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天然產(chǎn)物提取液中蛋白質(zhì)和脂肪等雜質(zhì)的去除試驗(yàn)畢業(yè)論文(完整版)

  

【正文】 義 [12]。又例如生產(chǎn)辣椒紅色素的工廠 ,用辣椒作為原料。歐洲、美國(guó)、日本等國(guó)天然色素產(chǎn)業(yè)的發(fā)展早于我國(guó) , 這些國(guó)家在管理水平、規(guī)范化、標(biāo)準(zhǔn)化、系列化、實(shí)用化等方面日臻完善。我國(guó) 產(chǎn)物 生產(chǎn)行業(yè)雖有少數(shù)工廠擁有較好的生產(chǎn)技術(shù)、工藝和裝備 , 但大多數(shù)企業(yè)在技術(shù)、工藝方面比較落后 , 設(shè)備陳舊或簡(jiǎn)陋 ,必須不斷創(chuàng)新提高 , 才能使產(chǎn)品上檔次 , 行業(yè)才有發(fā)展。同時(shí)我國(guó)幅員遼闊 , 位處寒、溫、亞熱、熱帶地區(qū) , 生物資源豐富 , 種類(lèi) 繁多 , 而且許多品種產(chǎn)地集中 , 如云南的西雙版納、武陵山區(qū)、秦巴山以及東北的長(zhǎng)白山均是天然色素資源較為集中的地區(qū) , 其他各地都有天然色素生產(chǎn)的原料 , 均可以因地制宜地開(kāi)發(fā)利用。其中 : 焦糖每年產(chǎn)量約 萬(wàn) 噸 ; 紅曲米及紅曲米粉每年約產(chǎn) 4000 多 噸 ;紅曲紅每年約產(chǎn) 200 多 噸; 辣椒油樹(shù)脂及辣椒紅每年約產(chǎn) 250 多 噸; 桅子黃色素每年約產(chǎn)10 噸; 高梁紅色素每年約產(chǎn) 45 噸; 可可殼棕每年約產(chǎn) 10 噸 ; 甜菜紅每年約產(chǎn) 20 噸 ; 蟲(chóng)膠紅每年約產(chǎn) 20 噸 。 所以在開(kāi)發(fā)利用天然 產(chǎn)物時(shí),既要充分利用我國(guó)豐富自然 資源 ,但也要注意綜合利用、環(huán)境 的保護(hù)以及資源的可持續(xù)發(fā)展。趙明波等建立了菊科植物紅花中的主要有效成分羥基紅花黃色素 A 的 HPLC 定量分析方法。鐘耕等采用分子蒸餾法 , 以冷榨甜橙油為原料 , 提取其中的類(lèi)胡蘿卜素。它兼?zhèn)溆袣怏w低粘度、高擴(kuò)散和流體的高密度、大溶解度兩方面的特點(diǎn) [8]。提取高梁紅色 素是用%的鹽酸水溶液浸泡 2h, 除去雜質(zhì)和雜色后 ,再用 7%的乙醇水溶液在 40℃ 下浸提 ,然后過(guò)濾、濃縮、干燥而得 [6]。 我國(guó)天然 產(chǎn)物 的 研究和應(yīng)用現(xiàn)狀 天然 產(chǎn)物 的 研究方法 天然 產(chǎn)物 的獲得和生產(chǎn)主要有 三 條途徑 : 一是直接提取 ; 二是人工合成 ; 三是利用生物技術(shù)生產(chǎn)。 Heating。 實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明對(duì)天然產(chǎn)物提取液進(jìn)行冷凍、加熱、離心處理能夠有效除去提取液中的蛋白質(zhì)和脂肪等大分子雜質(zhì)。 2 第一章 緒論 天然產(chǎn)物的介紹 天然產(chǎn)物是指動(dòng)物、植物、昆 蟲(chóng)、海洋生物和微生物體內(nèi)的組成成分或其代謝產(chǎn)物以及人和動(dòng)物體內(nèi)許多 內(nèi)源性的化學(xué)成分。通過(guò)對(duì) 天然產(chǎn)物 分子性質(zhì)的研究 , 人們就可以更好地指導(dǎo)其在工業(yè)生產(chǎn)中的應(yīng)用 , 為 天然產(chǎn)物 工業(yè)的發(fā)展提供理論基礎(chǔ)。