16基因工程和蛋白質(zhì)工程(完整版)
【正文】 在低溫條件下用氯化鈣處理，形成 “感受態(tài) ”細(xì)胞。如若質(zhì)粒 DNA存在著與 mRNA探針互補(bǔ)的序列， mRNA就會取代 DNA中一條鏈，與另一條鏈形成雙鏈雜交分子，從而形成 R環(huán)結(jié)構(gòu)，在電子顯微鏡下觀察，可直接觀察到 R環(huán)。一半的順序中含有 TCT順序，另一半含有 TGT順序。 第三節(jié) 蛋白質(zhì)工程 一、 蛋白質(zhì)工程的概念 二、 蛋白質(zhì)工程的一般技術(shù) 三、 蛋白質(zhì)工程的應(yīng)用 一、蛋白質(zhì)工程的概念 蛋白質(zhì)工程 (protein engineering)： 通過改造與蛋白質(zhì)相應(yīng)的基因中的堿基順序，或設(shè)計(jì)合成新的基因，將它克隆至受體細(xì)胞中，通過基因表達(dá)而獲得具有新的特性的蛋白質(zhì)技術(shù) 基因定點(diǎn)突變 ——定做新蛋白質(zhì) 蛋白質(zhì)設(shè)計(jì) ——對天然蛋白質(zhì)的修飾 蛋白質(zhì)工程 舉例： 定點(diǎn)突變技術(shù)： 已知絲氨酸是由 TCT編碼，只要把 C改為 G， 就變成半胱氨酸的密碼 TGT。細(xì)菌不用預(yù)先處理。 目前所使用的質(zhì)粒 目前實(shí)驗(yàn)中所使用的質(zhì)粒、噬菌體和病毒載體種類很多。如 HaeII是從（ Haemophilus aegypticus） 中提取的，并且是從中發(fā)現(xiàn)的第二個酶 。 ? 人生長激素 、 表皮生長因子 、 腫瘤壞死因子 、a干擾素 、 纖維素酶 、 抗血友病因子 、 紅細(xì)胞生成素 、 尿激酶原 、 白細(xì)胞介素 集落刺激因子 、 乙肝疫苗等等 ? 畜牧業(yè)中的應(yīng)用 ? 動物疫苗 、 生長激素等 ? 例： 從轉(zhuǎn)基因羊的羊奶中提取出治療心臟病的藥物 tPA（ 組織溶解酶原激活劑 ） 。 細(xì)胞工程 操作水平：細(xì)胞整體水平或細(xì)胞器水平 目的：定向改變遺傳物質(zhì)或獲得細(xì)胞產(chǎn)品。 基因工程的理論基礎(chǔ) 1）物質(zhì)基礎(chǔ) —— 脫氧核苷酸 2）結(jié)構(gòu)基礎(chǔ) —— 規(guī)則的雙螺旋結(jié)構(gòu) 3）中心法則，共用一套遺傳密碼 細(xì)胞工程 細(xì)胞工程的概念 利用細(xì)胞融合技術(shù)把含有不同遺傳物質(zhì)的細(xì)胞合成雜種細(xì)胞。 酶工程用于食品工業(yè)很有效。 限制性內(nèi)切酶的命名 用細(xì)菌同名的第一個字母（大寫）和種名的前兩個字母（小寫）構(gòu)成酶的基本名稱。轉(zhuǎn)入的質(zhì)粒 DNA仍能進(jìn)行復(fù)制，這種性能為 DNA重組技術(shù)提供了重要的條件，即將一種外源基因與質(zhì)粒重組后，再轉(zhuǎn)入細(xì)菌中去復(fù)制繁殖，使外源基因得以增殖。即增加細(xì)胞膜的通透性才能實(shí)現(xiàn)轉(zhuǎn)化。這樣可檢出重組體質(zhì)粒 DNA。表達(dá)具有 TGT順序的質(zhì)粒，即可以產(chǎn)生在同一部位上半胱氨酸代替絲氨酸的蛋白質(zhì)。 Southern和 Western印跡法 DNA frangment Electrophoresis Transfer of DNA b
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