【正文】 利于基因的表達(dá)。 c、延伸（ 70℃ 75℃ ）：在 Taq酶的作用下，從引物的 5′端 → 3′端延伸，合成與模板互補(bǔ) 的 ________。 ： 人們需要的特定基因。 2。coliDNA連接酶只能將雙鏈 DNA片段互補(bǔ)的 之間連接起來，而不能將雙鏈DNA片段 之間進(jìn)行連接；而 T4DNA連接酶既可以“縫合”雙鏈 DNA片段互補(bǔ)的 ，又可以“縫合”雙鏈 DNA片段的 。如圖為四種限制酶BamHⅠ ， EcoRⅠ ， HindⅢ 以及 Bgl Ⅱ 的辨識序列。 A B C N C’B’A’ A’B’C’ N C B A A B C C’B’A’ A’B’C’ C B A A B B’A’ A’B’ B A 6 經(jīng)限制酶切割產(chǎn)生的 DNA片段末端通常有兩種形式： 和 。由于基因工程是在 水平上進(jìn)行設(shè)計(jì)和施工的，因此又叫做 。 ? 長度： 大多數(shù)限制酶的識別序列由 個(gè)核苷酸組成。用酶 B單獨(dú)酶切，結(jié)果如圖 2。 基因的的針線 ——DNA連接酶 大腸桿菌 T4噬菌體 T4DNA 2。切割 DNA時(shí)，用限制性內(nèi)切酶打開磷酸二酯鍵，此過程在加熱條件下（常用 37℃ ）下進(jìn)行，（氫鍵的鍵能很?。﹥蓚€(gè)切點(diǎn)之間的氫鍵不用解旋酶便會自動斷開（其它部位的氫鍵不會打開，因?yàn)槠渌课蝗杂辛姿岫ユI這種相當(dāng)于連接骨架的鍵的支持）。 使用運(yùn)載體的目的 用它作為運(yùn)載工具，將目的基因送到宿主細(xì)胞中去。 第二步：將反應(yīng)體系降溫至 55～ 60 ℃ ，使兩種引物分別與模板 DNA鏈 3′ 端的互補(bǔ)序列互補(bǔ)配對，這個(gè)過程稱為復(fù)性。此法目前爭議頗多，嚴(yán)格來講不算 基因工程。 過程： 構(gòu)建表達(dá)載體（重組 Ti質(zhì)粒） 轉(zhuǎn)入農(nóng)桿菌 導(dǎo)入植物細(xì)胞 目的基因插入植物細(xì)胞染色體 DNA中 培養(yǎng)再生成植株 篩選出表現(xiàn)新性狀的植株 根據(jù)農(nóng)桿菌可將目的基因?qū)腚p子葉植物的機(jī)理，你能分析出農(nóng)桿菌不能將目的基因?qū)雴巫尤~植物的原因嗎？若想將一個(gè)抗病基因?qū)雴巫尤~植物，如小麥，從理論上說，你應(yīng)該如何做？ 根瘤農(nóng)桿菌具有趨化性，即植物的受傷組織會產(chǎn)生一些糖類和酚類物質(zhì)吸引根瘤農(nóng)桿菌向受傷組織集中。 （ 4℃ ） 因?yàn)榇竽c桿菌等細(xì)菌的細(xì)胞壁成分主要是肽聚糖，因此一般要先用 Ca2＋ 處理，以增加細(xì)菌細(xì)胞壁的通透性 。用限制性核酸內(nèi)切酶切割煙草花葉病毒的核酸 B。 ，將蘇云金芽孢桿菌的抗蟲基因?qū)朊藁?xì)胞并成功表達(dá)，培育出了抗蟲棉。 基因槍法 植物組織培養(yǎng) 脫分化 再分化 耐鹽 (目的 )基因 一定濃度的鹽水澆灌 (2022請回答下列問題： (3)用圖中的質(zhì)粒和外源 DNA構(gòu)建重組質(zhì)粒，不能使用SmaⅠ 切割，原因是：______________________________ ______ SmaⅠ 會破壞質(zhì)粒的抗性基因和外源 DNA中的目的基因 2022請回答下列問題： (6)現(xiàn)使用 BamHⅠ 和 HindⅢ 兩種限制酶同時(shí)處理質(zhì)粒、外源DNA，并經(jīng)拼接獲得的重組質(zhì)粒進(jìn)行再次酶切，假設(shè)所用的酶均可將識別位點(diǎn)完全切開，請根據(jù)圖 2中標(biāo)示的酶切位點(diǎn)及表所列的識別序列，對以下酶切結(jié)果作出判斷。 ②假設(shè)Ｓ基因的一條鏈 A和 T的總量為 2400個(gè)，占該鏈堿基的 60%，用 PCR擴(kuò)增該基因，該基因復(fù)制 n次共要 dGTP 個(gè)。 （ 4）請用現(xiàn)代生物進(jìn)化理論分析基因工程育種與傳統(tǒng)育種技術(shù)相比具有哪些優(yōu)點(diǎn)。 