xxxx年分子生物學(xué)實驗(1)-文庫吧在線文庫
【正文】 實驗操作要求人人動手。分別取 8μl 外源片段酶切產(chǎn)物和 5μl pET28a egfp酶切產(chǎn)物于 %凝膠檢測酶切是否完全；按 25步純化、回收 DNA。若發(fā)現(xiàn)菌落太多或太少時，應(yīng)改變轉(zhuǎn)化反應(yīng)液的用量，重新涂布培養(yǎng)。 6. 37℃ 振蕩培養(yǎng)時間不宜過長，否則會出現(xiàn)很多的衛(wèi)星菌落和輕微的菌膜干擾。 ，濃度過高可能酶切不完全可以適當稀釋酶切。 最后比較培養(yǎng)好的平皿，可以看到： ① 含抗菌素培養(yǎng)皿上的受體對照組并沒有長出菌落，證明受體菌對抗菌素是敏感的，并證明在本實驗中沒有發(fā)生抗藥性突變。 3. 加試劑前，應(yīng)短促離心 10秒鐘，然后再打開管蓋，以防手套污染試劑及管壁上的試劑污染吸頭側(cè)面。 LB培養(yǎng)基平板。 實驗材料： 外源片段 DNA—— CHY基因的 PCR產(chǎn)物； 載體 —— pET28aegfp（含有綠色熒光蛋白 DNA片段）； BL21感受態(tài)細胞（鼎國公司）； 培養(yǎng)皿； 37℃ 搖床及培養(yǎng)箱。分子生物學(xué)實驗 實驗一 DNA重組實驗 要 求 實驗室內(nèi)禁止飲食、勿高聲談話、隨意走動。 實驗試劑： 限制性內(nèi)切酶 (EcoRI。 ： a. 取轉(zhuǎn)化反應(yīng)液 200 ?l，均勻涂布于含有 Amp抗性的
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