【正文】 47. [5]國(guó)家藥典委員會(huì)、中華人民共和國(guó)藥典 三部 （ 2020） [6]曾光 流感大流行與應(yīng)對(duì)策略 [期刊論文 ]2020（ 02） [8]Kaverin NV,Webster of multicycle influenza virus growth in Vero(WHO)cells by loss of trypsyn .,1995,69:27002703. [9]李朝張偉 .哺乳動(dòng)物疫苗市場(chǎng)提升空間大 .醫(yī)藥經(jīng)濟(jì)報(bào) .. [10]Bulletin of the World Health Organization,1995,73(4):431435. 致謝 本論文是在孫洪雁老師 精心指導(dǎo)下完成的，并得到 長(zhǎng) 春生物制品所流感疫苗科室研發(fā)組組長(zhǎng)趙大鵬老師以及該所研究生劉旭光支持與協(xié)助，在此表示誠(chéng)摯的謝意！首先衷心感謝孫洪雁老師四 年來(lái)對(duì)我辛勤的培養(yǎng)和諄諄的教誨！在老 師身上我學(xué)會(huì)了如何將知識(shí)深入淺出，如何理論聯(lián)系實(shí)際，更讓 我體會(huì)到了 老師熱愛教育事業(yè)、心系學(xué)生、 心懷博大、嚴(yán)謹(jǐn)務(wù)實(shí)，兢兢業(yè) 業(yè)這些高尚的品格，讓我銘記并學(xué)習(xí)終生。因此，世界衛(wèi)生組織于《對(duì)流感滅活疫苗生產(chǎn)和檢定的建議》 (WHO 系列技術(shù)報(bào)告 )中增加了利用哺乳動(dòng)物細(xì) 胞進(jìn)行病毒分離和疫苗生產(chǎn)的內(nèi)容。各毒株在Vero 細(xì)胞內(nèi)的傳代譜系及檢測(cè)結(jié)果相見表。選擇適當(dāng)稀釋度的流感病毒液接種后，置34℃177。 細(xì)胞 Vero 細(xì)胞。 細(xì)胞 Vero 細(xì)胞。 流感病毒最佳感染量的研究 流感病毒 A1/； A3/ ； B/Brisbane/60/2020。為加快細(xì)胞培養(yǎng)流感疫苗技術(shù)的開發(fā)，美國(guó)政府決定投資11 億美元資助葛蘭素史克、 MedImmune、諾華、 DynPort、 Solvay 和巴斯德 6 個(gè)主要的流感疫苗開發(fā)新技術(shù)。而且在哺乳動(dòng)物細(xì)胞中生長(zhǎng)的流感病毒比雞胚培養(yǎng)分離的病 毒更接近于臨床樣本中的病毒。 針對(duì)采用雞胚培養(yǎng)技術(shù)生產(chǎn)的流感滅活疫苗存在的上述明顯不足，世界各國(guó)科學(xué)家在選用細(xì)胞培養(yǎng)流感病毒方面進(jìn)行了大量有益的嘗試，并取得了和大進(jìn)展。一項(xiàng)隨機(jī)對(duì)照試驗(yàn)顯示 ,疫苗接種者實(shí)驗(yàn)室確診流感的發(fā)生率下降 52%，另一項(xiàng)對(duì)生活在社區(qū)老年人的前瞻性隊(duì)列研究則顯示下降了 94%。 1. 1 .3 現(xiàn)用滅活疫苗的安全性 、效力和有效性 因全病毒疫苗會(huì)在兒童中引起不良反應(yīng)而未獲得廣泛使用，裂解和亞單位疫苗則有很好的耐受性 ,而且非常安全。對(duì)老年人的保護(hù)作用 ,可能需要＞ 1:80 的 HAI滴度。如有并發(fā)癥，恢復(fù)期就延長(zhǎng)，繼發(fā)性細(xì)菌性肺炎是最常見的流感并發(fā)癥，主要發(fā)生在老年人和某些慢性疾病患者。流感病毒由呼吸道分泌物傳播給易感人群，主要因子是由感染者打噴嚏、咳嗽或甚至交談產(chǎn)生的小顆粒氣溶膠。但是，動(dòng)物亞型的流感病毒偶爾直接引起人類流感。研究證實(shí) Vero 細(xì)胞培養(yǎng)的流感疫苗與雞胚培養(yǎng)的流感疫苗在誘導(dǎo)體液免疫應(yīng)答方面免疫原性相仿 ,而在誘導(dǎo)細(xì)胞免疫應(yīng)答方面 ,前者優(yōu)于后者。 1937 年雞胚培養(yǎng)流感病毒獲得成功 ，使大量生產(chǎn)疫苗成為可能，采用雞胚培養(yǎng)技術(shù)生產(chǎn)流感滅活疫苗已經(jīng)有 60 多年歷史，多年的臨床應(yīng)用表明其具有很好的免疫效果和臨床安全性，保護(hù)率一般為 75%～ 90%。 H1N1 亞型毒株的重現(xiàn)，造成人流感流行史上罕見的在人群中同時(shí)流行著兩個(gè)亞型（ H1N1 和 H3N2）毒株的局面。三個(gè)流感類型反映了對(duì)人類危害程度的順序， 其重要性在于可引起嚴(yán)重的發(fā)病率和死亡率，影響學(xué)校、公共服務(wù)機(jī)構(gòu)和各單位的正常工作。 第一章 緒論 流感概述 流感是一種嚴(yán)重威脅人類健康的世界范圍流行的呼吸道傳染病 ， 其流行病學(xué)歷史可追蹤到 12 世紀(jì) ,從文獻(xiàn)記載推測(cè) 1510 年可能就有過(guò)世界性大流行，盡管 1580 年已有詳細(xì)的描述，但人們普遍認(rèn)為 18891892 年間的流行病學(xué)資料更可信 并且有回顧性的病原學(xué)證據(jù)為甲型流感病毒 (A/H2N2)。 1997 年在香港引起禽流感的人群流行而轟動(dòng)世界， 1999 年末至 2020 年初，歐美及東南亞又爆發(fā)了更大規(guī)模的流感， 2020 年初以來(lái)高致病性禽流感病毒 H5N1 在亞洲的蔓延至今沿末發(fā)現(xiàn)人傳人的傳播途徑。流感病毒 12IgG1 和IgG2a/IgG2b 同型。 流感的發(fā)病原因與 臨床 癥狀 人類一般感染 H H2 或 H3 和 N1 或 N2 亞型病毒。