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Internaitional Journal of Agriculture amp。我國在馬鈴薯甲蟲病原菌與生物防治方面還沒有系統(tǒng)的研究報(bào)道。因此，根據(jù)本研究結(jié)果認(rèn)為球孢白僵菌和輪枝菌很可能是馬鈴薯甲蟲的重要生防菌，但這一結(jié)論還需要到疫區(qū)應(yīng)用馬鈴薯甲蟲進(jìn) 行試驗(yàn)測定而得到驗(yàn)證。迄今，人們對球孢白僵菌及其害蟲生物防治作用已有大量的研究，有該菌制成的生物殺蟲劑在國內(nèi)外已大量使用。分別從這些死亡蠶體上挑取菌體在顯微鏡下檢查，它們分別為接種的病原菌。由此表可以初步估計(jì)這幾種馬鈴薯蟲生真菌對家蠶的致病效果，在 1089 個(gè) /mL 的孢子濃度下，可以計(jì)算出使家蠶的累積死亡率達(dá)到某一個(gè)值所需要的時(shí)間，時(shí)間越短致死效果越好，致病力越強(qiáng)。通過分離純化得 36 個(gè)真菌菌株，經(jīng)顯微鏡觀察初步鑒定，它們分別為白僵菌屬 (Beauveria)19 株，輪枝菌屬 (Verticillium)4 株，鐮刀菌屬 (Fusarium)2 株，曲霉屬 (Aspergillus)2 株、木霉屬 (Trichoderma)2株，鏈格孢屬 (Alternaria)2株，青霉屬 （ Penicillium） 1株，未鑒定真菌 4株 (表 2)。 將試蟲置于直徑 15cm 的滅菌培養(yǎng)皿（培養(yǎng)皿內(nèi)墊有一層吸水紙，每皿 50西 南 大 學(xué) 本 科 畢 業(yè) 論 文 12 頭） 中，用移液槍吸取已配置好的孢子懸浮液均勻噴灑在蠶體壁周圍，以充分接觸為宜。 供試家蠶：致病性實(shí)驗(yàn)采用家蠶 (Bombyx mori)的二齡幼蟲，由西南大學(xué)生物技術(shù)學(xué)院家蠶研究室提供。 在入侵 物種 病死蟲體上 尋找一種自然生物控制因子 （病原菌） 是國際上普遍使用的 昆蟲生防菌研究策西 南 大 學(xué) 本 科 畢 業(yè) 論 文 10 略。 西 南 大 學(xué) 本 科 畢 業(yè) 論 文 9 2 引 言 馬鈴薯甲蟲 （ Leptinotarsa decemlineata Say） 屬鞘翅目葉甲科， 又稱馬鈴薯葉甲或科羅拉多馬鈴薯甲蟲 ,首次在 Colorado報(bào)道 [29]，是重要的外來入侵物種和檢疫性害蟲 [30]，該蟲 1年發(fā)生 2個(gè)完整世代及 1個(gè)不完整的第 3代 ， 世代重疊現(xiàn)象嚴(yán)重，馬鈴薯甲蟲以成蟲和幼蟲咬食馬鈴薯 、 茄子等茄科蔬菜（如圖 2） 。世界上已陸續(xù)登記的有 8種殺蟲真菌 26種商品 ,分屬于 12個(gè)國家 (王成樹 , 1996)[16]。多年來 ， 人們所注意的蟲生真菌主要是集中于常見的、能自然感染昆蟲的真菌上。它受寄主種類、菌種來源、孢子劑量、溫度等多種因素影響 [28]。 西 南 大 學(xué) 本 科 畢 業(yè) 論 文 6 昆蟲病原真菌殺蟲機(jī)理 昆蟲病原真菌 的 侵入機(jī)制 昆蟲病原真菌的入侵是機(jī)械壓力和酶共同作用的結(jié)果。在北美和歐洲則用于馬鈴薯等多種作物的害蟲防治 [21]。 在這一理論基礎(chǔ)和農(nóng)業(yè)可持續(xù)發(fā)展的戰(zhàn)略要求下，要綜合利用農(nóng)業(yè)生態(tài)系統(tǒng)中的自然資源與生物資源，盡可能地減少外部物質(zhì)和能力 的 消耗，把害蟲控制在經(jīng)濟(jì)損害水平 [12]以下，但允許害蟲 在一定程度上 的存在。此后，美國農(nóng)業(yè)部為了防治柑桔紅圓蚧 [Aonidiella aurantii(Maskell)]等， 18891892先后從澳大利亞、新西蘭等地引進(jìn) 46種瓢蟲，其中有兩種瓢蟲 （ Orcus chalybeus, Lindoras laphanthae） 起到了控制紅圓蚧的作用[6]。 而我國是在這方面研究最早的國家 ， 最早是在 1895 年以前，即曾從 Cayenus 輸引一種蟾蜍 (Bufo vmarinus)到南美洲的 Martinique，防治甘蔗蠐螬 [6]等害蟲。 silkworm。白僵菌菌株的致病力最強(qiáng)，如 MJ07 接種后 11d 的蟲體 累積死亡率達(dá)到 %，致死中時(shí) (LT50)為 ；輪枝菌的致病力也很強(qiáng)，如 MJ20 菌株接種后 11d 的累積死亡率和致死中時(shí) (LT50)分別為 %和 。 參加課題： .................................................. 錯(cuò)誤 !未定義書簽。 they caused more than 75% of accumulated death of the worms 11 d after inoculation (LR11d) and the time at which 50% of inoculated worms were killed (LT50) were d. The most pathogenic isolate was the MJ07 of B. bassiana.。