【正文】 （ 1）、白細(xì)胞介素－ 24 是新發(fā)現(xiàn)的抗腫瘤細(xì)胞因子，國內(nèi)外均未上市。已對該項(xiàng)目進(jìn)行了一年多的研究，已完成人白細(xì)胞介素－ 24 基因的克隆。 二、國內(nèi)外現(xiàn)狀和發(fā)展趨勢： 經(jīng)檢索，在國內(nèi)，只檢索到軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院和蘇州大學(xué)細(xì)胞和分子生物學(xué)教研室對 il－ 24 基因的克隆及在大腸桿菌中的表達(dá)文獻(xiàn)，未發(fā) 現(xiàn)利用腺病毒介導(dǎo)人 il24基因來治療腫瘤的報(bào)道。 該項(xiàng)目是我單位獨(dú)立研究的基因治療項(xiàng)目，現(xiàn)已獨(dú)立完成了人白細(xì)胞介素－ 24 基因的克隆。所以，通過比較可以證明 il24的研究有著重要的臨床意義。理想的功能基因表達(dá)產(chǎn)物應(yīng)能誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞調(diào)亡、抑制腫瘤生長和腫瘤血管形成，對正常組織細(xì)胞無明顯毒副作用 。 基因治療惡性實(shí)體腫瘤是臨床醫(yī)生面臨的挑戰(zhàn)性課題，由于腫瘤易轉(zhuǎn)移的特性，使手術(shù)、化療和放療等傳統(tǒng)治療方法對晚期腫瘤的治療有限。 il24 的這種作用在至少 50 余種人類惡性腫瘤細(xì)胞實(shí)驗(yàn)中得到證實(shí)，包括黑色素瘤、神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞瘤、骨肉瘤、乳腺癌、子宮頸癌、肺癌、結(jié)腸癌、鼻咽癌、前列腺癌、胰腺癌等。 據(jù)世界衛(wèi)生組織（ who）統(tǒng)計(jì)，全世界每年有 500 多萬人死于各種癌癥，每年各種癌癥患者多達(dá) 2200 萬人。有較強(qiáng)的生物技術(shù)藥物研究開發(fā)能力。 我單位從上世紀(jì)八十年代中期開始對生物技術(shù)進(jìn)行研究，基本與國外同行業(yè)同步。 三、現(xiàn)有研究基礎(chǔ)、特色和優(yōu)勢 現(xiàn)階段已達(dá)到的主要技術(shù)指標(biāo)和經(jīng)濟(jì)指標(biāo) （ 1）現(xiàn)階段已完成人白細(xì)胞介素－ 24基因的克隆。腺病毒可感染一系列哺乳動物細(xì)胞，因此在大多哺乳動物細(xì)胞和組織中均可用來表達(dá)重組蛋白。在人才、資源和產(chǎn)業(yè)化方面具備如下優(yōu)勢： 有研究開發(fā)基因藥物的專業(yè)機(jī)構(gòu) 生物技術(shù)研究所。 我單位科研工作經(jīng)驗(yàn)豐富，承擔(dān)過省、市、區(qū)級科研項(xiàng) 第 8 頁 共 20 頁 目多項(xiàng)。 所以，基因治療腫瘤是關(guān)系到廣大患者生命安全和生活質(zhì)量 第 9 頁 共 20 頁 的高科技項(xiàng)目。、 laquo。 復(fù)制型病毒（ rca）的檢測： a549 細(xì)胞檢測法，每1010vp 中應(yīng) 不 高于 1rca（即 ≤1rca/1010vp ）。 六、研究方案、技術(shù)路線、組織方式與課題 分解 重組人白細(xì)胞介素 24腺病毒注射液的技術(shù)方案 24腺病毒的建立 （ 1）人白介素 24基因的克隆 第 11 頁 共 20 頁 從人外周血單個(gè)核細(xì)胞中提取 mrna，設(shè)計(jì)并合成特異引物，應(yīng)用 pcr 的方法擴(kuò)增得到人白細(xì)胞介素 24的基因片段。 