【正文】 果蛋白質(zhì)含有一條以上的肽鏈，則需先拆開成單個(gè)肽鏈再按上述原則確定其一級(jí)結(jié)構(gòu)。（3）水解液中有在濃H2SO4條件下能與乙醛酸反應(yīng)產(chǎn)生紫紅色產(chǎn)物的氨基酸，說(shuō)明此氨基酸為Trp。（4）溴化氰處理得 Ala，Arg，高絲氨酸內(nèi)酯，Thr，2Val，和 Leu，Phe，當(dāng)用Sanger試劑處理時(shí)，分別得DNPAla和DNPLeu。（5）在甲硫氨酸殘基羧基側(cè)水解肽鍵。（2）不可逆沉淀：蛋白質(zhì)分子內(nèi)部結(jié)構(gòu)發(fā)生重大改變，蛋白質(zhì)變性而沉淀，不再能溶于原溶劑。4．何謂蛋白質(zhì)的變性與沉淀？二者在本質(zhì)上有何區(qū)別？解答：蛋白質(zhì)變性的概念：天然蛋白質(zhì)受物理或化學(xué)因素的影響后，使其失去原有的生物活性，并伴隨著物理化學(xué)性質(zhì)的改變，這種作用稱為蛋白質(zhì)的變性。② 還原法：肽鏈C端氨基酸可用硼氫化鋰還原成相應(yīng)的α―氨基醇。② 丹磺酰氯(DNS)法：多肽或蛋白質(zhì)的游離末端氨基與與丹磺酰氯（DNS―Cl）反應(yīng)生成DNS―多肽或DNS―蛋白質(zhì)。由于DNS與氨基形成的鍵對(duì)酸水解遠(yuǎn)比肽鍵穩(wěn)定，因此DNS―多肽經(jīng)酸水解后，只有N―末端氨基酸為強(qiáng)烈的熒光物質(zhì)DNS―氨基酸，其余的都是游離氨基酸。肽鏈完全水解后，代表原來(lái)C―末端氨基酸的α―氨基醇，可用層析法加以鑒別。變性的本質(zhì)：分子中各種次級(jí)鍵斷裂，使其空間構(gòu)象從緊密有序的狀態(tài)變成松散無(wú)序的狀態(tài)，一級(jí)結(jié)構(gòu)不破壞。如加熱引起蛋白質(zhì)沉淀，與重金屬或某些酸類的反應(yīng)都屬于此類。（6）在賴氨酸和精氨酸殘基側(cè)水解肽鍵。解答：由（2）推出N末端為Ala；由（3）推出Val位于N端第四，Arg為第三，而Thr為第二；溴化氰裂解，得出N端第六位是Met，由于第七位是Leu，所以Phe為第八；由（4），第五為Val。說(shuō)明C端為Gly－Trp…（4）根據(jù)胰蛋白酶的專一性，得知N端片段為Val－Arg（Lys）…，以（1）、（2）、（3）結(jié)果可知道四肽的順序：N－Val－Arg（Lys）－Trp－Gly－C。如是含二硫鍵的蛋白質(zhì)，也必須在測(cè)定其氨基酸排列順序前，拆開二硫鍵，使肽鏈分開，并確定二硫鍵的位置。,3162。解答： ① [T] + [C] = 1–– = ；② [T] = ，[C] = ，[A] + [G] = 。9．為什么自然界的超螺旋DNA多為負(fù)超螺旋？解答：環(huán)狀DNA自身雙螺旋的過(guò)度旋轉(zhuǎn)或旋轉(zhuǎn)不足都會(huì)導(dǎo)致超螺旋，這是因?yàn)槌菪龑⑹狗肿幽軌蜥尫庞捎谧陨硇D(zhuǎn)帶來(lái)的應(yīng)力。④ 真核生物中為蛋白質(zhì)編碼的大多數(shù)基因都含有內(nèi)含子(有斷裂基因)；原核生物中不含內(nèi)含子。引起DNA變性的因素很多，如高溫、超聲波、強(qiáng)酸、強(qiáng)堿、有機(jī)溶劑和某些化學(xué)試劑（如尿素，酰胺)等都能引起變性。,(1SSC)中，經(jīng)驗(yàn)公式為：（G+C）% =（Tm ） 。④ 變性劑。