高中生物選修專題一基因工程(完整版)
【正文】 并得到表達(dá)。小圖為子彈 新式的基因槍靠高壓氦氣為動力，將微粒載片上的ＤＮＡ送出，成功率在１５％左右。 質(zhì)粒 DNA分子 限制酶處理 一個切口 兩個黏性末端 兩個切口 獲得目的基因 DNA連接酶 重組 DNA分子（重組質(zhì)粒） 同一種 基因表達(dá)載體的構(gòu)建 33 三、將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞 ： 目的基因進(jìn)入受體細(xì)胞內(nèi)，并且在受體 細(xì)胞內(nèi)維持穩(wěn)定和表達(dá)的工程 ： ① 農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法：雙子葉植物和裸子植物。 第二步：核酸酶 H使 RNADNA雜交分子中的 RNA鏈降 解，使之變成單鏈的 DNA。 ② 不同點： 原核細(xì)胞基因的編碼區(qū)是連續(xù)的；真核細(xì)胞的編碼區(qū)是間隔的，不連續(xù)的。 大腸桿菌 T4噬菌體 不同來源 DNA片斷結(jié)合 雙鏈斷開 EcoRI切割 ： 要讓一個從甲生物細(xì)胞內(nèi)取出來的基因在乙生物體內(nèi)進(jìn)行表達(dá)，首先得將這個基因送到乙生物的細(xì)胞內(nèi)去。 什么叫平末端？ 當(dāng)限制酶從識別序列的中心軸線處切開時，切開的 DNA兩條單鏈的切口，是平整的，這樣的切口叫平末端。 目的基因的檢測與鑒定是重點考察內(nèi)容，每年都有涉及，分子水平和個體水平都考察，重點理解分子雜交；蛋白質(zhì)工程考察較少。重點考察“從基因文庫與 CDNA文庫的構(gòu)建過程及區(qū)別”另外，“基因表達(dá)載體的構(gòu)建”也是考察的重點。能將外來的 DNA切斷，由于這種切割作用是在 DNA分子內(nèi)部進(jìn)行的，故名限制性內(nèi)切酶。 ② DNA連接酶 —— 分子縫合針： ：只能連黏性末端。 ，便于供外源 DNA片段插入。 基因文庫中包含了一種生物的一部分基因 ,這種基因文庫叫做 部分基因文庫 。 (3)用化學(xué)方法直接 人工合成目的基因 蛋白質(zhì)氨基酸序列 →mRNA 的核苷酸序列 → 目 的基因序列 → 目的基因 針對：基因比較小，核苷酸序列又已知 推測 化學(xué)合成 推測 ： 二 . 基因表達(dá)載體的構(gòu)建 —— 核心 IMN ： ①使目的基因在受體細(xì)胞中穩(wěn)定存在并遺傳給子代。 基因槍法： 利用壓縮氣體產(chǎn)生的動力 ，將包裹在金屬粒表面的表達(dá)載體 DNA打入受體細(xì)胞中，使目的基因與其整合并表達(dá)的方法 ① 操作方法： ② 金屬粒： 將目的基因?qū)雴巫尤~植物細(xì)胞 鎢粉粒子和金粉粒子，粒子的直徑一般在 ～ 4um 。 —— 個體生物學(xué)水平的鑒定 抗蟲、抗病結(jié)種實驗，活性比較實驗 不能，受體細(xì)胞必須表現(xiàn)出特定的性狀，才能說明目的基因完成了 表達(dá) 。其原理和聲音都與鳥槍相
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