菌種傳代與保藏ppt課件(完整版)
【正文】 ， 將接種環(huán)燒紅 30秒 ，隨后將全部接種棒金屬部分在火焰上燒灼 ， 往返通過(guò) 3次 。 常用分離平板： ? 大腸埃希菌 —— EMB瓊脂平板 銅綠假單胞菌 —— 溴化十六烷三甲銨瓊脂培養(yǎng)基 ?金黃色葡萄球菌 —— 甘露醇氯化鈉瓊脂培養(yǎng)基 ?沙門(mén)菌 —— SS瓊脂平板 3 菌懸液的制備 ? 取上述培養(yǎng)好的菌種斜面移入接種室或凈化工作臺(tái) ， 放置室溫后 , 用接種環(huán)取菌苔少許接種置營(yíng)養(yǎng)肉湯中 (5ml/支 ,已滅菌 ), 將已接種畢的細(xì)菌管置 35~37℃ 培養(yǎng) 18~24小時(shí) ， 取出備用 。 ? 各種菌種應(yīng)按規(guī)定時(shí)間定期移種 。 注意菌種有無(wú)污染和變異 ，如發(fā)現(xiàn)污染和變異時(shí) ， 應(yīng)及時(shí)更換 。 4 對(duì)照用菌液制備 ? 取上述培養(yǎng)好的營(yíng)養(yǎng)肉湯菌懸液（濃菌液） 1ml，加到 9ml %無(wú)菌氯化鈉溶液混勻，為 101，再取另一只吸管吸取 101菌液 1 ml加到 9ml %無(wú)菌氯化鈉溶液混勻，為 102 …… 以此類推，稀釋至含活菌數(shù)在 50 ~ 100 個(gè)。 ? 堵上棉塞 ， 左手將菌種管放下 ， 取營(yíng)養(yǎng)瓊脂斜面 1支 ， 照上述操作打開(kāi)棉塞 ， 將接種環(huán)伸入管內(nèi)至瓊脂斜面的低部 ， 由底向上 ， 將接種環(huán)輕貼斜面的表面曲折移動(dòng) ， 使細(xì)菌劃在斜面的表面上 。 ? 取滅菌鑷子，在火焰旁，將炸裂的管口打開(kāi)，放入滅菌雙碟內(nèi)，另取 1支滅菌滴管，在火焰旁吸取營(yíng)養(yǎng)肉湯少許，加至菌種管底部，將凍干菌攪動(dòng)促使溶解，隨即吸出管內(nèi)菌液，分別接種至營(yíng)養(yǎng)瓊脂斜面及普通肉湯內(nèi)，并將滴管及菌種管投入消毒液內(nèi)，將已接種的營(yíng)養(yǎng)肉湯及營(yíng)養(yǎng)瓊脂斜面置 35~37℃ 培養(yǎng) 22~24 h。 ⑤ 液體石蠟在菌種管中高出培養(yǎng)基的高度要嚴(yán)格控制 ， 如太多 ， 會(huì)影響菌種交換氣體 ， 使保藏效果不好；如太少 ， 斜面容易干燥 ， 將縮短保藏期 。 ? 取化學(xué)純的液體石蠟裝在試管中 ， 每管10~15ml， 加棉塞 ， 瓶口包上紙 ， 121℃ 高壓滅菌 30min， 取出置 37℃ 溫箱或 110~ 170 ℃ 烤箱中 1 ~ 2 h 或干燥器內(nèi)除去液體石蠟中的水分 。 （ 4） 注意事項(xiàng)： ? 保藏的菌種應(yīng)是生命活力旺盛的新鮮培養(yǎng)物 ， 至少應(yīng)是第三代的培養(yǎng)物 。 ? （ 1）方法：將經(jīng)常使用的菌種的典型菌落接種在斜面（某些特殊菌種可用液體培養(yǎng)基）上，按規(guī)定的溫度和時(shí)間培養(yǎng)，待充分生長(zhǎng)后，把培養(yǎng)好的新鮮菌種用牛皮紙保好，為減緩培養(yǎng)基的水分蒸發(fā)，延長(zhǎng)保藏時(shí)間，可將菌種保藏管的棉花塞換成橡膠塞。 二、菌種代號(hào)的意義
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