④ 單鏈片段的復(fù)雜度，在片段大小相似的情況下，片段內(nèi)重復(fù)序列的重復(fù)次數(shù)越多，或者說(shuō)復(fù)雜度越小，越容易形成互補(bǔ)區(qū)，復(fù)性的速度就越快。雜交技術(shù)較廣泛的應(yīng)用是將樣品DNA切割成大小不等的片段，經(jīng)凝膠電泳分離后，用雜交技術(shù)尋找與探針互補(bǔ)的DNA片段。16．概述核酸序列測(cè)定的方法和應(yīng)用領(lǐng)域。用同位素或熒光物質(zhì)標(biāo)記這4套新合成的鏈，在凝膠中置于4個(gè)泳道中電泳，檢測(cè)這4套片段的位置，即可直接讀出核苷酸的序列。采用T7測(cè)序酶時(shí)，一次可讀出400多個(gè)核苷酸的序列。是以D、L甘油醛為參照物,以距醛基最遠(yuǎn)的不對(duì)稱碳原子為準(zhǔn), 羥基在左面的為L(zhǎng)構(gòu)型, 羥基在右的為D構(gòu)型。4．根據(jù)下列單糖和單糖衍生物的結(jié)構(gòu)：(A) (B) (C) (D) (1)寫出其構(gòu)型(D或L)和名稱；(2)指出它們能否還原本尼地試劑；(3) 指出哪些能發(fā)生成苷反應(yīng)。6．纖維素和淀粉都是由1→4糖苷鍵連接的D―葡萄糖聚合物，相對(duì)分子質(zhì)量也相當(dāng)，但它們?cè)谖锢硇再|(zhì)上有很大的不同，請(qǐng)問(wèn)是什么結(jié)構(gòu)特點(diǎn)造成它們?cè)谖锢硇再|(zhì)上的如此差別? 解釋它們各自性質(zhì)的生物學(xué)優(yōu)點(diǎn)。當(dāng)平均長(zhǎng)度為20個(gè)葡萄糖基時(shí)呈紅色,紅糊精、無(wú)色糊精也因而得名。7．說(shuō)明下列糖所含單糖的種類、糖苷鍵的類型及有無(wú)還原性? （1）纖維二糖 （2）麥芽糖（3）龍膽二糖 （4）海藻糖（5）蔗糖 （6）乳糖解答：（1）纖維二糖含葡萄糖，β→1，4 糖苷鍵，有還原性。根據(jù)不同的抗原組合,人的血型主要分為A型、B型、AB型和O型4類。脂肪酸多為4碳以上的長(zhǎng)鏈一元羧酸，醇成分包括甘油、鞘氨醇、高級(jí)一元醇和固醇。解答：(1)脂肪酸的結(jié)構(gòu)：脂肪酸分子為一條長(zhǎng)的烴鏈（“尾”）和一個(gè)末端羧基（“頭”）組成的羧酸。④脂肪酸鹽屬于極性脂質(zhì)，具有親水基（電離的羧基）和疏水基（長(zhǎng)的烴鏈），是典型的兩親性化合物，屬于離子型去污劑。c. 酶解作用：甘油磷脂可被各種磷脂酶（PLA）專一水解。中性鞘糖脂一般為白色粉狀物，不溶于水、乙醚，溶于熱乙醇、熱丙酮、吡啶及苯等，性質(zhì)穩(wěn)定，不被皂化。Ⅲ. 固醇類也稱甾類，所有固醇類化合物都是以環(huán)戊烷多氫菲為核心結(jié)構(gòu)，因羥基的構(gòu)型不同，可有α及β兩型。用氯仿—甲醇混合溶劑很容易將甘油磷脂從組織中提取出來(lái)。（2）固醇：高等植物的固醇主要為谷甾醇和豆甾醇。膽固醇的雙鍵可與氫、溴、碘等發(fā)生加成反應(yīng)。鞘糖脂的疏水尾部伸入膜的脂雙層，極性糖基露在細(xì)胞表面，它們不僅是血型抗原，而且與組織和器官的特異性，細(xì)胞之間的識(shí)別有關(guān)。5．何為必需脂肪酸？哺乳動(dòng)物體內(nèi)所需的必需脂肪酸都有哪些？解答：哺乳動(dòng)物體內(nèi)能夠自身合成飽和及單不飽和脂肪酸，但不能合成機(jī)體必需的亞油酸、亞麻酸和花生四烯酸等多不飽和脂肪酸。脂質(zhì)體的形成將細(xì)胞內(nèi)外環(huán)境分開。6 酶1．作為生物催化劑，酶最重要的特點(diǎn)是什么？