探針制備： 放射性同位素 (如 32P)、熒光分子 等標(biāo)記的 DNA分子； 原 理：利用 DNA分子雜交原理 ； 是指把健康的外源基因?qū)胗谢蛉毕莸募?xì)胞中，達(dá)到治療疾病的目的。此方法的特點(diǎn)是 快速 、 靈敏 ， 1噸水中有 10個(gè)病毒也能檢測出來。 ： ： 了解蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)和功能的關(guān)系 基因工程 ： 定向改造天然蛋白質(zhì)，創(chuàng)造自然界不存在的蛋白質(zhì) ： 對編碼蛋白質(zhì)的基因進(jìn)行改造 ： 根據(jù)蛋白質(zhì)被改造部位的多少，可以將這種改造分為 “ 大改 ” 、 “ 中改 ” 和 “ 小改 ” ① 大改： 制造出自然界中不存在的全新蛋白質(zhì) ② 中改： 在蛋白質(zhì)分子中替代一個(gè)肽段或一個(gè)特定的結(jié)構(gòu)域 ③ 小改： 改造蛋白質(zhì)分子中的幾個(gè)氨基酸的殘基 蛋白質(zhì)工程的起點(diǎn)是蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)和功能，終點(diǎn)是到改造的蛋白質(zhì) 蛋白質(zhì)工程以基因工程為基礎(chǔ)，因此，它與基因工程本質(zhì)上沒有區(qū)別。還可以在不改變胰島素活性部位結(jié)構(gòu)的前提下，增強(qiáng)其他部位結(jié)合強(qiáng)度，使之難以被酶所破壞，從而增強(qiáng)其穩(wěn)定性。 √ 判斷： √ √ 蛋白質(zhì)工程的基本操作步驟正確的是（ ） 蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)分析 蛋白質(zhì)功能分析 基因工程 蛋白質(zhì)純化 A、 1234 B、 2134 C、 2314 D、 3124 B 下列說法正確的是（ ） 人類需要的蛋白質(zhì)，所以二者沒有區(qū)別。具體方法：將能分解三種烴類的 假單孢桿菌 的基因都轉(zhuǎn)移到能分解另一種烴類的假單孢桿菌內(nèi)，創(chuàng)造出了能同時(shí)分解四種烴類的“超級細(xì)菌”。 1） 雞蛋白基因 在大腸桿菌和酵母菌中表達(dá)獲得成功。 ? ，最理想的表達(dá)場所是哪里？ [乳腺 (房 )生物反應(yīng)器 ] (房 )生物反應(yīng)器？ 以動物乳房作為生產(chǎn)藥物的反應(yīng)器稱為乳房生物反應(yīng)器 3）從乳汁中源源不斷獲得目的基因的產(chǎn)物的同時(shí)，轉(zhuǎn)基因動物又可無限繁殖。 ④將基因表達(dá)載體導(dǎo)入番茄的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法和 等。 ②采用 EcoRⅠ 和 HindⅢ 酶切，得到 _____種 DNA片段。請回答下列問題： (4)與只使用 EcoRⅠ 相比較，使用 BamHⅠ 和 HindⅢ 兩種限制酶同時(shí)處理質(zhì)粒、外源 DNA的優(yōu)點(diǎn)在于可以防止_______。請回答下列問題： (1)一個(gè)圖 1所示的質(zhì)粒分子經(jīng) SmaⅠ 切割前后，分別含有 ____個(gè)游離的磷酸基團(tuán)。我國科學(xué)家應(yīng)用耐鹽基因培育出了耐鹽水稻新品系。將重組 DNA分子導(dǎo)入煙草原生質(zhì)體 D。 ４、進(jìn)行個(gè)體生物學(xué)水平鑒定： Ａ、抗蟲或抗病檢測： 對抗蟲或抗病基因?qū)胫参锛?xì)胞后是否賦予植物 相關(guān)的抗性所進(jìn)行的接種實(shí)驗(yàn)，以確定是否具有 抗性以及抗性的程度。 如果想將一個(gè)抗病毒基因轉(zhuǎn)入小麥，也可以用農(nóng)桿菌，但要注意兩點(diǎn)：①要選擇合適的農(nóng)桿菌菌株，因?yàn)椴皇撬械霓r(nóng)桿菌菌株都可以侵染單子葉植物；②要加趨化和誘導(dǎo)的物質(zhì)，一般為乙酰丁香酮等，目的是使農(nóng)桿菌向植物組織的受傷部位靠攏（趨化性）和激活農(nóng)桿菌的 Vir區(qū)（誘導(dǎo)）的基因，使