【正文】 差（RSD）評價標準添加濃度（mg/kg）平均回收率（70%）添加濃度（mg/kg）平均回收率（70%）170110110701101570110206012030≤50120≤35結(jié)果計算和表達v 殘留量應為農(nóng)藥母體及其有毒代謝物，降解物的總和，以mg/kg表示。（測定時校正干土殘留量）不能過篩的去掉植物殘枝和石礫后保存。田間試驗的處理和小區(qū)設(shè)計處理數(shù)量：原則上一個施藥劑量、一個施藥次數(shù)和一個采收間隔期為試驗的一個處理。施藥時間：以農(nóng)作物的收獲期進行倒推設(shè)計?！褚坏兀毫裆彙喡樽?、可可、咖啡、調(diào)味品類、香草類等。安全間隔期：經(jīng)殘留試驗確證的試驗農(nóng)藥實際使用時采收距最后一次施藥的間隔天數(shù)。v 檢測環(huán)境介質(zhì)和生態(tài)系生物構(gòu)成的農(nóng)藥殘留種類和水平，以了解環(huán)境質(zhì)量和評價生態(tài)系統(tǒng)的安全性。我國農(nóng)藥殘留法規(guī)與管理v 1982年4月，《農(nóng)藥登記規(guī)定》。 四、農(nóng)藥殘留檢測與監(jiān)控 農(nóng)藥殘留超標是農(nóng)產(chǎn)品污染的主要問題 1 農(nóng)藥與食品安全問題的對策v 加快立法步驟，加強科學管理。v 隨大氣沉降、灌溉水和動植物殘體進入土壤。 1. 體表直接吸收：藻類植物、原生動物、微生物 2. 根系吸收：高等植物 3. 食物鏈：大多數(shù)動物 藻類：500 魚、貝殼：2000 水鳥：10萬 三、農(nóng)藥殘留與生態(tài)、食品安全1 生態(tài)系統(tǒng)：是自然界一定空間的生物與環(huán)境之間相互作用、相互制約、不斷演變，達到動態(tài)平衡、相對穩(wěn)定的統(tǒng)一整體。2 農(nóng)藥分類（按作用方式分）： v 殺蟲劑： 有機氯，有機磷，氨基甲酸酯，擬除蟲菊酯，沙蠶毒素類v 殺菌劑： 保護性殺菌劑、治療性殺菌劑、鏟除性殺菌劑v 除草劑： 輸導型、觸殺型、選擇性、滅生性3 農(nóng)藥殘留 由于農(nóng)藥的應用而殘存于生物體、農(nóng)產(chǎn)品和環(huán)境中的農(nóng)藥親體及其具有毒理學意義的雜質(zhì)、代謝產(chǎn)物和反應物等所有衍生物的總稱。 v 分解：農(nóng)藥在環(huán)境中可以通過多種方式降解。v 農(nóng)藥配制、加工生產(chǎn)運輸、農(nóng)作物廢棄燃燒、倉庫、車船熏蒸后的通風排放、糧食保存、纖維防蛀等也可在一定時期內(nèi)造成高濃度的大氣污染。v 施用農(nóng)藥的同時或施用后對大氣、水體的污染造成動植物體內(nèi)含有農(nóng)藥殘留，間接污染食品。v 每日允許攝入量（ADI，acceptable daily intake）是根據(jù)對一種化合物已有數(shù)據(jù)的評價，消費者一生之中每天攝入這種化合物不會對身體健康造成可見風險的量（用mg/kg體重來表示）?！r(nóng)藥毒性試驗和農(nóng)藥殘留試驗結(jié)果v 生態(tài)安全評價：評價登記產(chǎn)品在推薦使用條件下對環(huán)境生物的毒害風險。v 試驗報告的撰寫3術(shù)語和定義農(nóng)藥殘留：使用農(nóng)藥后，殘存于農(nóng)產(chǎn)品及環(huán)境中的農(nóng)藥活性成份及其在性質(zhì)上和數(shù)量上有毒理學意義的代謝（或降解、轉(zhuǎn)化）產(chǎn)物。正確的田間試驗設(shè)計是整個殘留試驗成功的關(guān)鍵所在。