【正文】 分為 （ 2）根據(jù)切割位點分為 核糖核酸酶 (RNase) 脫氧核糖核酸酶 (DNase) 非特異性核酸酶 核酸內(nèi)切酶 核酸外切酶 ：作用于核酸鏈的末端（ 3’端或 5’端），逐個水解下核苷酸。 常用的 DNA限制性內(nèi)切酶的專一性 酶 辨認(rèn)的序列和切口 說明 ‥ ‥ A G C T ‥‥ ‥ ‥ T C G A ‥ ‥ ‥ ‥ G G A T C C ‥‥ ‥ ‥ C C T A G G ‥‥ ‥ ‥ A G A T C T ‥‥ ‥ ‥ T C T A G A ‥‥ ‥ ‥ G A A T T C ‥‥ ‥ ‥ C T T A A G ‥‥ ‥ ‥ A A G C T T‥‥ ‥ ‥ T T C G A A ‥‥ ‥ ‥ G T C G A C ‥‥ ‥ ‥ C A G C T G ‥‥ ‥ ‥ C C C G G G ‥‥ ‥ ‥ G G G C C C ‥‥ Bam H I Alu I Bgl I Eco R I Hind Ⅲ Sal I Sma I 四核苷酸，平端切口 六核苷酸，平端切口 六核苷酸，粘端切口 六核苷酸，粘端切口 六核苷酸，粘端切口 六核苷酸，粘端切口 六核苷酸，粘端切口 限制性內(nèi)切酶的命名和意義 Eco R I 序號 屬名 種名 株名 例： Eco R I，這是從大腸桿菌（ Ecoli） R菌珠中分離出的一種限制性內(nèi)切酶 限制性內(nèi)切酶是分析染色體結(jié)構(gòu)、制作 DNA限制圖譜、進行 DNA序列測定和基因分離、基因體外重組等研究中不可缺少的工具，是一把天賜的神刀，用來解剖纖細(xì)的 DNA分子。 從頭合成途徑 補救合成途徑 ? 又稱 再利用合成途徑 (salvage pathway)。 R5P （ 5磷酸核糖） ATP AMP PRPP合成酶 PRPP （ 5磷酸核糖 1焦磷酸） 在谷氨酰胺、甘氨酸、一碳單位、二氧化碳及天冬氨酸的參與下，逐步合成 IMP IMP的合成過程 腺苷酸（ AMP）與鳥苷酸（ GMP）的合成 H2O + NAD+ XMP IMP脫氫酶 NADH + H+ Asp + GTP IMP AMPS 腺苷酸代琥 珀酸合成酶 GDP + Pi Gln + ATP GMP 鳥苷酸合成酶 Glu + AMP + PPi AMP 腺苷酸代琥 珀酸裂解酶 延胡索酸 ? IMP在腺苷酸代琥珀酸合成酶的催化下，由天冬氨酸提供氨基合成腺苷酸代琥珀酸（ AMPS），然后裂解產(chǎn)生腺苷酸（ AMP）。 嘌呤類似物 ? 臨床上應(yīng)用較多的嘌呤類似物包括 6巰基嘌呤（ 6mercaptopurine，6MP）、 6巰基鳥嘌呤、 8氮雜鳥嘌呤等。 胸腺嘧啶 (T) 5氟尿嘧啶 (5FU) 氨基酸類似物： ? 氮雜絲氨酸 類似谷氨酰胺，可抑制 CTP的合成。 參與物質(zhì)代謝及生理功能的調(diào)控。此種情況見于正常成人。 2）生理需要量： ? 體 內(nèi)不能合成，必須由食物蛋白質(zhì)供給的氨基酸稱為營養(yǎng) 必需氨基酸 (essential amino acid)。 胃蛋白酶原 胃蛋白酶 + 多肽碎片 胃酸、胃蛋白酶 (pepsinogen) (pepsin) 1）胃中的消化： 2）小腸中的消化： ? 有兩種類型的消化酶： ⑴ 肽鏈外切酶 (exopeptidase)：如羧肽酶 A、羧肽酶B、氨基肽酶、二肽酶等； ⑵ 肽鏈內(nèi)切酶 (endopeptidase)：如胰蛋白酶、糜蛋白酶、彈性蛋白酶等。 3 蛋白質(zhì)的腐敗作用 ? 腐敗分解作用 （ putrefaction）主要在大腸中進行，是細(xì)菌對蛋白質(zhì)及其消化產(chǎn)物的分解作用。需ATP和泛素參與 ?泛素 (ubiquitin)是一種小分子蛋白質(zhì)，普遍存在于真核細(xì)胞中。除Lys， Pro外，均可參加轉(zhuǎn)氨基作用。 天冬氨酸 + ?酮戊二酸 草酰乙酸 + 谷氨酸 AST 2）氧化脫氨基作用： ? 氧化脫氨基的反應(yīng)過程包括 脫氫 和 水解 兩步，脫氫反應(yīng)需 酶 催化，而水解反應(yīng)則不需酶的催化。 ? 在骨骼肌和心肌中，由于谷氨酸脫氫酶的活性較低，而 腺苷酸脫氨酶 (adenylate deaminase)的活性較高，故采用此方式進行脫氨基。 ? 正常人血液中氨的濃度很低，一般不超過 ?mol/L。 ? 尿素合成是經(jīng)稱為 鳥氨酸循環(huán)(ornithine cycle)的反應(yīng)過程來完成的。鳥氨酸可再轉(zhuǎn)運入線粒體繼續(xù)進行循環(huán)反應(yīng)。 ? 5羥色胺的合成原料是 色氨酸 (tryptophan)。 2氨基 4羥基 6甲基 5,6,7,8四氫蝶呤啶的結(jié)構(gòu) ① H N N H2N ⑩ N ⑤ CH2NHR N OH H + S腺苷同型半胱氨酸 CH – NH2 S – AR CH2 CH2 COOH CH3 S腺苷蛋氨酸（ SAM） SAM的分子結(jié)構(gòu) 常見的一碳單位的四氫葉酸衍生物 （ N10CHO FH4）。 + CH – NH2 S – AR CH2 CH2 COOH CH3 ? 從蛋氨酸形成的 S腺苷蛋氨酸，在提供甲基以后轉(zhuǎn)變?yōu)橥桶腚装彼幔缓笤俜捶较蛑匦潞铣傻鞍彼?，這一循環(huán)反應(yīng)過程稱為 S腺苷蛋氨酸循環(huán) 或 活性甲基循環(huán) 。磷酰硫酸 ) 339。磷酸腺苷 5180。 ? 合成肌酸的主要器官是 肝 。 c. N5,N10亞甲基四氫葉酸 （ N5,N10CH2FH4）。 ? 組胺的釋放與過敏反應(yīng)和應(yīng)激反應(yīng)有關(guān)。 尿素合成的特點： 異檸檬酸 α酮戊二酸 琥珀酰 CoA 琥珀酸 延胡索酸 蘋果酸 草酰乙酸 檸檬酸 谷氨酸 乙酰乙酰 CoA 乙酰 CoA Phe Leu Lys Trp Tyr 丙酮酸 Ala Thr Gly Ser Cys Asp Asn Phe Tyr Ile Met Val Arg His Gln Phe 乙酰 CoA 第五節(jié) 個別氨基酸的代謝 5 Metabolism of Individual Amino Acids ? 由氨基酸 脫羧酶 (decarboxyase)催化，輔酶為 磷酸吡哆醛 ，產(chǎn)物為 CO2和胺 。 ⑴ 氨基甲酰磷酸的合成： ? 此反應(yīng)在 線粒體 中進行，由 氨基甲酰磷酸合成酶 Ⅰ （ carbamoyl phosphate synthetase Ⅰ , CPSⅠ ）催化，該酶需 N乙酰谷氨酸（ AGA） 作為變構(gòu)激活劑，反應(yīng)不可逆。 血氨 1 血氨的來源與去路 腸道吸收 氨基酸脫氨 酰胺水解 其他含氮物分解 合成尿素 合成氨基酸 合成酰胺 合成其他含氮物 直接排出 2 氨在血中的轉(zhuǎn)運 ? 肌肉中的氨基酸將氨基轉(zhuǎn)給丙酮酸生成 丙氨酸 ，后者經(jīng)血液循環(huán)轉(zhuǎn)運至肝再脫氨基，生成的丙酮酸異生為 葡萄糖 后再經(jīng)血液循環(huán)轉(zhuǎn)運至肌肉重新分解產(chǎn)生丙酮酸，通過這一循環(huán)反應(yīng)過程即可將肌肉中氨基酸的氨基轉(zhuǎn)移到肝進行處理。 IMP 腺苷酸代 琥珀酸 氨基酸 ?酮酸 NH3 H2O ?酮戊二酸 谷氨酸 天冬氨酸 草酰乙酸 AMP 延胡索酸 蘋果酸 嘌呤核苷酸循環(huán) 3. ?酮酸的代謝 1） 再氨基化為氨基酸 。該酶活性不高，在各組織器官中分布局限，因此作用不大。 轉(zhuǎn)氨酶的輔酶及其作用機制 分子重排 H2O +H2O H2O +H2O ⑴ 丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶 （ alanine transaminase, ALT），又稱為 谷丙轉(zhuǎn)氨酶（ GPT） 。 泛素介導(dǎo)的蛋白質(zhì)降解過程 蛋白質(zhì)的泛素化過程： E1：泛素活化酶 E2：泛素攜帶蛋白 E3：泛素蛋白連接酶 ⑵ 蛋白酶體的降解： ? 泛素化的蛋白質(zhì)與多種蛋白質(zhì)構(gòu)成蛋白酶體(proteasome)，使蛋白質(zhì)降解?？?產(chǎn)生有毒物質(zhì) ，如 胺類 （腐胺、尸胺、酪胺），酚類，吲哚類， 氨 及硫化氫等。 ? 95%的食物蛋白質(zhì)在腸中完全水解為氨基酸。 3）必需氨基酸：