【正文】 環(huán)脂質(zhì)體， 平均粒徑為 100nm，藥物包封率為 ％ 。謝長(zhǎng)生等 [36]采用超細(xì) 粉碎技 術(shù)制備出粒徑小于 100 nm的納米雄黃，實(shí)驗(yàn)表明納米顆粒表現(xiàn)出尤為突出的生物效應(yīng)。 3 原藥材 當(dāng)原藥材直接入藥或作為提取原料時(shí)，為了提高藥物的生物利用度和提高藥材的利用率，常采用超細(xì)粉碎技術(shù)來制備納米粉體。其平均粒徑 ，與原料藥相比較， 25℃ 時(shí)飽和溶解度提高了 6倍。 有效成分的外用納米制劑常采用具有高擴(kuò)散性和皮膚滲透性的微乳載藥系統(tǒng)。 98nm，包封率分別為 47％、 75％。 植物藥 植物藥是中藥中數(shù)量最多、應(yīng)用最廣的一類藥，也是采用納米技術(shù)研究最多的一部分。將莪術(shù)油制成β－環(huán)糊精包合物膠囊劑，可矯臭矯味，增大其水溶性，提高其生物利用度，防止莪術(shù)油揮發(fā)，增強(qiáng)莪術(shù)油的穩(wěn)定性 [18]。 對(duì)植物生理活性成分和有效部位用超音速干燥技術(shù)制成納米級(jí)包囊，可將現(xiàn)有的復(fù)方中藥改造成納米級(jí)粉體，進(jìn)一步加工成針劑、片劑、貼劑等。一般制劑及粉碎技術(shù)不能將其孢子破壁， 也不能提取到其中的脂質(zhì)活性物質(zhì)。而納米藥物表面吸附吐溫－ 80等表面活性劑后，可使腦內(nèi)濃度顯著增高，有人認(rèn)為這是由于 藥物躲避了網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)的吞噬作用，在腦血管蓄積的機(jī)會(huì)大大增加，從而使其更易通過血腦屏障。納米級(jí)的載藥徽粒進(jìn)入機(jī)體后，大部分聚集在單核吞噬系統(tǒng) (MPS) 豐盈的組織中，尤其是肝臟，可作為肝靶向給藥系統(tǒng)的載體。例如，將黃連原料經(jīng)不同方法粉碎后分別得到粒徑 D50分別為 、 、 體、超微粉體和納米粉體，分別進(jìn)行體外溶出度試驗(yàn)，結(jié)果溶出 4h時(shí)黃連納米粉體和超微粉體的小檗堿溶出量比常規(guī)粉體分別增加 %和 %，而且，隨著黃連粉體粒徑的減小，小檗堿的溶出速率加快，黃連超微粉體和納米粉體中小檗堿溶出速率比常規(guī)粉體大，而納米粉體比超微粉體表現(xiàn)得更加明顯 [6]。把中藥粉末或溶液包埋在直徑為納米級(jí)的微粒中，其滲透性或溶解度將大大提高。 中藥納米制劑也逐漸成為專利申請(qǐng)的熱點(diǎn)，從 2022 年開始的連續(xù) 3 年內(nèi)，納米技術(shù)應(yīng)用于中藥領(lǐng)域的申請(qǐng)每年約有 40 項(xiàng)左右，并且呈穩(wěn)態(tài)的上升趨勢(shì)。 1997 年，《中共中央國(guó)務(wù)院關(guān)于衛(wèi)生改革與發(fā)展的決定》明確提出了“實(shí)現(xiàn)中醫(yī)藥現(xiàn)代化” 的戰(zhàn)略目標(biāo)，在傳統(tǒng)中藥產(chǎn)業(yè)中引入與 應(yīng)用納米技術(shù)，將能有效地改善中藥制備技術(shù)及劑型的不足，使傳統(tǒng)中藥向產(chǎn)業(yè)化、現(xiàn)代化、國(guó)際化方向發(fā)展。 隨著納米技術(shù)對(duì)藥物研究領(lǐng)域的不斷滲透和影響，納米中藥、天然藥物的研究開發(fā)已經(jīng)具有了理論上的可能性和實(shí)踐中的可行性。 本章將對(duì)中藥 納米制劑 的特點(diǎn)、制備方法、有待解決的問題等方面加以闡述。楊祥良等 [4] 利用惰性氣氛的高能球磨裝置，成功地制備了粒徑小于 100nm的納米石決明。丁志平等[7]進(jìn)行不同粒徑黃連粉在大鼠體內(nèi)藥代動(dòng)力學(xué)的研究結(jié)果顯示，黃連納米粉體組、超微粉體組與常規(guī)粉體比較 A和 Ka值顯著增大，而 Ke值無顯著差異 (P )，以納米粉體中小檗堿的生物利用度為 100%計(jì)，則超微粉體和常規(guī)粉體的相對(duì)生物利用度分別為 %和 %，表明黃連超微粉體與納米粉體的生物利用度比常規(guī)粉體大。