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蛋白組學(xué)翻譯后修飾(完整版)

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【正文】癥治療的最重要的線索之一 ? 糖鏈比核酸和蛋白質(zhì)在結(jié)構(gòu)上更具有可變性，復(fù)雜性糖苷鍵類型 ? N連接：天冬酰胺序列子 AsnXThr/Ser ? O連接 :Ser/Thr ? 糖基磷脂酰肌醇錨 (glycosyl phophotidylinositol, GPI)：通常是一些細(xì)胞膜蛋白或細(xì)胞壁蛋白，通過肌醇和細(xì)胞膜磷脂層結(jié)合蛋白質(zhì)糖基化研究的基本目標(biāo) ? 尋找編碼糖蛋白的基因（即基因組信息）； ? 尋找糖基化位點(diǎn)（即糖基化位點(diǎn)信息）； ? 解析糖鏈及糖基化肽段的結(jié)構(gòu)（即結(jié)構(gòu)信息）； ? 研究糖基化的功能（即功能信息）蛋白質(zhì)組學(xué)分析糖蛋白 ? 糖含量 ? 糖苷鍵類型 ? 糖基化位點(diǎn) 糖含量的測(cè)定 ? 比較糖苷內(nèi)切酶作用前后糖蛋白的分子量核糖核酸酶 B中糖基含量測(cè)定糖苷鍵酶 F作用前糖苷鍵酶 F作用后糖苷鍵酶 F：切斷 N連接五糖核心最內(nèi)側(cè)的GlcNAcGlcNAc，剩一個(gè)GlcNAc 糖基化類型及其位點(diǎn)的分析 ? 糖苷內(nèi)切酶和蛋白酶結(jié)合的方法 ? 先用糖苷內(nèi)切酶消化，再用蛋白酶消化，通過分析糖苷酶作用前后 MS發(fā)生位移的肽段，即可確定含糖基化的肽段 ? 結(jié)合串聯(lián)質(zhì)譜，可進(jìn)一步分析糖基化肽段的氨基酸序列，從而發(fā)現(xiàn)糖基化位點(diǎn) 核糖核酸酶 B中糖基化位點(diǎn)的分析糖苷鍵酶 F作用前糖苷鍵酶 F作用后剩一個(gè) GlcNAc 氨基酸序列的測(cè)定 m/z= TSAASSSNYCNQM RQHMDSSTSAASSSNYCNQMMKSRNLTKDRCKPVNTFVHE 糖基化類型的分析 ? 糖蛋白進(jìn)行

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