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bca蛋白定量(完整版)

2024-10-05 14:57上一頁面

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【正文】 ℃放置30分鐘后,以標準曲線0號管做參比,在562nm波長下比色,記錄吸光值;6. 各管充分混勻,37℃放置30分鐘,然后在562nm下比色測定。 操作步驟A.檢測濃度下限達到25微克/毫升,待測樣品體積為1~20微升。二、 各孔加入200μL BCA工作液;4. 根據(jù)所測樣品的吸光值,在標準曲線上即可查得相應(yīng)的蛋白含量(μg),除以樣品稀釋液總體積(20μL),乘以樣品稀釋倍數(shù)即為樣品實際濃度(單位:μg/μL)。 各管加入1000μL BCA工作液;4.以蛋白含量(μg)為橫坐標,吸光值為縱坐標,繪出標準曲線;5.3. 待測樣品濃度在50~2000微克/毫升濃度范圍內(nèi)有較好的線性關(guān)系。但受螯合劑和略高濃度的還原劑的影響,需確保EDTA低于10mM,無EGTA,二硫蘇糖醇低于1mM。 標準曲線的繪制:各管按照下表加入試劑孔號0
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