長期以來，人們采取了多種方法來防治有害入侵 生物 ，如 人工控制、機(jī)械 殺蟲 、替代控制、化學(xué)防治等，但這些方法只能實(shí)現(xiàn)外來 生物 的短期控制，且需要大量的 人力 、 物 力， 且 一般 費(fèi)用較高，有時(shí)甚至還會危害周圍環(huán)境及人類健康 ， 特別是近年來化學(xué)農(nóng)藥的使用造成的不良后果比較嚴(yán)重 。 害蟲生防的目的是通過直接降低目標(biāo)昆蟲在其危害地區(qū)的密度和蓋度，減少其分布范圍，從而間接地提高本地種的多度和生物多樣性，恢復(fù)生態(tài)系統(tǒng)功能，直接減少農(nóng)產(chǎn)品損失，提高經(jīng)濟(jì)社會效益。實(shí)際上，害蟲種群數(shù)量增長至能危害農(nóng)作物生產(chǎn)、被視為有經(jīng)濟(jì)重要性的害蟲種類并不是很多。我國對蟲生真菌的研究有悠久的歷史，其《神農(nóng)本草經(jīng)》一書在 2022 年前就記載了白僵蠶的重要藥用價(jià)值。 昆蟲不易產(chǎn)生抗性 病原真菌的侵染機(jī)制不同于傳統(tǒng)的化學(xué)農(nóng)藥，涉及多種酶的協(xié)同作用 [25]，而且真菌侵染昆蟲后能夠分泌多種毒素，通過吸收蟲 體營養(yǎng)成分、妨礙血液循環(huán)、積累代謝產(chǎn)物等方式，導(dǎo)致昆蟲新城代謝紊亂致死，其致死的因素是以生物作用為主 ,因此不易使害蟲產(chǎn)生抗藥性。 真菌以孢子附著在昆蟲體壁上 ， 萌發(fā)產(chǎn)生芽管 ， 并分泌一些降解蛋白質(zhì)和幾丁質(zhì)的酶類物質(zhì) ， 從芽管頂端的附著胞長出侵染絲穿透昆蟲體表進(jìn)入血腔 ， 在血腔中斷裂為菌絲段 ， 菌絲段以芽殖方式大量繁殖同時(shí)吸取昆蟲體內(nèi)營養(yǎng)致使昆蟲死亡 。有些真菌不易繁殖、產(chǎn)孢量低、孢子活力差、加工成制劑后穩(wěn)定性差，或多代繁殖后致病力下降。流行病本身在時(shí)空上是一個(gè)復(fù)雜的動(dòng)態(tài)體系。真菌 殺蟲 劑與其它防治措施尤其是化學(xué)殺蟲 劑的配合使用，對其實(shí)際應(yīng)用有重要推動(dòng)作用。在目前的害蟲防治方法發(fā)展階段，對馬鈴薯甲蟲的防治以化學(xué)防治為主，但馬鈴薯甲蟲很容易產(chǎn)生抗藥性，其抗藥性產(chǎn)生 主要與體內(nèi)代謝酶系活性升高有關(guān) [33]。 我國擁有豐富的蟲生真菌資源，也是進(jìn)行生物防治最早的國家 [10]， 在馬鈴薯甲蟲生物 防治的研究和應(yīng)用 方面 具有較大的優(yōu)勢和前景 。 蠶體接種試驗(yàn) 選擇年齡結(jié)構(gòu)、生長狀況一致且健康的幼蟲用于試驗(yàn)。用 軟件和 Excel 進(jìn)行數(shù)據(jù)處理。 西 南 大 學(xué) 本 科 畢 業(yè) 論 文 14 表 2. 從感病馬鈴 薯甲蟲上分離獲得真菌菌株及其對家蠶的致病性 Table 2. Fungi solated from diseased adults of Colorado Potato Beetle and their pathogenicity to silkworm larvae 菌 株 Isolate 所屬真菌 種類 Fungal species 初見死亡時(shí)間 (d) Initial death at day 接種后 11d累積死亡 % (LR11d) 致死中時(shí) (LT50) (d) 癥狀特點(diǎn) Symptoms MJ01 B. basiana 5 僵蠶 ,病征明顯 MJ02 B. basiana 6 僵蠶 ,病征明顯 MJ03 B. basiana 5 僵蠶 ,病征明顯 MJ04 B. basiana 6 僵蠶 ,病征明顯 MJ05 B. basiana 5 僵蠶 ,病征明顯 MJ06 Verticillium sp. 5 蟲體小，病證明顯 MJ07 B. basiana 5 僵蠶 ,病征明顯 MJ09 B. basiana 7 僵蠶 ,病征明顯 MJ09 B. basiana 5 僵蠶 ,病征明顯 MJ10 Verticillium sp. 6 僵蠶 ,病征明顯 MJ11 B. basiana 7 僵蠶 ,病征明顯 MJ12 B. basiana 8 僵蠶 ,病征明顯 MJ13 Penicillium sp. 未發(fā)病 MJ14 Alternaria sp. 未發(fā)病 MJ15 Aspergillus sp. 未發(fā)病 MJ16 Aspergillus sp. 未發(fā)病 MJ17 B. basiana 7 僵蠶 ,病征明顯 MJ18 B. basiana 6 僵蠶 ,病征明顯 MJ19 B. basiana 5 僵蠶 ,病征明顯 MJ20 Verticillium sp. 5 蟲體小，病證明顯 MJ21 unidentified 未發(fā)病 MJ22 Fusarium sp. 9 蟲體小，白色菌絲 MJ23 B. basiana 6 僵蠶 ,病征明顯 MJ24 B. basiana 6 僵蠶 ,病征明顯 MJ25 B. basiana 7 僵蠶 ,病征明顯 MJ26 Aspergillus sp. 未發(fā)病 MJ27 Fusarium sp. 9 蟲體小，白