之間的距離,而非實(shí)際長(zhǎng)度)測(cè)量方法顯微鏡測(cè)微尺;顯微照相后根據(jù)放大倍數(shù)進(jìn)行測(cè)算細(xì)菌大小測(cè)量結(jié)果的影響因素個(gè)體差異;干燥、固定后的菌體會(huì)一般由于脫水而比活菌體縮短1/31/4;染色方法的影響,一般用負(fù)染色法觀察的菌體較大;幼齡細(xì)菌一般比成熟的或老齡的細(xì)菌大;環(huán)境條件,如培養(yǎng)基中滲透壓的改變也會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞大小的變化。肽橋:短肽尾中的第四個(gè)氨基酸殘基D丙氨酸的羧基通過(guò)肽鍵與相鄰另一短肽尾中的第三個(gè)氨基酸的氨基相連??捎?5%熱酚水提取,也可用熱水從脫脂凍干細(xì)菌中提取。大多數(shù)金黃色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)細(xì)胞壁中有葡萄球菌A蛋白(SPA),它與肽聚糖共價(jià)結(jié)合,對(duì)胰酶敏感,有抗吞噬和抗噬菌體的作用。2)LPS負(fù)電荷較強(qiáng),與磷壁酸相似,也有吸附Mg2+、Ca2+等陽(yáng)離子以提高其在細(xì)胞表面濃度的作用,對(duì)細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)起穩(wěn)定作用。在周質(zhì)空間中,存在著多種周質(zhì)蛋白(periplasmic proteins):水解酶類;合成酶類;結(jié)合蛋白;受體蛋白;D. 粘合位點(diǎn):P19革蘭氏陰性菌細(xì)胞壁的許多部位,外膜與質(zhì)膜直接接觸,是加固革蘭氏陰性菌細(xì)胞壁并支撐外膜的另一結(jié)構(gòu)。特點(diǎn):沒(méi)有完整而堅(jiān)韌的細(xì)胞壁,細(xì)胞呈多形態(tài);有些能通過(guò)細(xì)菌濾器,故又稱“濾過(guò)型細(xì)菌”;對(duì)滲透敏感,在固體培養(yǎng)基上形成“油煎蛋”似的小菌落();2)原生質(zhì)體(protoplast)在人為條件下,用溶菌酶處理或在含青霉素的培養(yǎng)基中培養(yǎng)而抑制新生細(xì)胞壁合成而形成的僅由一層細(xì)胞膜包裹的,圓球形、對(duì)滲透壓變化敏感的細(xì)胞,一般由革蘭氏陽(yáng)性細(xì)菌形成。作用特點(diǎn):對(duì)生長(zhǎng)旺盛的革氏陽(yáng)性菌有明顯的抑制作用。(1)化學(xué)組成:磷脂(20~30%);蛋白質(zhì)(50~70%)A. 磷脂親水的極性端;疏水的非極性端在極性頭的甘油3C上,不同種微生物具有不同的R基,如磷脂酸、磷脂酰甘油、磷脂酰乙醇胺、磷脂酰膽堿、磷脂酰絲氨酸或磷脂酰肌醇等。細(xì)胞膜是重要的代謝活動(dòng)中心。一些內(nèi)含物無(wú)膜包裹,自由存在于細(xì)胞質(zhì)中,如多聚磷酸鹽顆粒、藻青素顆粒和一些糖原顆粒;另一些內(nèi)含物則由單層膜(不是典型的雙層膜)所包裹,如聚β羥丁酸顆粒、某些糖原和硫粒、羧酶體及氣泡等。有的細(xì)菌積累淀粉粒,用碘液染成深蘭色。)儲(chǔ)藏物在細(xì)菌細(xì)胞中大量積累,還可以被人們利用。有些厭氧性光合細(xì)菌利用氣泡集中在水下1030米深處,這樣既能吸收適宜的光線和營(yíng)養(yǎng)進(jìn)行光合作用,又可以避免直接與氧接觸。細(xì)菌染色體的組織結(jié)構(gòu): 大腸桿菌染色體由50~100個(gè)結(jié)構(gòu)域(domain)或環(huán)(loop)組成。C. 折光性強(qiáng),不易著色(芽孢染色法)。)