在普通納米粒表面通過物理吸附或共價(jià)結(jié)合一層或多層親水性聚合物，制成 “隱形 ”納米粒 (stealth nanoparticles)，可避開肝臟巨噬細(xì)胞尤其是枯否氏 (Kupffer)細(xì)胞 的吞噬，延長(zhǎng)在血液中的循環(huán)時(shí)間 [9]。通過在納米粒表面連接和血腦屏障具有高親和力的配體，可能實(shí)現(xiàn)納米粒的腦內(nèi)定位給藥，藥物在腦內(nèi)緩慢釋放，避免了其外周的毒性 [12]。現(xiàn)在通過 用高氣流粉碎機(jī)粉碎至粒徑呈納米狀態(tài)時(shí)，可將 孢 子破壁，使一部分原來不能釋放出來的成分及功能因子被釋出，并 采用超臨界二流體萃取技術(shù)，成功地萃取出靈芝孢子脂質(zhì)活性物質(zhì)， 從而呈現(xiàn)新的療效 [14]。 徐向田 [16]發(fā)明的一種可防治非典的納米中藥，就是將金銀花、黃芪、冬凌草等中藥炮制后，采用微波萃取，減壓濃縮和超高速射流技術(shù)，制成納米中藥粉劑。 納米中藥的制備 納米中藥的制備是研究納米中藥的最基礎(chǔ)也是最重要的問題。目前納米技術(shù)應(yīng)用于中藥領(lǐng)域的專利申請(qǐng)中，植物藥約占 ％。兩種納米粒都緩慢地釋放藥物， 24 h后分別釋放藥物總量的 8％和 20％，且都可以延長(zhǎng)紫杉醇的體內(nèi)滯留時(shí)間， Brij78— SLN， F68一 SLN和紫杉醇注射劑的消除半衰期分別為 ， h。 Hass A[23]等 用肉豆蔻酸異丙酯，卵磷脂和 PEG200制備了 O／ W型毛果云香堿微乳滴眼劑。固體分散技術(shù)是將藥物高度分散于惰性的載體中，形成一種以固體形式存在的分散體。由于納米藥物粒子具有較高的表面能，極易產(chǎn)生團(tuán)聚現(xiàn)象，具有化學(xué)不穩(wěn)定性，同時(shí)其制備設(shè)備要求相當(dāng)高，因此，對(duì)于大多數(shù)植物藥 而言采用超細(xì)粉碎技術(shù)難以制備得到納米級(jí)的粉體。皮振邦等 [37]采用微波條件下的化學(xué)分散法來制備納米爐甘石．即在高頻電磁場(chǎng)的作用下，加入化學(xué)分散劑， 促使碳酸鋅 (爐甘石主要成分 )顆粒分散，所得到的納米級(jí)粉體粒徑 分布為 50～ 100 nm。 中藥復(fù)方 中藥復(fù)方是充分體現(xiàn)中醫(yī)藥理論的代表，其療效經(jīng)過幾千年的應(yīng)用已得到充分肯定。它具有抗炎、免疫抑止、抗腫瘤、抗生育等藥理活性，是雷公藤中的主要有效成分之一 [4345]。 1 雷公藤內(nèi)酯醇微乳 凝膠劑 微乳（ Microemulsion）作為一種新型的納米給藥系統(tǒng)，具有穩(wěn)定性好、溶解能力強(qiáng)、制備簡(jiǎn)單、易工業(yè)化、可用濾過法滅菌等優(yōu)點(diǎn)，已用于多種給藥途徑的研究?；旌嫌?、水兩相，攪拌均勻，即得雷公藤內(nèi)酯醇微乳。 177。 177。 ME7 177。高速離心實(shí)驗(yàn)表明微乳具有很好的物理穩(wěn)定性?？疾炝?1％薄荷腦的促透皮能力以及載藥量對(duì)微乳中藥物的透皮速率影響，結(jié)果如表 93 所示。 表 93 不同載藥量微乳的透皮速率 微乳 透皮速率 (μg ME3 177。 ME6 177。由此可知，微乳作為雷公藤內(nèi)酯醇的載體具有 良 好的應(yīng)用前景。 表 94 各微乳處方的理化性質(zhì) 對(duì)照組 ： 含 20％丙二醇的卡波姆水凝膠劑 由表 94 可知，各處方在 15℃ 條件下保存 24 小時(shí)后，均因水的凍結(jié)而變成乳白色固體，這表明微乳凝膠劑應(yīng)在保存在 0℃ 以上。g 聚合反應(yīng)條件可調(diào)節(jié)聚合物在體內(nèi)的降解，提高療效，降低不良反應(yīng)，提高藥物的穩(wěn)定性。納米粒可降低肝和腎毒性可能是由于聚集在肝上納米粒中的藥物或相對(duì)較少聚集在腎上納米粒中的藥 物緩慢釋放的結(jié)果。