解答：作為生物催化劑，酶最重要的特點(diǎn)是具有很高的催化效率以及高度專一性。接下來(lái)，你用定點(diǎn)誘變的方法研究了組成該酶的某些氨基酸殘基對(duì)酶活性的影響作用：（1）你將第65位的精氨酸突變?yōu)楣劝彼幔l(fā)現(xiàn)該酶的底物專一性發(fā)生了較大的改變，試解釋原因；（2）你將第108位的絲氨酸突變?yōu)楸彼?，發(fā)現(xiàn)酶活力完全失去，試解釋原因；（3）你認(rèn)為第65位的精氨酸與第108位的絲氨酸在酶的空間結(jié)構(gòu)中是否相互靠近，為什么？解答：（1）第65位的氨基酸殘基可能位于酶活性部位中的底物結(jié)合部位，對(duì)酶的專一性有較大影響，當(dāng)該氨基酸殘基由精氨酸突變?yōu)楣劝彼岷?，其帶電性質(zhì)發(fā)生了改變，不再具有與原底物之間的互補(bǔ)性，導(dǎo)致酶的專一性發(fā)生改變。解答：在酶促反應(yīng)酸堿催化中，酶活性部位的一些功能基團(tuán)可以作為廣義酸給出質(zhì)子（例如谷氨酸殘基不帶電荷的側(cè)鏈羧基、賴氨酸殘基帶正電荷的側(cè)鏈氨基等），底物結(jié)合質(zhì)子，形成特定的過(guò)渡態(tài)，由于形成該過(guò)渡態(tài)所需活化能相比于非酶促反應(yīng)更低，因此反應(yīng)速率加快；另外一些功能基團(tuán)可以作為廣義堿從底物接受質(zhì)子（例如谷氨酸殘基帶負(fù)電荷的側(cè)鏈羧基、賴氨酸殘基不帶電荷的側(cè)鏈氨基等），底物失去質(zhì)子后，形成過(guò)渡態(tài)所需的活化能比非酶促反應(yīng)低，因此反應(yīng)速率加快。利用NADH的摩爾吸光系數(shù)（可從相關(guān)文獻(xiàn)查到，或用已知濃度的NADH溶液自行測(cè)定），計(jì)算出單位時(shí)間內(nèi)NADH的增加量，用于表示酶活力。13．在生物體內(nèi)存在很多通過(guò)改變酶的結(jié)構(gòu)從而調(diào)節(jié)其活性的方法，請(qǐng)列舉這些方法并分別舉例說(shuō)明。前者的例子是蛋白激酶A，該酶由2個(gè)調(diào)節(jié)亞基與2個(gè)催化亞基組成，是沒(méi)有酶活性的寡聚酶，胞內(nèi)信使cAMP與調(diào)節(jié)亞基結(jié)合可導(dǎo)致寡聚酶解離成一個(gè)調(diào)節(jié)亞基復(fù)合體和兩個(gè)催化亞基，此時(shí)自由的催化亞基可獲得酶活性。這種別構(gòu)調(diào)控使ATCase的[S]對(duì)v的動(dòng)力學(xué)曲線不是雙曲線，而是S型曲線。在酶原激活的機(jī)制中，由于高級(jí)結(jié)構(gòu)的改變是由于一級(jí)結(jié)構(gòu)的改變?cè)斐傻?，因此這說(shuō)明了不同的一級(jí)結(jié)構(gòu)可導(dǎo)致不同高級(jí)結(jié)構(gòu)的產(chǎn)生，這是“蛋白質(zhì)一級(jí)結(jié)構(gòu)決定高級(jí)結(jié)構(gòu)”原理的體現(xiàn)。解答： 5．在生物體內(nèi)起到傳遞電子作用的輔酶是什么？解答：NAD+、NADP+、FMN、FAD。7．試述與缺乏維生素相關(guān)的腳氣病的發(fā)病機(jī)理，為什么常吃粗糧的人不容易得腳氣??？