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酶學(xué)與酶工程第三章酶的生物合成學(xué)生(完整版)

2025-02-13 12:59上一頁面

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【正文】 國獸醫(yī)微生物菌種保藏管理中心( CVCC) 中國林業(yè)微生物菌種保藏管理中心( CFCC) 中國藥用微生物菌種保藏中心( CPCC) 中國醫(yī)學(xué)微生物菌種保藏管理中心( CMCC) ? 中國海洋微生物保藏中心( MCCC) ? College of Life Sciences ? 國外菌種保藏中心: ? ATCC(American Type Culture Collection) 美國典型菌種保藏中心 NBRC (NITE Biological Resource Center)日本技術(shù)評(píng)價(jià)研究所生物資源中心 CBS (Centraalbureauvoor Schimmelcultures) 荷蘭微生物菌種保藏中心 KCTC (Korean Collection for Type Cultures) 韓國典型菌種保藏中心 DSMZ (Deutsche Sammlung von Mikroanismen und Zellkulturen ) 德國微生物菌種保藏中心 ? College of Life Sciences ? 微生物進(jìn)行發(fā)酵生產(chǎn)成為當(dāng)今酶生產(chǎn)的主要方法。 ? 原料的供應(yīng)和價(jià)格 最常用的碳原為淀粉水解物 College of Life Sciences ? 氮源 ? 凡能提供細(xì)胞生長繁殖所需氮元素的營養(yǎng)源,稱為氮源。 College of Life Sciences ? 水 : ? 水是微生物最基本的成分( 70%90%) ? 水是微生物吸收營養(yǎng)物質(zhì)、排泄代謝物的溶劑 ? 水細(xì)胞成分,直接參與代謝活動(dòng) ? 調(diào)節(jié)細(xì)胞環(huán)境的溫度穩(wěn)定 College of Life Sciences ? 2)發(fā)酵培養(yǎng)基 ? 制工業(yè)發(fā)酵培養(yǎng)基時(shí)的一般要求為: ? ①營養(yǎng)物質(zhì)的組成較豐富 ? ②在一定條件下,所采取的各種原材料彼此之間不能產(chǎn)生化學(xué)反應(yīng),理化性質(zhì)相對(duì)穩(wěn)定 ? ③黏度適中,具有適當(dāng)?shù)臐B透壓 ? ④原材料的品種和濃度與代謝產(chǎn)物生物合成中的調(diào)節(jié)關(guān)系 ? ⑤生產(chǎn)過程中的問題 ? ⑥質(zhì)優(yōu)價(jià)廉,成本低。 ? ②增加通氣量。 ? 1. 添加誘導(dǎo)物 ? ? ? College of Life Sciences ? 發(fā)酵動(dòng)力學(xué)主要研究在發(fā)酵過程中細(xì)胞生長速度、產(chǎn)物生成速度、基質(zhì)消耗速度以及環(huán)境因子對(duì)這些速度的影響。 College of Life Sciences ? 中期合成型是指:酶的合成在細(xì)胞生長 — 段時(shí)間以后才開始,而在進(jìn)入細(xì)胞平衡期之后,酶的合成也終止。 Rx =dX/dt= 181。 D = u,細(xì)胞濃度恒定 。 討論 : ( 1)同步合成型:生長偶聯(lián)型 β =0, dE/dt=α 181。 ( 3)易于管理、減輕勞動(dòng)強(qiáng)度; ( 4)提高質(zhì)量。 College of Life Sciences 與游離細(xì)胞發(fā)酵大同小異,需特別注意的幾個(gè)問題: 固定化細(xì)胞的預(yù)培養(yǎng) 先預(yù)培養(yǎng),使固定在載體上的細(xì)胞生長繁殖,長好后,再用于發(fā)酵產(chǎn)酶,其培養(yǎng)基和工藝條件可以相同或不同。 二、固定化原生質(zhì)體發(fā)酵產(chǎn)酶的工藝條件及其控制 ( 1)滲透壓的控制; ( 2)防止細(xì)胞壁的再生; ( 3)保證原生質(zhì)體的濃度。 解決辦法: ( 1)加大通氣量(強(qiáng)烈攪拌會(huì)破壞固定化細(xì)胞); ( 2)改變固定化載體,如少用瓊脂等對(duì)氧擴(kuò)散不利的載體; ( 3)過氧化氫酶與細(xì)胞共固定化,培養(yǎng)基加入適量的 H2O2; ( 4) 降低培養(yǎng)基的濃度,以降低培養(yǎng)基的粘度。 由動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)生產(chǎn)的酶有膠原酶,血纖蛋白溶酶原活性劑等。X 有阻遏存在時(shí), α =0,無酶產(chǎn)生 dE/dt= 0 阻遏解除后才開始合成酶 . College of Life Sciences ( 3)滯后合成型:非生長偶聯(lián)型, α =0 , dE/dt=βX ( 4)延續(xù)合成型:部分生長偶聯(lián)型, α ≠0 , β ≠0 dE/dt= α 181。 Dum X趨于零 。 從不同情況出發(fā)對(duì)其進(jìn)行修飾。 College of Life Sciences College of Life Sciences ( 1) mRNA的穩(wěn)定性; ( 2)培養(yǎng)基中阻遏物存在與否。 College of Life Sciences ? 微生物的生長過程可以用細(xì)胞濃度的變化來表示。 ? ④增加氣液比表面積。 ? (3) 最適溫度的選擇與控制 ? 溫度控制一般采用熱水升溫、
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