通過比較它們?cè)?5d、 10d、 15d 的相對(duì)濃度，結(jié)果顯示， TP 對(duì)照組的尿素、尿囊素、肌酸和肌酸酐濃度明顯低于 TPPLANPs，而 DMG、 TMAO、乙酸、乳酸和甘氨酸濃度明顯高于后者，提示納米組降低肝臟、腎臟和睪丸的毒性主要是改變了這些代謝物的相對(duì)濃度變化而引起的。體外、體內(nèi)試驗(yàn)已證明有抗腫瘤活性，能抑制微管聚合，抑制細(xì)胞核有絲分裂，使其停止于中期。將表面活性劑溶于熱水（與熔融體同溫），形成均勻的水相。 圖 913 鬼臼毒素 SLN 的粒徑分布圖 .（左側(cè)為高壓乳勻法，右側(cè)為超聲波法） 鬼臼毒素 SLN 皮膚靶向性研究 用鬼臼毒素 SLN（ 濃度為 ％ ）、 市售的 ％酊劑和自制的 ％酊劑進(jìn)行經(jīng)皮滲透研究，比較鬼臼毒素 SLN 的皮膚靶向 能力。 而 載藥 SLN 和 ％酊劑的接收液中均無鬼臼毒素， 這表明藥物均 未 能 透過皮膚，主要滯留在 表皮 中 ，但 SLN 的滯留量更 大，皮膚靶向性最強(qiáng) 。而將脂質(zhì)體鬼臼毒素涂膜劑分別置于 4℃冰箱中和室溫下 6個(gè)月，外觀均未見沉淀、變色等變化。在同一時(shí)問用頸椎脫臼法處死大鼠．剪取涂藥中心區(qū)域大小約 cm的皮膚組織．用 PBS液洗凈標(biāo)本表面的殘留藥物后，固定于福爾馬林液中過夜。 水飛薊素 水飛薊素 (silymarin)是從中藥水飛薊中提取得到的有效部位，其中包括水飛薊賓 (silybin)、水飛薊寧 (silydianin)、水飛薊亭 (silychristin)和異水飛薊賓(istrosilybin)，其中最主要的活性成分是水飛薊賓。 5)℃ 水相中，持續(xù)攪拌 2 h，形成初乳。 %。 圖 915 血藥濃度經(jīng)時(shí)曲線 實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，口服 150 nm的粒子的 AUC分別是 500， 1 000 nm的 ， 倍 (P)，說明納米粒子的粒徑對(duì)粒子在胃腸道的吸收有極大的影響，這是因?yàn)槲改c道的各個(gè) 部位對(duì)于粒子的吸收率是不一樣的，在人和動(dòng)物的小腸存在著與免疫有關(guān)的特定組織區(qū)域，如派伊爾氏集結(jié) (peyer’s patches， PP)，占整個(gè)腸道黏膜的 25％左右。血漿中藥物濃度經(jīng)時(shí)曲線見圖916。 ） %。 2)℃、相對(duì)濕度 (75177。 當(dāng)油狀液體藥物制備成納米級(jí)脂質(zhì)分散體后，其主要吸收方式為胞飲作用。5 ℃ 、 120 Pa條件下，高壓乳勻 3次，然后迅速冷至室溫，得到乳光明顯的澄明莪術(shù)油 一 SLN混懸液， 4℃ 保存?zhèn)溆?。在攪拌下加入剩余處方量的蒸餾水，超聲 6min。重慶醫(yī)科大學(xué)楊凱 [6972]等制備納米微粒 —— 葫蘆素 BE聚乳酸納米微粒 (Cucurbitaein BE polylactic acid nanopartieales， CuBEPLANP) 凍干針劑，并證明了其行口腔癌周注射后對(duì)頸淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移灶具有靶向性的抗癌緩釋作用。 CuBEPLANP凍干針劑體外累積釋藥曲線見圖 922。凍干針劑皮下和靜脈注射的 LD50 值分別為 177。結(jié)果 CuBEPLANP凍干針劑局部肌肉注射后注射部位與對(duì)照部位肌肉無明顯差異， CuBE組中有 3只注射部位肌肉組織有充血現(xiàn)象，直徑在 。雄黃的主要成分為二硫化二砷，難溶于水，服用方法一般是將其研磨成粉末入藥，在胃腸道不易分解，僅極少部分被吸收。兩組家兔分別單劑量口服 50mg，比較納米級(jí)雄黃粉體和傳統(tǒng)雄黃在兔體內(nèi)的藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù) 。 