【正文】 加 2 m ol /L N aCl 溶液 5 m L 加 2 m ol /L N aCl 溶液5 m L 2 不加 加粗提取 DNA 絲狀物并攪拌溶解 3 加 4 m L 二苯胺混勻 加 4 m L 二苯胺混勻 4 沸水浴 5 m in 沸水浴 5 m in 實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象 不變色 變藍(lán) 實(shí)驗(yàn)結(jié)論 DNA 在沸水浴情況下，遇二苯胺會(huì)變藍(lán)色 訓(xùn)練 3 某生物興 趣小組開展 DNA 粗提取的相關(guān)探究活動(dòng)，具體步驟如下： 材料處理：稱取新鮮的花菜、辣椒和蒜黃各 2 份，每份 10 g 。 ( 6 ) 為檢測(cè)人乳鐵蛋白是否成功表達(dá)，可采用 _ __( 填字母代號(hào) ) 技術(shù)。圖中t etR表示四環(huán)素抗性基因， a m pR表示氨芐青霉素抗性基因， B am H Ⅰ 、 H i n d Ⅲ 、 S ma Ⅰ 直線所示為三種限制酶的酶切位點(diǎn)。 解析 基因工程中獲得大量目的基因的技術(shù)為 P C R技術(shù)。 轉(zhuǎn)錄檢測(cè)：分子雜交技術(shù)， DNA和 mRNA之間，看 是否出現(xiàn)雜交帶 翻譯檢測(cè)：抗原 — 抗體雜交，看是否出現(xiàn)雜交帶 ②表達(dá)檢測(cè) 2 ． 基因工程的應(yīng)用 ( 1 ) 植物基因工程??????? 抗蟲轉(zhuǎn)基因植物 —— 減輕農(nóng)藥對(duì)環(huán)境 的污染抗病轉(zhuǎn)基因植物抗逆轉(zhuǎn)基因植物改良植物品質(zhì) ( 2 ) 動(dòng)物基因工程??????? 提高動(dòng)物生長速度改善畜產(chǎn)品的品質(zhì)用轉(zhuǎn)基因動(dòng)物生產(chǎn)藥物用轉(zhuǎn)基因動(dòng)物作器官移植的供體基因工程藥品的生產(chǎn) ( 3 ) 基因治療??????? 把正?；?qū)氩∪梭w內(nèi)，使該基因表達(dá)產(chǎn) 物發(fā)揮作用方法??? 體外基因治療體內(nèi)基因治療 訓(xùn)練 1 ( 2023常用的方法有反轉(zhuǎn)錄法和化學(xué)合成法。 c ．利用 P CR 技術(shù)擴(kuò)增目的基因 通過 P CR 技術(shù)可對(duì)已獲取的目的基因進(jìn)行擴(kuò)增，以獲取大量的目的基因。 福建卷， 32 ) 紅 細(xì)胞生成素 ( E P O ) 是體內(nèi)促 進(jìn)紅細(xì)胞生成的一種糖蛋白， 可用于治療腎衰性貧血等疾 病。 c D N A 是以 m R N A 為模板通過反轉(zhuǎn)錄獲得的。 據(jù)圖回答： ( 1 ) 圖中將人乳鐵蛋白基因插入載體，需用 限制酶同時(shí)酶切載體和人乳鐵蛋白基因。 A ．核酸分子雜交 B ．基因序列分析 C ．抗原－抗體雜交 D ． PC R 解析 (1) 基因表達(dá)載體的構(gòu)建過程中，將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞之前，要用同一種限制酶切割目的基因和載體。剪碎后分成兩組，一組置于 20 ℃ 、另一組置于－ 20 ℃ 條件下保存 24 h 。 ① 結(jié)論 1 ：與 20 ℃ 相比，相同實(shí)驗(yàn)材料在－ 20 ℃ 條件下保存， DNA 的提取量較多。 ( 3) 全能性表現(xiàn)與細(xì)胞種類有關(guān)：離體的植物體細(xì)胞的全能性在一定條件下可充分體現(xiàn)。 (2) 把試管苗轉(zhuǎn)接到新的培養(yǎng)基上時(shí)，需要在超凈工作臺(tái)上進(jìn)行，其原因是避免 ________ 的污染。離體的葉肉細(xì)胞在適宜條件下發(fā)育為完整植株體現(xiàn)了植物細(xì)胞的全能性，植物細(xì)胞具有全能性的原因是細(xì)胞內(nèi)含有調(diào)控植物生長發(fā)育的全部遺傳信息。 ( 2) 上述動(dòng)物細(xì)胞工程中涉及的技術(shù)有 。 (4) 重組細(xì)胞發(fā)育而來的犢牛不是與供體牛完全相同，因?yàn)橹亟M細(xì)胞的遺傳物質(zhì)主要來自供體細(xì)胞核，少量來自卵細(xì)胞質(zhì)，性狀還受環(huán)境影響。已知某傳染性疾病的病原體為 RNA 病毒，該病毒表面的A 蛋白為主要抗原，其疫苗生產(chǎn)和抗體制備的流程之一如下圖： 請(qǐng)回答： ( 1 ) 過程 ① 代表的是 _ _ _ _ _ _ _ _ 。 (4) 本題考查了免疫預(yù)防的操作過程，以及欲確診疑似患者而采取的方法。下圖為四種限制酶 B a m H Ⅰ 、 E c o R Ⅰ 、Hi n d Ⅲ 及 B g l Ⅱ 的辨識(shí)序列及每一種限制酶的特定切割部位。下列有關(guān)敘述不正確的是 ( ) 組別 實(shí)驗(yàn) 材料 提取核物 質(zhì)時(shí)加入 的溶液 去除雜質(zhì)時(shí)加 入的溶液 DNA 鑒定時(shí) 加入的試劑 甲 雞血 蒸餾水 95% 的酒精 (25 ℃ ) 二苯胺 乙 菜花 蒸餾水 95% 的酒精 ( 冷卻 ) 雙縮脲試劑 丙 豬血 蒸餾水 95% 的酒精 ( 冷卻 ) 二苯胺 丁 雞血 蒸餾水 95% 的酒精 ( 冷卻 ) 二苯胺 A ．實(shí)驗(yàn)材料選擇錯(cuò)誤的組別是丙 B ．沸水浴后試管中溶液顏色變藍(lán)的組別是甲、丁 C ．甲組實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象差的原因是 25 ℃ 的酒精對(duì) DNA的凝集效果差 D ．乙組實(shí)驗(yàn)不成功僅因?yàn)樵阼b定時(shí)加入了雙縮脲試 劑 解析 菜花有細(xì)胞壁，加入蒸餾水不破裂，須經(jīng)過研磨。單個(gè)漿細(xì)胞 ( 效應(yīng)B 細(xì)胞 ) 體外不能大量增殖，不能獲得大量單克隆抗體。 (2) 為了使某種植物具有抗旱性狀而又不引起植物產(chǎn)生冠癭瘤，需對(duì) Ti 質(zhì)粒進(jìn)行修飾，即祛除瘤基因，將抗旱基因轉(zhuǎn)移至 ，然后在一定條件下將外植體在含 的稀釋培養(yǎng)基上培養(yǎng)，此時(shí)修飾的 T DNA 轉(zhuǎn)入植物細(xì)胞并整合到植物基因組中。 答案 ( 1 ) 原核 復(fù)制 ( 2 ) T DNA 土壤農(nóng)桿菌 ( 3 ) 沒有分化的活的薄壁細(xì)胞團(tuán) ( 4 ) 表現(xiàn) ( 蛋白質(zhì) ) 自交 10 ． 科學(xué)家通過對(duì)鼠和人控制抗體產(chǎn)生的基因進(jìn)行拼接，實(shí)現(xiàn)了對(duì)鼠源雜交瘤抗體的改造，生產(chǎn)出對(duì)人體的不良反應(yīng)減少、效果更好的鼠 — 人嵌合抗體，用于癌癥治療。 (2) 動(dòng)物細(xì)胞融合可用滅活的病毒誘導(dǎo)。(4) 基因的拼接用到限制酶和 DNA 連接酶。請(qǐng)據(jù)圖回答： (1) 鼠源雜交瘤抗體就是從免疫小鼠的脾臟細(xì)胞中獲取 B 淋巴細(xì)胞，在誘導(dǎo)劑的作用下與 融合，形成 細(xì)胞，并通過體內(nèi)培養(yǎng)或體外培養(yǎng)生產(chǎn)單克隆抗體。 ( 4) 基因轉(zhuǎn)化是否成功應(yīng)對(duì)轉(zhuǎn)基因植物進(jìn)行鑒定，可以直接在 水平對(duì)轉(zhuǎn)基因植物與非轉(zhuǎn)基因植物進(jìn)行比較；為獲得純合的轉(zhuǎn)基因植株，還需要對(duì)轉(zhuǎn)基因植株進(jìn)行嚴(yán)格的 。 答案 D 二、雙項(xiàng)選擇題 7 ．以下有關(guān)蛋白質(zhì)工程的敘述，不正確的是 ( ) A ．蛋白質(zhì)工程發(fā)展的基礎(chǔ)是 細(xì)胞 工程 B ．蛋白質(zhì)工程的原理是從預(yù)期的蛋白質(zhì)功能出發(fā)最終找到脫氧核苷酸序列的過程 C ． T4溶菌酶中引入二硫鍵提高了它的熱穩(wěn)定性是蛋白質(zhì)工程應(yīng)用的體現(xiàn) D ．蛋白質(zhì)工程只能改造現(xiàn)有的蛋白質(zhì)而不能制造新的蛋白質(zhì)