6)芽孢形成與萌發(fā)萌發(fā):3 個(gè)階段活化:加熱、化學(xué)物質(zhì)(Mn2+, 表面活性劑,氨基酸,糖)出芽生長(zhǎng)7)研究芽孢的意義①消毒滅菌的最重要的指標(biāo)肉類罐頭:肉毒梭狀芽孢桿菌外科器械:破傷風(fēng)梭菌、產(chǎn)氣莢膜梭菌工業(yè)發(fā)酵:嗜熱脂肪芽孢桿菌 121℃,15 min或 115℃,30 min以上②篩選菌種(土樣+肉湯培養(yǎng)基(80℃,1015 min)③分類依據(jù)(芽孢的形態(tài)、大小和著生位置是細(xì)菌分類和鑒定中的重要指標(biāo)。 包裹在單個(gè)細(xì)胞上 在壁上有固定層 層次厚:(大)莢膜 層次?。何⑶v膜 松散,未固定在細(xì)胞壁上:粘液層 包裹在群體細(xì)胞上:菌膠團(tuán)(分泌的粘液將許多菌體粘合在一起,形成分支狀的大型粘膠物,細(xì)菌群體的共同糖被)2)成分組分依種而異,多糖、多肽或蛋白質(zhì)(多糖居多)3)形成條件菌種的遺傳特性決定;也與環(huán)境條件有關(guān)糖被并非細(xì)胞生活的必要結(jié)構(gòu),但它對(duì)細(xì)菌在環(huán)境中的生存有利。所有弧菌、螺菌和假單胞菌,約半數(shù)桿菌和少數(shù)球菌有鞭毛。 方式:細(xì)菌以推進(jìn)方式做直線運(yùn)動(dòng),鞭毛主要通過(guò)旋轉(zhuǎn)來(lái)推動(dòng)細(xì)菌運(yùn)動(dòng),猶如輪船的螺旋漿以翻騰形式做短促轉(zhuǎn)向運(yùn)動(dòng)。一般見(jiàn)于革蘭氏陰性細(xì)菌的雄性菌株(即供體菌)功能 向雌性菌株(即受體菌)傳遞遺傳物質(zhì); RNA噬菌體的特異性吸附受體。放線菌實(shí)際上是屬于真細(xì)菌范疇內(nèi)的原核微生物,只不過(guò)其細(xì)胞形態(tài)為分枝狀菌絲。一株完整的鏈霉菌(Streptmyces)由三部分組成(按發(fā)生順序)營(yíng)養(yǎng)菌絲(基內(nèi)菌絲)匍匐生長(zhǎng)于培養(yǎng)基內(nèi),吸收營(yíng)養(yǎng)。 無(wú)性孢子 分生孢子:大多數(shù)放線菌孢囊孢子:游動(dòng)放線菌屬繁殖方式 鏈孢囊菌屬 菌絲斷裂:常見(jiàn)于液體培養(yǎng)中,工業(yè)發(fā)酵生產(chǎn)抗生素時(shí)都以此法大量繁殖放線菌。弗蘭克氏菌屬(Frankineae) 能與非豆科木本植物共生固氮(根瘤)小單孢菌屬(Micromonospora)氨基糖苷類抗生素:棘孢小孢菌(M. echinospors):慶大霉素(gebtamicin)、紫蘇霉素、福提霉素、達(dá)地米星本節(jié)重點(diǎn)什么叫放線菌?放線菌的形態(tài)構(gòu)造(鏈霉菌屬)。土壤、巖石、(溫泉、鹽湖)2)形態(tài)差異極大,有球狀、桿狀和絲狀等形態(tài);3)細(xì)胞中含有葉綠素a,進(jìn)行產(chǎn)氧型光合作用(光合器—類囊體,片層狀膜系統(tǒng))藍(lán)細(xì)菌被認(rèn)為是地球上生命進(jìn)化過(guò)程中第一個(gè)產(chǎn)氧的光合生物,對(duì)地球上從無(wú)氧到有氧的轉(zhuǎn)變、真核生物的進(jìn)化起著里程碑式的作用。經(jīng)濟(jì)效益和理論價(jià)值特點(diǎn):既可進(jìn)行光合作用,又可固氮;可抗污染環(huán)境;應(yīng)用:保健產(chǎn)品(“螺旋藻”)、優(yōu)質(zhì)飼料;提取有用成分:EPA和DHA等多不飽和脂肪酸;藻藍(lán)素等天然色素;第四節(jié) 支原體、立克次氏體和衣原體支原體(Mycoplasma),立克次氏體(Rickettsia),衣原體(Chlamydia):G,其大小和特性均介于通常的細(xì)菌與病毒之間的原核生物。3)可進(jìn)行人工培養(yǎng),但營(yíng)養(yǎng)要求苛刻(血清或腹水),菌落微小,呈典型的“油煎荷包蛋”形狀;4)一些支原體能引起人類、牲畜、家禽和作物的病害疾病。始體無(wú)感染性,但能在空泡中以二分裂方式反復(fù)繁殖,形成大量新的原體,積聚于細(xì)胞質(zhì)內(nèi)成為各種形狀的包
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