采收間隔期：以作物農(nóng)產(chǎn)品的收獲時期作為樣品采收時期，根據(jù)防治情況和推薦采收間隔期確定試驗采收間隔。采樣間隔和次數(shù)：一般采用一次施藥多次采樣的方法進行。個體較小的樣品（如麥粒和小粒水果）用四分法進行縮分；谷物等樣品先粉碎，全部過20目篩，最后取100200克樣品保存待測。田間試驗的記錄：試驗記錄應及時、清晰、詳細、準確。eKT C為時間T時的農(nóng)藥殘留量（mg/kg） C0為施藥后原始沉積量（mg/kg） K為消解系數(shù) T為施藥后時間（天） 半衰期: T(1/2)=ln2/k檢測記錄標準樣品購買、使用記錄試劑、玻璃器皿、氣源購買、使用記錄天平使用、維護記錄氣相、液相等儀器使用、維護記錄標準溶液配制記錄方法摸索前處理記錄樣品檢測記錄、數(shù)據(jù)處理記錄6 試驗報告的撰寫v 農(nóng)藥殘留試驗報告的組成 封面 目錄 正文（前言、田間試驗、檢測方法、殘留試驗結(jié)果、結(jié)論與合理使用建議） 圖表（表格、曲線圖、譜圖）農(nóng)藥殘留試驗報告的總體要求v 農(nóng)藥殘留試驗報告的用途 農(nóng)藥生產(chǎn)企業(yè)申請農(nóng)藥殘留登記提交材料 制定農(nóng)藥合理使用準則的依據(jù) 制定農(nóng)藥殘留限量標準的依據(jù)v 農(nóng)藥殘留試驗報告的基本原則——真實、明確、規(guī)范 真實——科學的試驗設(shè)計、嚴謹?shù)脑囼灢僮?、真實的檢測數(shù)據(jù)。（衍生化） 4）延長儀器的使用壽命。提取原則：根據(jù)農(nóng)藥理化性質(zhì)按“相似相溶”原理進行。組織搗碎法v 組織搗碎法也是一種常用的方法。吹掃捕集法v 主要用于水樣中揮發(fā)性有機物的分析。2 凈化技術(shù) 凈化（cleanup）是指通過物理的或化學的方法除去提取物中對測定有干擾作用的雜質(zhì)的過程。加入5%~10%重量的水，混勻，放置過夜。v 原理是利用旋轉(zhuǎn)濃縮瓶對濃縮液起攪拌作用，并在瓶壁上形成液膜，擴大蒸發(fā)面積，同時又通過減壓，使溶劑的沸點降低，從而達到高效率濃縮目的。如硅膠、弗羅里硅土、氧化鋁、氨基等。v 洗去干擾雜質(zhì)：選擇合適的淋洗溶劑將干擾雜質(zhì)先淋洗出小柱，農(nóng)藥保留在小柱中。v 其固相是一支覆蓋著一層高聚物固定相（聚丙烯酸酯）的熔融石英纖維。SPME的優(yōu)缺點 操作時間短(一般只需15min，是液液萃取的30%) 操作簡便 無需萃取溶劑 所需樣品量少 適用范圍廣泛 缺點：石英纖維非常脆弱，易折斷，重復性較差。v 溶劑的選擇：所選用的溶劑應該對目標物有良好的溶解度，并對凝膠有一定的膨脹力。v 流程：將樣品放入萃取池； 設(shè)定程序，自動進行。 CO2的優(yōu)點：密度大，溶解能力強，傳質(zhì)速率高，壓力適中，臨界溫度31℃，便宜易得，無毒，惰性以及極易從提取產(chǎn)物中分離出來等優(yōu)點，當前絕大部分超臨界流體提取都是以它為溶劑。 ? 集提取、濃縮、凈化（分析）為一體。 （儀器未穩(wěn)定造成）最小檢出量：產(chǎn)生3倍噪音信號時 組分的量。半高峰寬（W1/2)：峰高的中點作平行于峰底的直線，此直線與峰兩側(cè)相交兩點之間的距離。K=Cs/Cm，是由組分和固定相的熱力學性質(zhì)決定的，它是每一組分的特征值，只隨柱溫和柱壓變化。n 所有組分開始時都集中于0號板上，而且組分的縱向擴散可忽略?？梢娫谔畛渲?，填料粒度越小越有利。