雜交中稻廣兩優(yōu)476品種與純度的鑒定(完整版)
【正文】 ａ的快速提取方法［ｊ］．植物檢疫，２００４，１８（６）：３３０－３３２．［８］ 王偉威，孟慶虹，張瑞英，等． ５種主要農(nóng)作物ｄｎａ快速提取方法研究［ｊ］．黑龍江農(nóng)業(yè)科學(xué)，２００８（５）：１－２．［９］ 陳 罡，鐘 鳴，徐正進(jìn)，等． 一種水稻幼苗單株ｄｎａ的快速提取及ｐａｇｅ銀染改良法［ｊ］．生物技術(shù)通訊，２００６，１７（２）：２１３－２１５．［１０］ 李穩(wěn)香，詹慶才． 雜交水稻種子純度ｓｓｒ指紋圖譜標(biāo)記鑒定技術(shù)研究［ｊ］．中國種業(yè)，２００６（３）：２１－２２．［１１］ 彭鎖堂，嚴(yán)啟傳，王學(xué)德，等． 水稻單粒種子ｄｎａ提取及ｒａｐｄ 程序優(yōu)化研究［ｊ］． 上海交通大學(xué)學(xué)報(bào)（農(nóng)業(yè)科學(xué)版）， ２００２， ２０（１）：３４－３７．［１２］ 蘇順宗，黃玉碧，楊俊品，等．利用ｓｓｒ鑒定水稻雜交種子純度的研究［ｊ］．種子，２００３（１）：２３－２５．。此外，張鳳娟等［７］，王偉威等［８］和陳罡等［９］對植物ｄｎａ的快速提取方法進(jìn)行了改進(jìn)和優(yōu)化，相對傳統(tǒng)ｃｔａｂ法而言，雖然提取的ｄｎａ質(zhì)量有所下降，但提取時(shí)間大大縮短，由數(shù)十小時(shí)縮短為僅２．５ ｍｉｎ，且不影響與多態(tài)性引物的結(jié)合及擴(kuò)增［１０］。該方法的好處在于不需要大批量篩選引物，減少了工作量。其中ｒｍ２０９的引物擴(kuò)增出的雜種片段較為清晰，親本兩條帶型較為明顯，可適用于實(shí)際雜交種純度的檢測和鑒定（圖３）。銀染顯色參照ｓａｎｇｕｉｎｅｔｔｉ等［６］的方法略作改進(jìn)，方法如下：凝膠經(jīng)去離子水漂洗２次后在１ g/l ａｇｎｏ３中染色５～１０ ｍｉｎ，去離子水漂洗２次后，在15 g/l ｎａｏｈ＋5 ml/l甲醛中顯色，最后用去離子水漂洗１次。含抗白葉枯病基因ｘａ２１品系ｉｒｂｂ２１來自國際水稻研究所，抗褐飛虱基因ｂｐｈ１４和ｂｐｈ１５品系ｂ５由武漢大學(xué)何光存教授提供，其他材料來自湖北省農(nóng)業(yè)科學(xué)院糧食作物研究所分子育種課題組。關(guān)鍵詞：ｓｓｒ標(biāo)記；雜交水稻；廣兩優(yōu)４７６；品種鑒定；純度鑒定the variety and purity indentification of hybrid rice guangliangyou 476ｄｕ ｘｕｅ－ｓｈｕ，ｑｉ ｈｕａ－ｘｉｏｎｇ，ｘｉａ ｍｉｎｇ－ｙｕａｎ（ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ ｏｆ ｆｏｏｄ ｃｒｏｐｓ， ｈｕｂｅｉ ａｃａｄｅｍｙ ｏｆ ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ ｓｃｉｅｎｃｅｓ，ｗｕｈａｎ ４３００６４，ｃｈｉｎａ）ａｂｓｔｒａｃｔ： ２４ ｓｓｒ ｍａｒｋｅｒｓ ｒｅｃｏｍｍｅｎｄｅｄ ｂｙ ｃｈｉｎａ ｎａｔｉｏｎａｌ ｒｉｃｅ ｒｅｓｅａｒｃｈ ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ ｗｅｒｅ ｓｃｒｅｅｎｅｄ； ａｎｄ ｔｈｅ ｍａｒｋｅｒｓ ｓｈｏｗｉｎｇ ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍ ａｍｏｎｇ ｈｙｂｒｉｄ ｒｉｃｅ
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