解答：腳氣病是一種由于體內(nèi)維生素B1不足所引起的以多發(fā)性周圍神經(jīng)炎為主要癥狀的營(yíng)養(yǎng)缺乏病，硫胺素在體內(nèi)可轉(zhuǎn)化成硫胺素焦磷酸，后者作為輔酶參與糖代謝中丙酮酸、a―酮戊二酸的氧化脫羧作用，所以，缺乏維生素B1時(shí)，糖代謝受阻，一方面導(dǎo)致神經(jīng)組織的供能不足，另一方面使糖代謝過(guò)程中產(chǎn)生的a―酮酸、乳酸等在血、尿和組織中堆積，從而引起多發(fā)性神經(jīng)炎等癥狀。10．多選題：（1）下列哪一個(gè)輔酶不是來(lái)自維生素（ ）A．CoQ B．FAD C．NAD+ D．pLp E．Tpp（2）分子中具有醌式結(jié)構(gòu)的是（ ）A．維生素A B．維生素B1 C．維生素C D．維生素E E．維生素K（3）具有抗氧化作用的脂溶性維生素是（ ）A．維生素C B．維生素E C．維生素A D．維生素B1 E．維生素D（4）下列維生素中含有噻唑環(huán)的是（ ）A．維生素B2 B．維生素B1 C．維生素PP D．葉酸 E．維生素B6（5）下列關(guān)于維生素與輔酶的描述中，哪幾項(xiàng)是正確的（ ）A. 脂溶性維生素包括維生素A、維生素C、維生素D和維生素EB. 維生素B1的輔酶形式為硫胺素焦磷酸C. 催化轉(zhuǎn)氨作用的轉(zhuǎn)氨酶所含的輔基是FMN與FADD. 維生素C又名抗壞血酸，是一種強(qiáng)的還原劑（6）下列關(guān)于維生素與輔酶的描述中，哪幾項(xiàng)是錯(cuò)誤的（ ）A. 維生素A的活性形式是全反式視黃醛，它與暗視覺(jué)有關(guān)B. 輔酶I是維生素PP的輔酶形式C. FMN與FAD是氧化還原酶的輔基D. 硫胺素焦磷酸是水解酶的輔酶（7）轉(zhuǎn)氨酶的輔酶含有下列哪種維生素?（ ）A．維生素Bl B．維生素B2 C．維生素PP D．維生素B6 E．維生素Bl2（8）四氫葉酸不是下列哪種基團(tuán)或化合物的載體?（ ）A．—CHO B．CO2 C． D．—CH3 E．解答：（1）A；（2）E；（3）B；（4）B；（5）B、D；（6）A、D；（7）D；（8）B。所以得出如下結(jié)論：反應(yīng)電子供體 電子受體 還原劑 氧化劑（1）（2）（3）NADH EFMN NADH EFMNEFMNH2 Fe3+ EFMNH2 Fe3+ Fe2+ Q Fe2+ Q3．組成原電池的兩個(gè)半電池，半電池A含有1mol/L的甘油酸–3–磷酸和1mol/L的甘油醛–3–磷酸，而另外的一個(gè)半電池B含有1mol/L NAD+和1mol/L NADH。(1) 魚藤酮阻斷了電子從NADH脫氫酶上的FMN向CoQ的傳遞，還原輔酶不能再氧化, 氧化放能被破壞，昆蟲將不能從食物中獲得足夠的維持生命活動(dòng)需要的ATP。6．某女教師24h需從膳食中獲得能量8?360kJ(2?000kcal)，其中糖類供能占60%，假如食物轉(zhuǎn)化為ATP的效率是50%，則膳食糖類可轉(zhuǎn)化為多少摩爾ATP？解答：略。θ計(jì)算， G162。如果從糖原開始計(jì)算，lmol葡萄糖徹底氧化為CO2和 H2O, 將凈生成33molATP。4．O2沒(méi)有直接參與三羧酸循環(huán),但沒(méi)有O2的存在,三羧酸循環(huán)就不能進(jìn)行,為什么?丙二酸對(duì)三羧酸循環(huán)有何作用? 解答：三羧酸循環(huán)所產(chǎn)生的3個(gè)NADH+H+和1個(gè)FADH2需進(jìn)入呼吸鏈，將H+和電子傳遞給O2生成H2O。7．激烈運(yùn)動(dòng)后人們會(huì)感到肌肉酸痛,。