n 進樣系統(tǒng)：進樣器和氣化室n 柱系統(tǒng)：色譜柱和恒溫箱n 檢測系統(tǒng)：檢測器、恒溫室和放大器n 記錄和數(shù)據(jù)處理系統(tǒng) 幾種高檔GC儀器的配置儀器型號廠商氣路系統(tǒng)進樣系統(tǒng)檢測系統(tǒng)控制及數(shù)據(jù)處理 Agilent6890 美國安捷倫 電子氣路控制(EPC)也可選擇手動控制可同時配置兩個進樣口 可同時配置兩個檢測器 可全部由工作站控制，也可用積分儀控制；主機有控制鍵盤。需插入石英玻璃襯管n 隔墊吹掃功能（3ml/min）常見GC進樣口及其選擇： 常見GC進樣口和進樣技術(shù)：n 填充柱進樣口：最簡單的進樣口，所有汽化的樣品均進入色譜柱，可接玻璃和不銹鋼填充柱，也可接大口徑毛細管柱進行直接進樣。n 頂空進樣：只取復雜樣品基體上方的氣體部分進行分析，適合于環(huán)境分析、食品分析及固體材料中的可揮發(fā)物分析等。 襯管能起到保護色譜柱的作用，注意及時清洗和更換。將石墨墊套在柱頭后，應將柱頭截去1~2cm。檢測系統(tǒng)n 檢測器是測量柱后流出物質(zhì)成分和濃度變化的裝置，通過化學和物理作用，將流出物質(zhì)成分和濃度的變化轉(zhuǎn)換為電信號。正離子及電子在電場作用下向收集電極和發(fā)射電極做定向移動從而形成微電流，經(jīng)放大后記錄下色譜峰。無樣品時，氣化的銣原子與火焰中的各種基團反應生成Rb+，被負極的銣珠吸引返回表面，中和后又再次揮發(fā)；而火焰中產(chǎn)生的各種基團獲得電子成為負離子，負離子與電子被正極的收集極吸引和收集，形成本底基流。樣品中的濃度= 樣品的峰面積（峰高） 標準樣品的峰面積（峰高） 標準樣品的濃度 標準曲線法：以標準樣品作濃度與峰值關(guān)系圖，然后根據(jù)測得的待測樣品峰值從峰值濃度關(guān)系曲線圖查濃度。n 貯液器：玻璃或聚四氟乙烯襯里的塑料容器，~2L。n 梯度洗脫裝置： 梯度洗脫就是將兩種或兩種以上的不同極性的容易進行混合，作為流動相使用。 ，長20~25cm，填料粒度通常為3~10181。 屬于非破壞性檢測器，可用于制備色譜或與其他檢測器聯(lián)用， 結(jié)構(gòu)簡單，操作方便，便于維修。n 使用注意事項： 日常分析結(jié)束后，要用甲醇或乙腈清洗色譜柱和檢測室20min以上。 在相對條件下，物質(zhì)的熒光強度與該物質(zhì)溶液的濃度成正比（定量依據(jù)）。蒸發(fā)光散射檢測器蒸發(fā)光散射檢測器（evaporative lightscatter detector,ELSD）標志著高效液相色譜儀高靈敏度、通用型質(zhì)量檢測器的誕生。n 檢測靈敏度隨蒸發(fā)器溫度升高而加大。色譜柱的日常維護：n 每次開機時，流量要逐漸增強或降低，避免突然增壓或降壓，使柱床受到?jīng)_擊，產(chǎn)生空隙。 質(zhì)量分析器（Mass analyzer）：質(zhì)譜儀器中使離子按其質(zhì)荷比大小進行分離的部件。 靈敏度（Sensitivity）：在規(guī)定條件下，對選定化合物產(chǎn)生的某一質(zhì)譜峰，儀器對單位樣品所產(chǎn)生的響應值。 分子離子（M+）：分子失去一個電子生成的離子。 影響靈敏度的因素 ：其他條件相同時，靈敏度與分辨率成反比。v 進樣系統(tǒng)： 作用是將待測物質(zhì)送進離子源。EI源的優(yōu)缺點： 優(yōu)點：非選擇性電離；離子化效率高；靈敏度高；提供豐富的結(jié)構(gòu)信息；有龐大的標準譜庫供檢索。v 質(zhì)量分析器（mass analyzer） 是質(zhì)譜儀的離子分離系統(tǒng)。三重四極質(zhì)量分析器（trip quadrupole，Q） 是由三組四極串接起來的質(zhì)量分析器，第一組和第三組是質(zhì)量分析器，中間一組時碰撞活化室。 