xxxx年分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)(1)-文庫(kù)吧在線文庫(kù)
【正文】 實(shí)驗(yàn)操作要求人人動(dòng)手。分別取 8μl 外源片段酶切產(chǎn)物和 5μl pET28a egfp酶切產(chǎn)物于 %凝膠檢測(cè)酶切是否完全；按 25步純化、回收 DNA。若發(fā)現(xiàn)菌落太多或太少時(shí)，應(yīng)改變轉(zhuǎn)化反應(yīng)液的用量，重新涂布培養(yǎng)。 6. 37℃ 振蕩培養(yǎng)時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng)，否則會(huì)出現(xiàn)很多的衛(wèi)星菌落和輕微的菌膜干擾。 ，濃度過(guò)高可能酶切不完全可以適當(dāng)稀釋酶切。 最后比較培養(yǎng)好的平皿，可以看到： ① 含抗菌素培養(yǎng)皿上的受體對(duì)照組并沒(méi)有長(zhǎng)出菌落，證明受體菌對(duì)抗菌素是敏感的，并證明在本實(shí)驗(yàn)中沒(méi)有發(fā)生抗藥性突變。 3. 加試劑前，應(yīng)短促離心 10秒鐘，然后再打開(kāi)管蓋，以防手套污染試劑及管壁上的試劑污染吸頭側(cè)面。 LB培養(yǎng)基平板。 實(shí)驗(yàn)材料： 外源片段 DNA—— CHY基因的 PCR產(chǎn)物； 載體 —— pET28aegfp（含有綠色熒光蛋白 DNA片段）； BL21感受態(tài)細(xì)胞（鼎國(guó)公司）； 培養(yǎng)皿； 37℃ 搖床及培養(yǎng)箱。分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn) 實(shí)驗(yàn)一 DNA重組實(shí)驗(yàn) 要 求 實(shí)驗(yàn)室內(nèi)禁止飲食、勿高聲談話、隨意走動(dòng)。 實(shí)驗(yàn)試劑： 限制性內(nèi)切酶 (EcoRI。 ： a. 取轉(zhuǎn)化反應(yīng)液 200 ?l，均勻涂布于含有 Amp抗性的
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