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基因工程體外重組(帶動畫)(完整版)

2025-01-31 17:51上一頁面

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【正文】 引物 1 GCAGAATTC 互補序列 模板 EcoRI位點 5’ 3’ GCAGAATTC 互補序列 5’ 3’ 3’ 模板 GCAGAATTC 互補序列 PCR產(chǎn)物 5’ 3’ 3’ 復(fù)性 延伸 模板 模板 3’ 生命科學(xué)學(xué)院 第一節(jié) DNA的體外重組 GCTAGCCGG 互補序列 模板 BamH I 位點 5’ 3’ 復(fù)性 延伸 模板 模板 3’ 3’ GCTAGCCGG 互補序列 3’ 模板 GCTAGCCGG PCR產(chǎn)物 互補序列 引物 2 3’ 3’ 生命科學(xué)學(xué)院 第一節(jié) DNA的體外重組 BamH I EcoRI BamH I EcoRI 對載體酶切 BamH I EcoRI 質(zhì)粒載體的定向重組 PCR 生命科學(xué)學(xué)院 第一節(jié) DNA的體外重組 ( 2) 與 T載體直接連接 Taq DNA聚合酶 的特性:在 DNA雙鏈的 3’端再加上一個多余的核苷酸(優(yōu)先加 A) ,因此 PCR產(chǎn)物兩個 3’端一般都有一個 A T載體的兩個 3’端人為地各加一個 T:利用 Taq DNA聚合酶,當(dāng)原料中只有 dTTP時,被迫在 平端載體上添加 T! Taq DNA聚合酶 生命科學(xué)學(xué)院 第一節(jié) DNA的體外重組 T載體圖 生命科學(xué)學(xué)院 第一節(jié) DNA的體外重組 A A dNTP T T dTTP Taq DNA聚合酶 載體 PCR產(chǎn)物 T A T A 3. PCR產(chǎn)物的連接 ( 2) 與 T載體直接連接 生命科學(xué)學(xué)院 生命科學(xué)學(xué)院 生命科學(xué)學(xué)院 1. 粘性末端連接 ( 1)兩端具有相同粘末端的 DNA分
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