1基因工程概論(完整版)
【正文】 因到另一種不同的生物細(xì)胞內(nèi)進(jìn)行繁殖 (3)無(wú)性擴(kuò)增 外源 DNA在寄主細(xì)胞內(nèi)可大量擴(kuò)增，和高水平表達(dá) （ gene engineering）相關(guān)的概念： 基因操作（ gene manipulation）， 重組 DNA技術(shù)（ rebinant DNA technique）， 基因克隆（ gene cloning）， 分子克?。?molecular cloning） 4. Clone(名詞 )：是指從一個(gè)共同祖先無(wú)性繁殖下來(lái)的一群遺傳上同一的 DNA分子細(xì)胞或個(gè)體所組成的特殊的生命群體 Clone(動(dòng)詞 )：是產(chǎn)生一個(gè)遺傳上同一的 DNA分子細(xì)胞或個(gè)體所組成的特殊的生命群體的過(guò)程 (1)目的基因的獲取 從復(fù)雜的生物基因組中，經(jīng)過(guò)酶切消化或 PCR擴(kuò)增等步驟，分離出帶有 目的基因 的 DNA片斷 (2)重組體的制備 將目的基因的 DNA片斷插入到能 自我復(fù)制 并帶有 選擇性標(biāo)記 （抗菌素抗性）的 載體 分子上 (3)重組體的轉(zhuǎn)化 將重組體（載體） 轉(zhuǎn)入 適當(dāng)?shù)氖荏w細(xì)胞中 (4)克隆鑒定 挑選 轉(zhuǎn)化成功的細(xì)胞克?。ê心康幕颍? (5)目的基因表達(dá) 使導(dǎo)入寄主細(xì)胞的目的基因表達(dá)出我們所需要的基因產(chǎn)物 第五節(jié) 基因工程的安全性 一. 1996年美國(guó)國(guó)立衛(wèi)生研究院公布了 “ 重組 DNA研究準(zhǔn)則 ” 在實(shí)驗(yàn)室安全防護(hù)方面，明確規(guī)定了物理防護(hù)和生物防護(hù)兩個(gè)方面的統(tǒng)一標(biāo)準(zhǔn)。 1953年 James D. Watson和 Francis H. C. Crick揭示了 DNA分子的雙螺旋結(jié)構(gòu)和半保留復(fù)制機(jī)制。 三 .提出了 “ 中心法則 ” 和操縱子學(xué)說(shuō)，并成功地破譯了遺傳密碼，從而闡明了遺傳信息的流向和表達(dá)問(wèn)題 1958年 Crick又提出了遺傳信息傳遞的 “ 中心法則 ” 1964年 Marshall Nirenberg和 Gobind Khorana等終于破譯了 64個(gè)遺傳密碼 1961年提出 了 操縱子學(xué)說(shuō) 第二節(jié) 基因工程誕生的技術(shù)基礎(chǔ) 一. DNA分子的體外切割與連接 （ restriction enzymes） Werner Arber 理論預(yù)見(jiàn)限制酶 1968年 . Smith等分離出第一種限制性核酸內(nèi)切酶 Daniel Nathans 用限制酶切得 SV40 DNA片斷 3人于 1978年獲得 Nobel生理或醫(yī)學(xué)獎(jiǎng) 2. DNA連接酶（ ligase） 一. 1967年 5個(gè)實(shí)驗(yàn)室?guī)缀跬瑫r(shí)發(fā)現(xiàn)了 DNA連接酶 二 . DNA分子的核苷酸序列分析 1975年 F. Sanger、 A. Maxam和 W. Gilbert發(fā)明了 DNA快速測(cè)序技術(shù) , 1980年 Nobel化學(xué)獎(jiǎng) 三 .載體的構(gòu)建 1972年前后使用小分子量的細(xì)菌 質(zhì)粒 和 ?噬菌體 作載體。物理防護(hù)為 P1—— P4四個(gè)等級(jí)，生物防護(hù)則分為 EK1—— EK3三個(gè)不同的等級(jí) P1—— P4是關(guān)于基因工程實(shí)驗(yàn)室物理安全防護(hù)上的裝備規(guī)定 。 二 . 實(shí)驗(yàn)操作的安全性 注意有毒生物對(duì)人的危害！?。?！ 注意有毒試劑對(duì)人的危害?。。?！ 三 . 基因工程產(chǎn)物或產(chǎn)品的安全性 1. 轉(zhuǎn)基因作物對(duì)生態(tài)環(huán)境可能的影響，如產(chǎn)生超級(jí)雜草 具有除草劑耐性因子的轉(zhuǎn)基因作物的遺傳因子可能通過(guò)授粉和種子遷移傳播給野生植物。 基于上述諸多方面的異議，轉(zhuǎn)基因食品的安全性問(wèn)題的研究成為轉(zhuǎn)基因技術(shù)研究的一個(gè)熱點(diǎn)。 （ 2）轉(zhuǎn)基因食品的食用安全性 轉(zhuǎn)基因食品與相應(yīng)的傳統(tǒng)食品相比，至少存在以下兩個(gè)不同點(diǎn)：一是轉(zhuǎn)基因食品中含有利用轉(zhuǎn)基因技術(shù)導(dǎo)入的外源基因，而傳統(tǒng)的食品中不含有；二是由于外源基因的表達(dá)使轉(zhuǎn)基因食品中含有了特定的外源基因表達(dá)產(chǎn)物 (相應(yīng)的蛋白質(zhì)）。對(duì)外源基因的次生效應(yīng)可能對(duì)轉(zhuǎn)基因食品食用安全性產(chǎn)生的影響，一般采用“實(shí)質(zhì)等
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