合成脂肪所需的甘油3磷酸可由糖酵解產(chǎn)生的二羥丙酮磷酸還原而成，亦可由脂肪動(dòng)員產(chǎn)生的甘油經(jīng)脂肪組織外的甘油激酶催化與ATP作用而成。8+8+1092=12+20+902=120 mol ATP。也可以經(jīng)其他代謝途徑轉(zhuǎn)變成乳酸及乙酰CoA進(jìn)行氧化。6．脂肪酸是如何進(jìn)行生物合成的?解答：詳見 “脂肪酸的生物合成”。這種看似浪費(fèi)的過(guò)程對(duì)于生命活動(dòng)是非常必要的。故一般認(rèn)為L(zhǎng)氨基酸在體內(nèi)往往不是直接氧化脫去氨基，主要以聯(lián)合脫氨基的方式脫氨。磷酸再將其氨基轉(zhuǎn)移給另一分子α酮酸，生成另一種氨基酸，而其本身又變成吡哆醛5162。此循環(huán)可分成三個(gè)階段：第一階段為鳥氨酸與二氧化碳和氨作用，合成瓜氨酸。生酮氨基酸的代謝產(chǎn)物為乙酰輔酶A或乙酰乙酸。在物質(zhì)代謝過(guò)程中常遇到一碳基團(tuán)從一個(gè)化合物轉(zhuǎn)移到另一個(gè)化合物的分子上去，而一碳單位的載體往往為四氫葉酸，體內(nèi)一碳單位的產(chǎn)生與下列氨基酸代謝有關(guān)。另外甲硫氨酸也是體內(nèi)重要的甲基化試劑，可以為很多化合物提供甲基。另一方面三羧酸循環(huán)中的許多中間體如α酮戊二酸、琥珀酸、延胡索酸、蘋果酸、草酰乙酸等又是生物體各物質(zhì)合成的共同前體。第三階段精氨酸被肝中精氨酸酶水解產(chǎn)生尿素和重新放出鳥氨酸。磷酸在轉(zhuǎn)氨基作用中起到轉(zhuǎn)移氨基的作用。解答：轉(zhuǎn)氨酶的種類雖多，但其輔酶只有一種，即吡哆醛5162。其次，通過(guò)降解多余的酶和調(diào)節(jié)蛋白來(lái)調(diào)節(jié)物質(zhì)在細(xì)胞中的代謝。甘油氧化成CO2和H2O時(shí)， ATP，3mol辛酸經(jīng)3次β氧化，生成4mol乙酰CoA。4．C16:1與相同碳原子數(shù)的飽和脂肪酸氧化途徑有何區(qū)別?解答：幾乎所有生物體的不飽和脂肪酸都只含有順式雙鍵,且多在第9位,而β氧化中的△2反烯脂酰CoA水化酶和β羥脂酰CoA脫氫酶具有高度立體異構(gòu)專一性,所以不飽和脂肪酸的氧化除要有β氧化的全部酶外,還需要△3順, △2反烯脂酰CoA異構(gòu)酶和△2反，△4順二烯脂酰CoA還原酶。3．脂肪酸除β氧化途徑外，還有哪些氧化途徑?解答：脂肪酸除主要進(jìn)行β氧化作用外，還可進(jìn)行另兩種方式的氧化，即α氧化與ω氧化。磷脂酸在磷脂酸磷酸酶作用生成二酰甘油及磷酸。8．寫出UDPG的結(jié)構(gòu)式。丙二酸是琥珀酸脫氫酶的竟?fàn)幮砸种苿?，加入丙二酸?huì)使三羧酸循環(huán)受阻。 NADH+H+代謝去路不同, 在無(wú)氧條件下去還原丙酮酸。9 糖代謝 1．假設(shè)細(xì)胞勻漿中存在代謝所需要的酶和輔酶等必需條件,若葡萄糖的C1處用14C標(biāo)記,那么在下列代謝產(chǎn)物中能否找到14C標(biāo)記。FAD+2H++2e→FADH2延胡索酸+2H++2e→琥珀酸乙酰乙酸+2H++2e→β羥丁酸NAD++2H++2e→NADH(1)FADH2 + NAD+ FAD + NADH + H+ = （）= 反應(yīng)不能進(jìn)行。(3) 當(dāng)魚藤酮存在時(shí), NADH 呼吸鏈的電子傳遞中斷，但不影響FADH2呼吸鏈和底物水平磷酸化的進(jìn)行，理論上1mol琥珀酰輔酶A還將生成5molATP。θ的數(shù)值愈低,即供電子的傾