黃連 中藥黃連為毛茛科植物黃連 Coptis chinensis Franch、三角葉黃連 Coptis deltoiden et Hsiao或云連 Coptis teeta ，藥用歷史久遠(yuǎn)，始載于《神農(nóng)本草經(jīng)》。經(jīng)測(cè)定黃連常規(guī)粉體、超微粉體和納米粉體的粒徑 D50分別為 、 、 ， D90分別為 、 nm。不同粒徑黃連粉體中小檗堿體外溶出速度曲線見圖 925。黃連的臨床應(yīng)用非常廣泛，在含黃連的常用中成藥中，有許多是以黃連原藥粉直接入藥，如香連丸、化毒散、化痔靈片等。 徐輝碧等 [74]以人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞系 ECV 304作為研究對(duì)象，開展了中藥雄黃對(duì)其增殖作用影響的尺寸效應(yīng)研究，觀察了不同粒徑 ( 100nm, 150nm, 200nm, 500nm)的雄黃顆粒對(duì) ECV－ 304細(xì)胞存活率、凋亡的影響。華中科技大學(xué)的謝長(zhǎng)生等 [34]發(fā)明了納米雄黃的制備方法，目的在于提高中藥雄黃的藥效，以及雄黃顆粒在納米狀態(tài)的更高的抗腫瘤作用。 細(xì)胞生物學(xué) 用四唑鹽顯色法 (MTT法 )檢測(cè)用不同劑量的 CuBEPLANP和 CuBE在 1~8 d內(nèi) 8個(gè)時(shí)間點(diǎn)對(duì) Tca8113和 BcaCD885的抗癌活性。 mg/kg； CuBE皮下和靜脈注射的 LD50值分別為 8. 63 mg/ kg177。表明 CuBE－ PLA－ NP在 0～ 24 h內(nèi)為突釋期，藥物釋放較快，這有利于微粒進(jìn)入體內(nèi)后在較短的時(shí)間內(nèi)使藥物達(dá)到有效的藥物濃度，而 24～ 168 h為緩釋期，這保證了在較長(zhǎng)時(shí)間內(nèi)能維持藥物的有效濃度。將CuBEPLANP 凍干針劑用 γ 射線消毒備用。 表征 采用動(dòng)力 光散射法測(cè)定其平均粒徑為 (177。 表征 取莪術(shù)油一 SLN混懸液適量，加適量蒸餾水稀釋，滴加在覆蓋碳膜的銅網(wǎng)上，在透射電鏡下觀察納米粒的形態(tài) （見圖 920）為 類球形實(shí)體粒子，且粒徑均勻。 沈陽藥科大學(xué)、南京工業(yè)大學(xué)等單位對(duì)莪術(shù)油納米制劑進(jìn)行了研究。結(jié)果表明，水飛薊素自微乳液的外觀始終保持紅棕色均一透明，未見析出物質(zhì)， 3min內(nèi)可在 100倍量的 0． 1mol／ L鹽酸中基本乳化完全， lO～ 15min溶出完全。見圖 917 圖 917 水飛薊素脂質(zhì)體透射電鏡顯微照片 藥代動(dòng)力學(xué) 大鼠灌胃給予水飛薊素脂質(zhì)體混懸液血藥濃度經(jīng)時(shí)曲線見圖 918。以肝臟為靶器官，各項(xiàng)靶向性評(píng)價(jià)指標(biāo)計(jì)算結(jié)果顯示，肝臟的 re值最大 ()，說明 SM－ SLN對(duì)于肝臟的靶向性最好，其次是脾、肺等器官，而對(duì)于腎則不具有靶向性；另外，肝臟中的 ce值也最大 ()，表明 SM－ SLN可以明顯改變藥物在肝臟中的分布。 肝靶向性研究 取昆明種小鼠 120只，體 重 (20177。5) ℃ 水浴下，溶于適量無水乙醇后，揮盡溶劑，迅速移至 － 2O ℃ 冰箱中冷凍 2 h。其平均粒徑為 168177。然而由于它難溶于水，脂溶性也差，因此口服生物利用度低。 采用激光共聚焦顯微成像儀 (CLSM)掃描，觀察單位面積鬼臼毒素的熒光量。 將制備的鬼臼毒素脂質(zhì)體混懸液分別置于 37℃和 100℃條件下 1小時(shí)后測(cè)定其包封率，結(jié)果前者包封率下降 ％，后者下降 ％。再加入 pH7． 4的 PBS液 5ml，超聲水浴 3min，得到乳白色凝膠，再置于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上減壓蒸發(fā) 除去有機(jī)溶劑形成鬼臼毒素脂質(zhì)體混懸液 (a液 )。雖然 ％酊劑的藥物含量較高，但其皮膚滯留量卻