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生化分離工程2萃取分離(完整版)

2024-11-21 15:00上一頁面

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【正文】 ? SCCO2滲透力強,能快速滲入細胞內(nèi)并達到細胞內(nèi)外壓力平衡。許多酶蛋白在 SCCO2中不失去活性,且有催化功能。 2021328 45 SCCO2萃取技術(shù)的應(yīng)用 ? 生物活性物質(zhì)和生物制品的提取 ? SCCO2萃取技術(shù)主要應(yīng)用于有害成分成分的脫除、有效成分的提取、食品原料的處理等幾個方面。 2021328 41 圖 229 超臨界 CO2萃取與精密分餾塔聯(lián)用示意圖 2021328 42 ② 超臨界萃取與尿素包合技術(shù)聯(lián)用 ? 又稱超臨界萃取結(jié)晶法 。但傳統(tǒng)分離釜只是一個空的高壓容器,利用不同分離壓力來達到分步解析結(jié)果,所以產(chǎn)品往往是不同餾分的混合物。圖 226表示基本流程示意圖。s的范圍內(nèi),與通常的有機溶劑粘度( ~ ) 103 Pa ? 在超臨界流體萃取技術(shù)的應(yīng)用中,某些場合的目的是得到萃取物,而在另一些場合下,是為獲得萃取后的余留物質(zhì),萃取物則為其次。即此過程同時利用了蒸餾和萃取的現(xiàn)象 —— 蒸汽壓和相分離均在起作用。 ? 隨著蛋白質(zhì)分子量的增加, 分配系數(shù) KpI迅速下降,相對分子質(zhì)量 20210左右的蛋白質(zhì)的高效分離是可能的。這被認為是蛋白質(zhì)的 pH變性所造成的。 2021328 14 ? 以細胞色素 C、 溶菌酶 、 核糖核酸酶 a為例,考察它們從主體水相向反膠團內(nèi)微水相中的萃取或反方向的反萃取時靜電性相互作用以及 pH對這種作用的影響。 ? 同時也是一個 濃縮操作。 圖 214 膠團變化示意圖 2021328 8 ? 反膠團的制備 ? 即將含蛋白質(zhì)的水相與含表面活性劑的有機相接觸。 2021328 6 ? 反膠團的物理化學特性 ? CMC ( critical micelle concentration) ~ mmol/L的范圍內(nèi)。 ? 因此,反膠團可作為 ? 生物膜的簡化模型; ? 作為顯示酶類性質(zhì)的一種模型進行基礎(chǔ)性研究; ? 作為具有新型功能的疏水性反應(yīng)場; ? 作為酶和微生物的一種新型的固定化方法; ? 作為微小型的生物反應(yīng)器; ? 在生物技術(shù)領(lǐng)域中作為生理活性物質(zhì)以及生物活性大分子的特異性分離場(分離、濃縮等方法)。 2021328 3 反膠團萃取技術(shù)的特點 ? 反膠團萃取技術(shù)的突出優(yōu)點 ①有很高的萃取率和反萃取率并具有選擇性; ②分離、濃縮可同時進行,過程簡便; ③能解決蛋白質(zhì)(如胞內(nèi)酶)在非細胞環(huán)境中迅速失活的問題; ④表面活性劑往往具有細胞破壁功效,可直接從完整細胞中提取具有活性的蛋白質(zhì)和酶; ⑤成本低,溶劑可反復使用等。 ? 反膠團含水率 W ? W用水和表面活性劑的濃度之比來定義,即 W= c水 / c表 ? W是個非常重要的參數(shù) , W越大 , 反膠團的半徑越大 。 ? 將含有蛋白質(zhì)的水溶液直接注入到含有表面活性劑的非極性有機溶劑中去。 ? 改變水相條件 可實現(xiàn)反萃取。 ① 對于 Mr< 20210小分子蛋白質(zhì), pH> pI時,蛋白質(zhì)不能溶入膠團內(nèi),但在等電點附近,急速變?yōu)榭扇?。蛋白質(zhì)和微量的 AOT在靜電、疏水性等的相互作用下,在水相中生成了復合體而變性。 ? 萃取溶入膠團的蛋白質(zhì)的種類和相對分子質(zhì)量不同,分離場的特性(膠團平均直徑和含水率)幾乎不變。 ? 超臨界流體萃取,是適用面很廣的一門新型分離技術(shù)。超臨界 CO2( supercritical carbon dioxide, SCCO2)萃取技術(shù)適用于上述兩種情況。s相比,僅為后者的幾十分之一。 2021328 35 圖 226 超臨界 CO2流體萃取的三種基本流程 ( a)等溫法 T1= T2 p1> p2 1— 萃取釜; 2— 減壓閥; 3— 分離釜; 4— 壓縮機 ( b)等壓法 T1< T2 p1= p2 1— 萃取釜; 2— 加熱器; 3— 分離釜; 4— 高壓泵; 5— 冷卻器 ( c)吸附法 T1= T2 p1= p2 1— 萃取釜; 2— 吸附劑; 3— 分離釜; 4— 高壓泵 2021328 36 ? 上述工藝過程 原理可以用萘 的溶解度與超 臨界 CO2溫度 和壓力關(guān)系圖 加以說明 。由于天然產(chǎn)物組成復雜,近似化合組分多,因此單獨采用超臨界萃?。?SFE)技術(shù)常常滿足不了對產(chǎn)品純度要求。利用尿素可與脂肪酸化合物形成包合物,而且分子結(jié)構(gòu)和不飽和度不同的化合物與尿素的包合程度不同這一特性來實現(xiàn)組分的分離,可用于從魚油中提純 EPA和 DHA。例如:用 SFE從咖啡、茶中脫咖啡因;啤酒花萃取;從植物中萃取風味物質(zhì);從各種動植物中萃取各種脂肪酸、提取色素;從奶油和雞蛋中去除膽固醇等。由于在自然界中酶的催化反應(yīng)是在水相介質(zhì)中進行的,所以酶在 SCCO2介質(zhì)中的催化行為,引起人們的強烈興趣。此時如突然降壓,由于細胞內(nèi)外壓差較大,細胞劇烈膨大而發(fā)生脹裂。 ② SCCO2對細胞壁中的少量脂類有
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