辣椒紅色素的堿提取是以 15% 40%的 NaOH 水溶液處理辣椒油樹(shù)脂 ,使辣椒紅色素中的脂肪成分發(fā)生皂化反應(yīng) , 從而將辣椒紅色素游離釋放出來(lái) , 再分離精制可得到產(chǎn)品。微波萃取克服了超臨界萃取和溶劑萃取方法的上述缺陷 , 既降低了操作費(fèi)用 , 又符合環(huán)境4 保護(hù)的要求 , 表現(xiàn)出良好的發(fā)展前景和巨大的應(yīng)用潛力。 (7)高效液相色譜 (HPLC) 技術(shù) HPLC 是一種以液體為流動(dòng)相的現(xiàn)代柱色譜分離分析技術(shù)。在色素分離中 , 利用色素與雜質(zhì)分子大小的差異 , 5 采用纖維超濾膜和反滲透膜 , 可阻留各種不溶性大分子如多糖、蛋白質(zhì)等。經(jīng)過(guò) 20 多年的努力 , 我國(guó)的食用色素產(chǎn)業(yè)已初具規(guī)模 , 成為食品工業(yè)中的一個(gè)重要行業(yè)。 天然 產(chǎn)物 的 發(fā)展前景 隨著我國(guó)食品、醫(yī)藥、輕工業(yè)的發(fā)展 , 天然 產(chǎn)物 的市場(chǎng)需求量將大幅度增加 , 新產(chǎn)品開(kāi)發(fā)和應(yīng)用范圍的擴(kuò)大 , 使得天然產(chǎn)物 市場(chǎng)具有廣闊的發(fā)展前景。紅曲米中含有降血脂物質(zhì)酪伐它汀 , 作為著色劑用于食品中 ,可以有效地使人體內(nèi)血脂達(dá)到正常平 衡不少以類(lèi)黃酮為天 然色素的物質(zhì)有抗氧化功能或軟化血管功能。我國(guó)各天然色素生產(chǎn)企業(yè)一般規(guī)模都偏小 , 產(chǎn)品單一 , 在小量、低質(zhì)量、高損耗中徘徊 , 經(jīng)濟(jì)效益不明顯 , 抗風(fēng)險(xiǎn)能力 差。許多天然色素生產(chǎn)的原料是野生植物、農(nóng)作物副產(chǎn)品或廢棄物。我國(guó)是一個(gè)占世界人口四分之一的、具有 13 億人口的大國(guó) , 因此 , 這樣多的人口 , 要進(jìn) 入 一日三餐的加工食品時(shí)代 , 需要的食用天然色素是很大的。透析是將待分離的混合物放入半透膜制成的透析袋中 , 再浸入透析液進(jìn)行分離。例如 , 在從大米渣中提取蛋白質(zhì)的實(shí)驗(yàn)中 , 加入纖維素酶和 ? 淀粉酶進(jìn)行預(yù)處理后 , 再用離心的方法將有用物質(zhì)與分解掉的雜質(zhì)進(jìn)行初步分離 [13]。目前常用的凝膠有交聯(lián)葡聚糖凝膠、聚丙烯酰胺凝膠和瓊脂糖凝膠等。因而可以通過(guò)調(diào)節(jié)溶液的 pH 值來(lái)分離純化蛋白質(zhì)。 蛋白質(zhì)的鹽溶和鹽析是中性鹽顯著影響球狀蛋白質(zhì)溶解度的現(xiàn)象 , 其中 , 增加蛋白質(zhì)溶解度的現(xiàn)象稱(chēng)鹽溶 , 反之為鹽析。例如 , 在冰浴中磁力攪拌下 , 在 4℃ 預(yù)冷的培養(yǎng)液中緩慢加入乙醇 (25℃ ), 可以使冰核蛋白析出 , 從而純化冰核蛋白。此方法可以在室溫環(huán)境下進(jìn)行 , 雙水相中的聚合物還可以提高蛋白質(zhì)的穩(wěn)定性 , 收率較高。 (3)根據(jù)電荷不同進(jìn)行分離純化 根據(jù)蛋白質(zhì)的電荷即酸堿性質(zhì)不同分離蛋白質(zhì)的方法有電泳和離子交換層析兩類(lèi)。結(jié)果發(fā)現(xiàn) , 聚丙烯酰胺電泳的條帶分辨率低 , 加樣量不高 ; 等電 聚焦電泳分辨率最高 , 可以分離同種蛋白的亞成分 , 加樣量最小 ; 等速提純電泳區(qū)帶分辨率較高 , 可將樣品分成單一成分 , 加樣量最大。