乙型流感 病毒只感染人類。全身癥狀通常持續(xù) 3 天 ,偶爾見有高熱長(zhǎng)達(dá) 1 周。流感抗體可持續(xù)數(shù)月或數(shù)年，但在一些高危人群，抗體水平在疫苗接種后數(shù)月內(nèi)可開始降低。 流感 疫苗 的種類 一類為流感病毒滅活疫苗 ， 另一類為流感病毒減毒活疫苗，流感病毒滅活疫苗分三代 ，第一代為全病毒疫苗，為經(jīng)甲醛滅活的全病毒顆粒 早期粗制的全病毒疫苗接種后局部和全身反應(yīng)較強(qiáng) ! 60 年代初由于超速離心機(jī)和層析色譜技術(shù)的應(yīng) 用 制成后的全毒疫苗局部和全身反應(yīng)明顯減輕 ，但兒童使用時(shí)仍可出現(xiàn)不良反應(yīng) ，現(xiàn)已少用 ，免疫效果肯定 。對(duì)全世界文獻(xiàn)檢索顯示 ,疫苗接種 與各種罕見的事件呈弱相關(guān)。 1941 年美國(guó)首先批準(zhǔn)在人體使用流感疫苗 ； 1943 年在美國(guó)軍隊(duì)中使用，并證實(shí)有效 ； 1945 年雞胚生長(zhǎng)的全病毒流感滅活疫苗首次獲得批準(zhǔn)上市 ； 1947 年流感病毒的抗原漂移可降低流感病毒預(yù)防效果（ H1N1）； 1948 年世界衛(wèi)生組織全球流感檢測(cè)機(jī)構(gòu)，促進(jìn)定期更換流感病 毒疫苗株； 1970 年高生長(zhǎng)的重配株（ Reassortants）：常規(guī)用于疫苗生產(chǎn)； 1970 年開發(fā)成功流感病毒裂解滅活疫苗，并投放市場(chǎng)； 1970 年開發(fā)流感病毒減毒活疫苗； 1978 年單 擴(kuò)免疫擴(kuò)散試驗(yàn)（ SRID）用于疫苗接種量的定量試驗(yàn)（ Poteney Test）； 1980 年開發(fā)純化的血凝素疫苗（ HA Vaccines）（重組 DNA）； 1980 年疫苗佐劑的應(yīng)用； 1990 年開發(fā)細(xì)胞培養(yǎng)的流感病毒疫苗； 1990 年開發(fā) DNA 質(zhì)粒流感疫苗； 2020 年噴鼻型溫度敏感株減毒活疫苗投放市場(chǎng)； 2020開發(fā)病毒體（ virosome）亞單位疫苗； 納米流感病毒亞單位疫苗； 加佐劑病毒亞單位疫苗； PER C6 細(xì)胞流感疫苗； VERO 細(xì)胞流感疫苗； MDCK 細(xì)胞流感疫苗； 噴鼻型流感病毒疫苗； 廣 譜免疫原性流感疫苗； 或以上數(shù)種類型的搭配。 Vero 細(xì)胞培養(yǎng)的流感疫苗誘導(dǎo)的 T 細(xì)胞增殖應(yīng)答和 Th1 型細(xì)胞因子的釋放明顯高于雞胚培養(yǎng)的疫苗。針對(duì)流感疫苗的研究熱點(diǎn)主要是開發(fā)不同的佐劑（如MF59,Virosome 等）、不同的免疫途徑、不同的抗原組成及含量的安全性和免疫原性及保護(hù)效果等。 1℃培養(yǎng)3 天，收獲細(xì)胞培養(yǎng)物，檢測(cè)其血凝效價(jià)。結(jié)果見表 2。 1℃培養(yǎng) 3 天、 B 型病毒培養(yǎng) 4 天時(shí)流感病毒血凝效價(jià)達(dá)到最高。將收獲的病毒液以無(wú)菌方法合并，按不同分裝規(guī)格進(jìn)行分裝。 分裝 將收獲的病毒液以無(wú)菌方法合并，分裝。流感滅活疫苗已被廣泛使用了近 60 年。本實(shí)驗(yàn)過(guò)程中得到了老師的極大 支持和無(wú)私幫助， 以及同學(xué)對(duì)我的熱心幫助， 在此一并表示衷心的感謝！ 外文文獻(xiàn) Influenza and Influenza virus Abstract: Influenza caused by influenza virus type A、 B、 C,is important as a cause of severe morbidity and mortality that disrupts work in schools， the public services and elsewhere. During major epidemics many people require medical treatment or mortality often acpanies influenza epidemics， the vast majority affected being the they constitute the most rapidly increasing sector of the populations of many countriesprojections show that their numbers are likely to double by early in the next centurythe epidemiology of influenza can be expected to change accordingly， especially in the developed only means of influenza prophlaxis generally available at present is vaccination. Inactiva ted influenza vaccines have been in widespresd use for nearly 60 efficacy of immunization has varied according to 60 circumstances,but the differences of protection rates of 7590%have been reported may result from continuing antigenic variat