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正文內(nèi)容

pcr實驗室設(shè)計說明(完整版)

2025-05-13 06:25上一頁面

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【正文】 情況下,PCR實驗室緩沖間內(nèi),可設(shè)置正壓,使室內(nèi)空氣不流向室外,室外空氣不流向室內(nèi)。二、組合形式PCR實驗室 用有效的方法對操作區(qū)域和共享器具在實驗前后進行清潔及消毒。工作人員離開各工作區(qū)域時,不得將工作服帶出,四區(qū)域分別為:如使用全自動分析儀,區(qū)域可適當合并,三四區(qū)可合并為擴增產(chǎn)物分析。 試劑準備區(qū):擴增試劑的配制、分裝和保存。 在滿足下列操作和清潔處理要求的前提下樣品處理區(qū)和試劑準備區(qū)可設(shè)在同一房間內(nèi):各室在入口處設(shè)緩沖間,以減少室內(nèi)外空氣交換。需要指出的是在減少室內(nèi)外空氣交換方面,緩沖間比專用走廊更有意義。標本制備區(qū)本區(qū)所使用的儀器設(shè)備有酶標儀、洗板機、加樣器和水浴箱等潔凈實驗區(qū)的緩沖間部分面積不能超過主實驗室的八分之一,這是有規(guī)定的.可打開緩沖區(qū)Ⅰ,緩沖區(qū)Ⅱ和 PCR 擴增區(qū)的排風扇往外排氣,在實驗區(qū)的外墻上和各扇門上都安裝有風量可調(diào)的回風口,空氣通過回風口向室內(nèi)換氣。●嚴格按照規(guī)范科學設(shè)計的安裝流程。 混勻器 專用工作服和工作鞋 高速臺式冷凍離心機 可移動紫外燈(近工作臺面) 專用辦公用品 微量加樣器(覆蓋11000ul) 專用辦公用品。臨床基因擴增檢驗實驗室設(shè)計的核心問題是如何避免污染。臨床基因擴增檢驗實驗室原則上分為四個單獨的工作區(qū)域:試劑貯存和準備區(qū)、標本制備區(qū)、擴增反應(yīng)混合物配制和擴增區(qū)、擴增產(chǎn)物分析區(qū)。在巢式PCR測定中,通常在第一輪擴增后必須打開反應(yīng)管,因此巢式擴增有較高的污染危險性,第二次加樣必須在本區(qū)內(nèi)進行。4所以發(fā)生污染后再圍繞實驗室來尋找污染源不但耗時而且繁瑣,浪費人力物力。(3)清潔工作及時、正確。嚴格的管理完備的實驗室配套設(shè)施是保證實驗工作的必要條件,應(yīng)根據(jù)各個實驗室實驗內(nèi)容的不同配備相應(yīng)的設(shè)備和儀器,如超凈工作臺、離心機、加樣器等。試劑和用于標本制作的材料應(yīng)直接運送至該區(qū),不得經(jīng)過其他區(qū)域。 擴增反應(yīng)混合物配制和擴增區(qū)為避免氣溶膠所致的污染,應(yīng)盡量減少在本區(qū)內(nèi)的不必要的走動。用一些事情,總會看清一些人。學習參考。既糾結(jié)了自己,又打擾了別人。 本區(qū)是最主要的擴增產(chǎn)物污染來源,因此對本區(qū)的壓力梯度的要求為:相對于鄰近區(qū)域為負壓,以避免擴增產(chǎn)物從本區(qū)擴散至其它區(qū)域。 該區(qū)域主要進行的操作為DNA或cDNA擴增。同時,要嚴格控制送、排風的比例以保證各實驗區(qū)的壓力要求。(4)擴增產(chǎn)物分析區(qū)是最主要的擴增產(chǎn)物污染來源,廢液不能在實驗室中傾倒,必須經(jīng)消毒液浸泡消毒后在遠離實驗室的地方棄掉,用過的吸頭等一次性材料也應(yīng)經(jīng)消毒液浸泡消毒后統(tǒng)一處理,如焚燒等;除常規(guī)的消毒液體對表面進行擦拭消毒或紫外線燈的照射消毒外,對一些實驗設(shè)備還應(yīng)進行高壓消毒處理。如使用全自動封閉分析儀器檢測,此區(qū)域可不設(shè)。擴增反應(yīng)混合物配制和擴增區(qū)標本制備區(qū)PCR實驗室并沒有嚴格的凈化要求,但是為避免各個實驗區(qū)域間交叉污染的可能性,宜采用全送全排的氣流組織形式。下面就對這幾個方面分別進說明。臨床基因擴增實驗又稱PCR實驗,是專門用來檢驗艾滋病、乙型肝炎、禽疫病等病毒感染性疾病的一種檢測手段。即從 “試劑準備區(qū)到樣品制備區(qū),再從樣品制備走向擴
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