李全宏等 [18]將離子交換層析應(yīng)用于濃縮蘋(píng)果汁中蛋白質(zhì)的提純。該方法成本較低 , 吸附劑價(jià)格低廉、機(jī)械強(qiáng)度高、抗污染能力較強(qiáng)、非特異性吸附較小、可反復(fù)使用、適用性廣 , 產(chǎn)品質(zhì)量穩(wěn)定 。達(dá)到穩(wěn)定晶型需要足夠的時(shí)間 , 延長(zhǎng)結(jié)晶時(shí)間有利于穩(wěn)定晶型的形成和成長(zhǎng)。 由于離心機(jī)等設(shè)備可產(chǎn)生相當(dāng)高的角速度,使離心力遠(yuǎn)大于重力,于是溶液中的懸浮物便易于沉淀析出: 又由于比重不同的物質(zhì)所受到的離心力不同,從而沉降速度不同,能使比重不同的物質(zhì)達(dá)到分離。經(jīng)過(guò)一段時(shí)間的離心操作,就可以實(shí)現(xiàn)密度不同物質(zhì)的有效分離。 儀器和試劑 實(shí)驗(yàn)儀器 BCD271SDJ 冰箱 (青島海爾股份有限公司 ) SUY22600DT 超聲清洗機(jī) (鄭州生元儀器有限公司) 玻璃儀器氣流烘干器 (河南智城科技發(fā)展有限公司) HH501 超級(jí)恒溫水浴 (常州國(guó)華電器有限公司) FA 1004B 電子分析天平 (上海佑科儀器儀表有限公司) 852A 雙數(shù)顯恒溫磁力攪拌器 (金壇市杰瑞爾電器有限公司) 電子溫度計(jì) (南京好又多電器有限公司) TDL802B 臺(tái)式離心機(jī) (上海安亭科學(xué)儀器廠) T6 新世紀(jì)紫外可見(jiàn)分光光度計(jì) (北京普析通用儀器有限責(zé)任公司) Agilent 1200LC 高效液相色譜儀 (美國(guó)安捷倫科技有限公司) 主要試劑 高純 水( Water) 408 制備 無(wú)水乙醇( Ethanol absolute) AR(天津市富宇精細(xì)化工有限公司 ) 氫氧化鈉( Sodium hydroxide) AR(天津市登科化學(xué)試劑有限公司 ) 乙腈( Acetonitrile) 色譜純(天津市大茂化學(xué)試劑廠) 有機(jī)玻璃 (PMMA) 市售 分析方法 用紫外分光光度計(jì)掃描迎春花、連翹提取液稀釋 100 倍后的吸收光譜 。 0 1 2 3 4 5 6 72345678910Temperature/℃Tim e /m in 圖 迎春花原液 3℃ 降溫曲線(xiàn) 18 0 1 2 3 4 5 6 7234567891011Temperature/℃Tim e /h 圖 連翹花原液 3℃ 降溫曲線(xiàn) 2 0 2 4 6 8 10 12 14 16 182530354045Temperature/℃Tim e /m in 圖 迎春花原液 45℃ 升溫曲線(xiàn) 19 2 0 2 4 6 8 10 12 14 16 182530354045Temperature/℃Tim e /m in 圖 連翹花原液 45℃ 升溫曲線(xiàn) 除雜前 提取液 吸收光譜的 測(cè)定 連翹花中主要含有連翹苷、連翹酯苷及黃酮類(lèi)成分 , 黃酮類(lèi)成分主要是槲皮素 ;迎春花含丁香甙、迎春花苷、及黃酮類(lèi)成分 ,黃酮成分主要是蘆丁 。 除雜前后對(duì)有機(jī)玻璃 的 上色效果 提取液除雜前后對(duì)有機(jī)玻璃上色紫外圖譜見(jiàn) 圖 圖 。 30 參考文獻(xiàn) [1]陳尚钘 , 劉誠(chéng) , 范國(guó)榮 .天然產(chǎn)物中活性成分提取分離及分析技術(shù) [J].江西林業(yè)科技 , 20xx, (3):3236. 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