離子束被高壓加速以脈沖方式推出離子源進入飛行管，“自由漂移”到達檢測器。 機械泵作為前級泵，真空度達102Torr以下。 v GCMS的定性定量分析 定性：保留時間 標準譜庫（分子離子峰和碎片離子） 定量：特征離子峰面積+ 2~3個定性離子3 液相色譜質(zhì)譜（LCMS）聯(lián)用技術(shù)v LC/MS聯(lián)用的主要困難HPLCMS高壓液相操作；液體進入離子源轉(zhuǎn)變成大量氣體；質(zhì)量范圍無限制；常常使用無機鹽緩沖劑。2 氣相色譜質(zhì)譜（GCMS）聯(lián)用技術(shù)v GC與MS聯(lián)用的有利條件： GC分離與MS分析過程都是在氣態(tài)下進行的； GC分析的化合物沸點范圍適于MS分析； GC分離的組分足夠MS檢測。 缺點：價格高，主要用于生物質(zhì)譜領(lǐng)域v 離子檢測器 離子檢測器的功能是接收由質(zhì)量分析器分離的離子，進行離子記數(shù)并轉(zhuǎn)換成電壓信號放大輸出，再經(jīng)計算機采集和處理，最終得到按不同m/z排列和對應離子豐度的質(zhì)譜圖。離子阱質(zhì)量分析器（ion trap） 由一個具有雙曲線表面中心環(huán)形電極和上下2個端電極間構(gòu)成一個三維四極場。 常用的有： 四極桿質(zhì)量分析器 離子阱質(zhì)量分析器 飛行時間質(zhì)量分析器 扇形磁場分析器 特性：1. 根據(jù)離子在不同場的運動規(guī)律實現(xiàn)質(zhì)量分離2. 只檢測帶電粒子，測定的是離子的質(zhì)荷比3. 只檢測氣相離子，必須在真空狀態(tài)下工作?；瘜W電離（Chemical Impact，CI）源：CI源結(jié)構(gòu)與EI源相似，主要區(qū)別時氣密性較好。 間接進樣：經(jīng)GC或HPLC分離后進到離子源內(nèi)。 三重四極質(zhì)譜的多反應選擇檢測（MRM）比單四極質(zhì)譜的SIM的靈敏度高。2. 分辨率 分為高分辨和低分辨，取決于質(zhì)量分析器。 總離子流圖（Total ions current, TIC）：在選定的質(zhì)量范圍內(nèi)，所有離子強度的總和對時間或掃描次數(shù)所做的圖。 全掃描離子檢測（Full scan）：對在離子源室產(chǎn)生的在記錄檻值以上的離子檢測的一種方式，適用于定性分析。n 每次實驗結(jié)束后，反相色譜操作方式要用純甲醇或乙腈沖洗色譜柱20min以上才能關(guān)機。工作時必需備有氮氣發(fā)生器，空氣壓縮機等供氣源，且必須在裝有排風設(shè)備的屋內(nèi)使用液相色譜常用檢測器性能比較規(guī)格紫外(UV)熒光(FLD)電化學(ECh)蒸發(fā)光散射（ELSD)類型梯度洗脫線性范圍最小檢出量(g)對流速敏感性對溫度敏感性信號單位專用能1041011無低吸光度，A專用能1051014無低熒光度通用不能105108有2%電導率，181。在一定的角度測得的光散射強度與煙霧粒子大小和數(shù)量成正比。n 使用注意事項： 流通池容易被污染，必要時可以用鉻酸洗液浸泡過夜。二極管陣列檢測器 二極管陣列檢測器(diode array detector,DAD) 可以獲得吸光度、時間、波長的三維光譜色譜圖。 A=εbc A為吸光度；ε為樣品的摩爾吸光系數(shù)；b為光程長；c為樣品的濃度?？蓪崿F(xiàn)取樣、進樣兩個目的。m的不銹鋼質(zhì)或鋁質(zhì)或聚四氟乙烯的過濾頭。內(nèi)標法：在試樣中加入能與所有組分完全分離的已知量的內(nèi)標物質(zhì)，用校正因子校正待測組分的峰值，并與內(nèi)標物質(zhì)的峰值進行比較，求出待測組分含量的方法。n 影響靈敏度的因素：