、重組人白細(xì)胞介素 24 腺病毒注射液的質(zhì)量控制和檢測方法的建立 參照國家 laquo。 （ 1）比活性：病毒比滴度 =病毒感染滴度 /病毒顆粒數(shù)測定 （ 2）復(fù)制型病毒（ rca）的檢測： a549 細(xì)胞檢測法，每1010vp 中應(yīng)不高于 1rca（即 ≤ 1rca/1010vp ） （ 3）腺相關(guān)病毒的檢測 采用 pcr法，應(yīng)無腺相關(guān)病毒（ aav）的污染。 重組人白細(xì)胞介素 24腺病毒注射液研制和生產(chǎn)過程，無三廢排放。 韓代書，博士、教授，中國協(xié)和醫(yī)科大學(xué)博士生導(dǎo)師，細(xì)胞生物學(xué)專業(yè)教授，在細(xì)胞生物學(xué)學(xué)科方面有著很深的造詣和貢獻(xiàn)，有數(shù)十篇論在國際刊物上發(fā)表。 “ 注射用重組人白介素 2（ 125ser） ” 和 “ 重組人粒細(xì)胞集落刺激因子注射液（ rhgcsf） ”兩項(xiàng)新藥分別被列為《國家星火計(jì)劃項(xiàng)目》和《 XX 省火炬計(jì)劃》，《 XX 省技術(shù)改造導(dǎo)向計(jì)劃》，《 XX 市三十項(xiàng)重點(diǎn)技術(shù)改造項(xiàng)目》。 （ 3）研究所配備有較完善的科研生產(chǎn)檢測儀器和設(shè)備。 二、國內(nèi)外現(xiàn)狀和發(fā)展趨勢〔包括知識產(chǎn)權(quán)現(xiàn)狀〕 主要說明： 國內(nèi)外基本情況及發(fā)展趨勢。 經(jīng)濟(jì)目標(biāo)，包括項(xiàng)目實(shí)施期間實(shí)際達(dá)到的年度指標(biāo)、完成時(shí)預(yù)計(jì)可實(shí)現(xiàn)的年銷售收入、年交稅總額、年凈利潤、年創(chuàng)匯額等。 七、年度計(jì)劃內(nèi)容 分年度說明項(xiàng)目執(zhí)行過程中的年度目標(biāo)；年度工作內(nèi)容及經(jīng)費(fèi)投入。 。 簡述單位法人及近幾年來研究開發(fā)業(yè)績。 六、研究方案、技術(shù)路線、組織方式與課題分解 主要說明： 技術(shù)方案，指技術(shù)路線、關(guān)鍵技術(shù)、工藝流程，主要技術(shù)參數(shù)等。 三、現(xiàn)有研究基礎(chǔ)、特色和優(yōu)勢 主要說明： 現(xiàn)階段已達(dá)到的主要技術(shù)指標(biāo)和經(jīng)濟(jì)指標(biāo)。 九、經(jīng)費(fèi)預(yù)算 項(xiàng)目總投資 800 萬元，申請科技三項(xiàng)經(jīng)費(fèi) 100 萬元，自籌440 萬元，銀行貸款 250 萬元，省科技經(jīng)費(fèi)撥款 10 萬元。被國家五部委（中華人民共和國科學(xué)技術(shù)部、國家稅務(wù)總局、中華人 民共和國商務(wù)部、中華人民共和國國家質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)檢疫總局、國家環(huán)境保護(hù)總局）認(rèn)定為 “ 國家重點(diǎn)新產(chǎn)品 ” ，獲 XX省科技進(jìn)步一等獎。 王加旺，博士，微生物專業(yè)，有 6篇論文在國家級刊物上發(fā)表，曾參加 il2（ 125ser）、 il18 的工作、 α 2b 干擾素 抗病毒口含片、新型溶栓酶等項(xiàng)目的研究開發(fā)，是本單位研究所課體組主要成員。 說明本項(xiàng)目推廣應(yīng)用計(jì)劃和保障措施 （ 1）本項(xiàng)目研制成功后，我單位自行生產(chǎn)。 24